[发明专利]一种高密度乳酸细菌悬液的制备方法

摘要

本发明公开了一种高密度乳酸细菌悬液的制备方法，该方法是先将乳酸细菌包埋在海藻酸钙载体中；然后将此载体置于含0.5-2g CaCO3/100ml的牛奶中培养，让乳酸细菌在载体中生长繁殖(载体中乳酸细菌数量可达1011cfu/g)；最后将载体置于0.5-2g/100ml柠檬酸钠溶液中，即可获得高密度乳酸细菌悬液(乳酸细菌数量可达1011cfu/ml)。该方法操作简便、易行、设备要求低，易规模化推广应用。

主权项

一种高密度乳酸细菌悬液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)菌种活化：将乳酸细菌以0.5-5ml/100ml的接种量接入MRS液体培养基中，35℃-45℃培养12-24小时后，即得活化的乳酸细菌菌种；(2)菌体包埋：将2-4g/100ml的海藻酸钠溶液，经118℃-121℃，15-25min灭菌后与上述活化的乳酸细菌菌种液以0.5-2∶1体积比混合，即得混合液，然后将混合液滴加到已灭菌的0.1M CaCl2溶液中，固化0.5-1小时后，即可形成包埋好的乳酸菌载体颗粒，将此载体颗粒滤出，并用无菌水冲洗，即可得到包埋好的直径2-3mm的球形乳酸菌载体颗粒；(3)载体培养：将包埋好的直径2-3mm的球形乳酸菌载体颗粒，以6％(g/100ml)的接种量接入到加有1％(g/100ml)CaCO3的灭菌牛奶中，35℃-45℃ 100-150r/min培养12-24小时后，滤出载体，并用无菌水冲洗；(4)菌体释放：将用无菌水冲洗后的载体置于0.5-2％(g/100ml)柠檬酸钠溶液中，温度35℃-45℃，转速100-150r/min，时间0.5-2小时后，即可获得高密度乳酸细菌悬液。