[发明专利]一种利用细菌发酵生产丙烯酸的方法

摘要

本发明提供了一种利用细菌发酵生产丙烯酸的方法，所用菌种为埃氏巨球形菌Megasphaera elsdenii，依次包括斜面培养，一级种子培养，扩大培养，收集菌体，丙烯酸的提取；与目前的常用方法相比，本发明所述的方法具有系统简单、成本低、工艺简单等优点，具有广泛的工业化发展前景，为化工基础原料丙烯酸找到了一条绿色的应用途径。

主权项

1、一种利用细菌发酵生产丙烯酸的方法，它包括如下步骤：(1)菌株选择：埃氏巨球形菌，中国微生物菌种保藏管理委员会保藏，保藏号为CGMCC，No1.2720；(2)斜面培养：麦芽汁液体培养基：麦芽汁体积百分浓度为7％，pH自然，灭菌121.3℃，20分钟；将上述筛选出的菌株，无菌条件下用接种环接1～2环于麦芽汁液体培养基33～40℃恒温培养8～24小时；(3)一级种子培养：将步骤(2)培养的菌株，无菌条件下用接种环接1～2环于发酵培养基中，33～40℃条件下，在摇床上振荡培养24～48小时，制得一级种子；(4)扩大培养：按体积比10％的接种量，接一级种子于发酵培养基中，添加四种体积百分浓度为0.015％～0.150％的电子受体水溶液之一，33～40℃条件下，在摇床上振荡培养24～96小时，制得二级发酵液；所添加的四种电子受体分别为：亚甲基蓝、联苯醌、甲萘醌和蒽醌，(5)收集菌体：取步骤(4)的发酵液，在80，000～10，000转/分条件下离心15-20分钟，收集沉淀菌体，并用质量百分浓度为0.7％的氯化钠溶液洗涤2～3次，湿菌体在4℃储存，备用；(6)丙烯酸的提取：选用氯仿萃取法进行菌体内丙烯酸的提取：将菌体用蒸馏水重悬，超声波破碎后，离心得粗丙烯酸溶液，之后按体积比为1∶1的比例加入三氯甲烷，45℃震荡萃取4小时，静置分层，取下层即为丙烯酸样品。