[发明专利]一种筛选高产D-泛解酸内酯水解酶菌种的方法有效
申请号: | 200910222166.7 | 申请日: | 2009-11-18 |
公开(公告)号: | CN101701246A | 公开(公告)日: | 2010-05-05 |
发明(设计)人: | 陈军;王涛;马成兵 | 申请(专利权)人: | 济南勤思医药科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/44 | 分类号: | C12Q1/44;C12Q1/04;C12R1/66;C12R1/77;C12R1/645 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 逯长明 |
地址: | 250100 山东省*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种筛选高产D-泛解酸内酯水解酶菌种的方法,包括初筛、复筛以及测定旋光值步骤,本发明所述方法筛选出的菌种产酶量高达0.5-10U/l,所产泛解酸内酯水解酶专一性强,可选择性不对称水解DL-泛解酸内酯中的D-泛解酸内酯,水解率高达24%-39.1%,水解产物的光学纯度达到85%e.e.以上,具有广泛的工业应用前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 筛选 高产 泛解酸 内酯 水解 菌种 方法 | ||
【主权项】:
一种筛选高产D-泛解酸内酯水解酶菌种的方法,包含以下步骤:(1)取待筛选菌种接种于初筛培养基进行培养,筛选透明圈的圈径比大于1的菌种备用,所述初筛培养基组成为:葡萄糖5~25g/l、蛋白胨2~8g/L、酵母膏2~8g/l、琼脂1.0~2.0g/L,花生油5~20g/L,调PH值为6~8;(2)取步骤(1)所得菌种接种于复筛培养基进行发酵,将发酵液抽滤后取抽滤清液备用,所述复筛培养基组成为:葡萄糖5~60g/L、尿素0.5~3g/L、磷酸二氢钾0.2~1.5g/l、氯化钙0.02~0.5g/L、蛋白胨3~8g/L、酵母膏3~8g/L,调PH值为7~8;(3)取步骤(2)所得抽滤清液加入到D-泛解酸内酯的水溶液中,抽滤清液质量以克计与D-泛解酸内酯水溶液的体积以毫升计之比为6∶100,用氨水控制PH值在7.0,1h后测定旋光值,选取旋光值大于0.05的菌种。
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