[发明专利]一种聚合酶链反应检测香蕉穿孔线虫的方法

摘要

一种聚合酶链反应检测香蕉穿孔线虫的方法，特异性引物由正向引物Rs-F、反向引物Rs-R组成，正向引物的序列是：5′-CAATACGATTCCGTCCTTTGGTGGGC-3′；反向引物的序列是：5′-GGAAGTGACTCCAATGGCGCAATGTG-3′。线虫的核酸提取方法提取效率高，提取的核酸纯度高。操作人员无需丰富的形态学知识和经验，采用普通PCR扩增仪，就可以使用本发明设计的引物及方法，快速准确地对香蕉穿孔线虫的幼虫、雌虫和雄虫，甚至单条香蕉穿孔线虫的幼虫、雌虫和雄虫进行检疫、检测和鉴定，反应时间可以缩减为70分钟，并且可以对单条香蕉穿孔线虫的幼虫进行PCR扩增反应。

主权项

1.一种聚合酶链反应检测香蕉穿孔线虫的方法，依次有以下步骤：1)合成引物，2)培养线虫，3)提取核酸，4)扩增反应，其特征在于：所述步骤1)合成引物是先设计一对由特异性正向引物Rs-F、特异性反向引物Rs-R组成的一对特异性引物，再按照特异性正向引物Rs-F、特异性反向引物Rs-R的序列合成特异性引物备用；所述正向引物Rs-F的序列是：5′-CAATACGATTCCGTCCTTTGGTGGGC-3′；所述反向引物Rs-R的序列是：5′-GGAAGTGACTCCAATGGCGCAATGTG-3′。