[发明专利]用β-半乳糖苷酶制备蔗糖生物传感器核微孔酶膜的方法

摘要

本发明公开了一种用β-半乳糖苷酶制备蔗糖生物传感器核微孔酶膜的方法，旨在提供一种只需要固定化两种酶即可获得蔗糖生物传感器核微孔酶膜的方法。包括下述步骤：称取β-环糊精溶于由低浓度NaOH与戊二醛组成的混合溶液中，之后，60℃加热处理直至晶体分散，并发生交联反应形成带有活性醛基的多聚β-环糊精；然后用蒸馏水洗涤上述成带有活性醛基的多聚β-环糊精，直至彻底除去多聚β-环糊精表面的NaOH，室温晾干后碾磨成基本上大小均匀的颗粒；将带有活性醛基的多聚β-环糊精颗粒作为固定材料与混合酶溶液充分混合后，25℃下反应80分钟使酶固定化；将上述固定化的酶均匀涂满两张核微孔膜表面制成三明治结构的蔗糖生物传感器核微孔酶膜。

主权项

1、一种用β-半乳糖苷酶制备蔗糖生物传感器核微孔酶膜的方法，其特征在于，包括下述步骤：(1)称取β-环糊精溶于由低浓度NaOH与戊二醛组成的混合溶液中，之后，60℃加热处理直至晶体分散，并发生交联反应形成带有活性醛基的多聚β-环糊精；然后用蒸馏水洗涤上述成带有活性醛基的多聚β-环糊精，直至彻底除去多聚β-环糊精表面的NaOH，室温晾干后碾磨成基本上大小均匀的颗粒；其中，低浓度氢氧化钠溶液中含有体积百分比为2.5-5％的戊二醛；β-环糊精、低浓度NaOH与戊二醛组成的混合溶液的质量体积比为7∶100；(2)将上述带有活性醛基的多聚β-环糊精颗粒作为固定材料与混合酶溶液充分混合后，25℃下反应80分钟使酶固定化；将上述固定化的酶均匀涂满两张核微孔膜表面，制成三明治结构的蔗糖生物传感器核微孔酶膜；其中，所述混合酶溶液为由0.003-0.007g葡萄糖氧化酶、1mL活力单位为3000unit/mL的β-半乳糖苷酶、0.01g牛血清白蛋白混合而成，上述带有活性醛基的多聚β-环糊精颗粒作为固定材料与混合酶溶液的质量体积比为10∶1。