[发明专利]利用异相形核剂提高生物大分子结晶条件筛选成功率的方法无效
| 申请号： | 200910219492.2 | 申请日： | 2009-12-15 |
| 公开（公告）号： | CN101748107A | 公开（公告）日： | 2010-06-23 |
| 发明（设计）人： | 尹大川;郭云珠;刘永明;王燕;马晓亮 | 申请（专利权）人： | 西北工业大学 |
| 主分类号： | C12N9/36 | 分类号： | C12N9/36;C12N9/08;C07K14/415;C08F212/36;C08F212/08;C08K3/10;C08L25/06;H01F1/11 |
| 代理公司： | 西北工业大学专利中心 61204 | 代理人： | 黄毅新 |
| 地址： | 710072 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用异相形核剂提高生物大分子结晶条件筛选成功率的方法，采用无孔聚苯乙烯/二乙烯基苯微球、有孔聚苯乙烯/二乙烯基苯微球、四氧化三铁/聚苯乙烯磁性微球作为异相形核剂，采用蒸发扩散坐滴法结晶。由于采用“无孔聚苯乙烯/二乙烯基苯微球、有孔聚苯乙烯/二乙烯基苯微球、四氧化三铁/聚苯乙烯磁性微球”作为异相形核剂，实现了自动化蛋白质大分子的异相形核，同时，这种方法避免了吸入蛋白量不准确以及避免筛选形核剂引起的自动移液系统堵针现象。蛋白质结晶条件稀疏矩阵筛选成功率由现有技术的3.1％～13.5％提高到11.5％～34.3％。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 相形 提高 生物 大分子 结晶 条件 筛选 成功率 方法 | ||
【主权项】：
一种利用异相形核剂提高生物大分子结晶条件筛选成功率的方法，其特征在于包括以下步骤：(a)将异相形核剂用超纯水溶解，调节浓度至50mg/ml；(b)取步骤(a)所述混合溶液1μl，加入至结晶孔板小孔中，在30℃～60℃温控箱中放置2～6小时后取出，使水分蒸发，得到的结晶孔板为异相形核结晶筛选孔板；(c)配制生物大分子溶液；(d)将筛选试剂滴入步骤(b)得到的异相形核结晶筛选孔板中，将生物大分子溶液滴入所述结晶筛选孔板中，使筛选试剂与异相形核剂实现界面接触，获得具有异相形核剂的结晶溶液体系；(e)将步骤(c)得到的结晶溶液体系放置于温控环境中生长，取出在显微镜下观察，统计获得晶体的条件数目。
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