[发明专利]用β-半乳糖苷酶制备蔗糖生物传感器核微孔酶膜的方法有效
| 申请号: | 200910067626.3 | 申请日: | 2009-01-06 |
| 公开(公告)号: | CN101463349A | 公开(公告)日: | 2009-06-24 |
| 发明(设计)人: | 庞广昌;李加鹏;吕瑜峰;陈庆森;胡志和 | 申请(专利权)人: | 天津商业大学 |
| 主分类号: | C12N11/12 | 分类号: | C12N11/12;C12N11/08;G01N27/327 |
| 代理公司: | 天津市三利专利商标代理有限公司 | 代理人: | 肖莉丽 |
| 地址: | 300134*** | 国省代码: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 半乳糖 制备 蔗糖 生物 传感器 微孔 方法 | ||
1.一种用β-半乳糖苷酶制备蔗糖生物传感器核微孔酶膜的方法,其特 征在于,包括下述步骤:
(1)称取β-环糊精溶于由低浓度NaOH与戊二醛组成的混合溶液中, 之后,60℃加热处理直至晶体分散,并发生交联反应形成带有活性醛基的多 聚β-环糊精;然后用蒸馏水洗涤上述带有活性醛基的多聚β-环糊精,直至 彻底除去多聚β-环糊精表面的NaOH,室温晾干后碾磨成基本上大小均匀的 颗粒;其中,低浓度氢氧化钠溶液中含有体积百分比为2.5-5%的戊二醛;β -环糊精、低浓度NaOH与戊二醛组成的混合溶液的质量体积比为7∶100;所 述低浓度NaOH的浓度为0.2Mol/L;
(2)将上述带有活性醛基的多聚β-环糊精颗粒作为固定材料与混合酶 溶液充分混合后,25℃下反应80分钟使酶固定化;将上述固定化的酶均匀涂 满两张核微孔膜表面,制成三明治结构的蔗糖生物传感器核微孔酶膜;其中, 所述混合酶溶液为由0.003-0.007g葡萄糖氧化酶、1mL活力单位为3000 unit/mL的β-半乳糖苷酶、0.01g牛血清白蛋白混合而成,上述带有活性醛 基的多聚β-环糊精颗粒作为固定材料与混合酶溶液的质量体积比为10∶1。
2.根据权利要求1所述的用β-半乳糖苷酶制备蔗糖生物传感器核微 孔酶膜的方法,其特征在于,带有活性醛基的多聚β-环糊精晾干后碾磨的 颗粒直径为0.8-1.2mm。
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