[发明专利]用大麦麦芽蛋白制备抗菌蛋白的方法无效
申请号: | 200910013092.6 | 申请日: | 2009-08-10 |
公开(公告)号: | CN101613403A | 公开(公告)日: | 2009-12-30 |
发明(设计)人: | 赵长新;姜晓雷;董学艳;赵睿;李明达;姚峻 | 申请(专利权)人: | 大连工业大学 |
主分类号: | C07K14/415 | 分类号: | C07K14/415;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/14 |
代理公司: | 大连东方专利代理有限责任公司 | 代理人: | 毕 进 |
地址: | 116034辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明利用硫酸溶液提取大麦、经5天发芽的绿麦芽蛋白液,离心取上清,用碱调到中性后,采用硫酸铵分级沉淀,用精密排阻的透析袋透析至无硫酸根离子,加乙腈使乙腈与抗菌蛋白达到一定比例,离心去除沉淀,上清液用0.45um纤维滤膜除菌后,即可得抗菌蛋白液。抗菌蛋白含量达到31ug/ml时,把抗菌蛋白加到酵母培养液里面,培养8h后,抑制率为30%;加到乳酸菌培养液中,培养8h后,抑制率达到50%。本发明提取抗菌蛋白操作简便易行。 | ||
搜索关键词: | 大麦 麦芽 蛋白 制备 抗菌 方法 | ||
【主权项】:
1、一种用大麦麦芽蛋白制备抗菌蛋白的方法,其特征在于具体操作步骤如下:第一步、将大麦麦芽粉碎后,将麦芽粉末与0.05M硫酸以1∶3~7混合,冰浴提取2~4小时,每隔10~15分钟搅拌一次,8000r/min离心10分钟,取上清液,用氢氧化钠调到6.5~7.0,得到抗菌蛋白的粗提液;第二步、将抗菌蛋白的粗提液加入硫酸铵至饱和度达到30%,在4℃,10000r/min,离心10min后,去沉淀,上清液加入80%硫酸铵,在4℃,10000r/min离心10分钟后弃去上清液,将沉淀用水复溶;第三步、将上述复溶物加到精密排阻1000Da的透析袋中,透析至所得蛋白液用氯化钡检测无硫酸根离子,将上述蛋白液离心得上清液,冷冻干燥,加入乙腈水溶液复溶,离心弃除不容物,用0.45微米纤维滤膜过滤后即得抗菌蛋白液,其中乙腈水溶液为乙腈∶水=1∶3~5。
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