[发明专利]一种毕赤酵母基因工程菌发酵生产S-腺苷甲硫氨酸的方法

摘要

本发明公开了一种由毕赤酵母基因工程菌发酵生产S-腺苷甲硫氨酸的方法，包括将整合了外源表达基因S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的毕赤酵母基因工程菌种子液接种到发酵培养基中进行发酵培养，其特征在于：所述的毕赤酵母基因工程菌种子液接种到发酵培养基中的接种量是5～10(v/v)％；所述的发酵培养中的培养条件是28～32℃，pH3.0～8.0，溶氧水平保持30％～100％；培养至菌体密度为80～120g/L时，向发酵培养基中添加甲醇开始甲醇诱导，甲醇浓度控制在0.3～1.0(w/v)％，同时添加L-甲硫氨酸浓度控制在12.5～100mmol/L和添加硫酸铵控制铵离子浓度在300～600mmol/L。本发明的发酵生产S-腺苷甲硫氨酸的方法在100h发酵时间内积累SAM产量可达到11.6g/L以上，因此，发酵周期短、SAM产量高且操作简便，可用于SAM的大规模生产制备。

主权项

1、一种由毕赤酵母基因工程菌发酵生产S-腺苷甲硫氨酸的方法，包括将整合了外源表达基因S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因能够合成S-腺苷甲硫氨酸的毕赤酵母基因工程菌种子液接种到发酵培养基中进行发酵培养，发酵培养包括菌体生长倍增阶段和甲醇诱导重组蛋白表达阶段，其特征在于：所述的毕赤酵母基因工程菌种子液接种到发酵培养基中的接种量是5～10％(v/v)；所述的发酵培养中的培养条件是28～32℃，pH3.0～8.0，溶氧水平保持30％～100％；培养至菌体密度为80～120g/L时，向发酵培养基中添加甲醇开始甲醇诱导，甲醇浓度控制在0.3～1.0％(w/v)，同时添加L-甲硫氨酸浓度控制在12.5～100mmol/L和添加硫酸铵控制铵离子浓度在300～600mmol/L。