[发明专利]一种酪蛋白糖巨肽的制备方法

摘要

本发明提供了一种酪蛋白糖巨肽的制备方法，所述方法包括：酪蛋白溶于pH2.0～7.6的缓冲液中，加入酶于30～37℃酶解2～5小时后，迅速冷却至0～4℃，以无机酸调pH为4.5～4.8，并于0～4℃保温酸沉5～10小时，离心，取上清液用平均截留分子量为3000～5000的聚砜膜超滤浓缩，得到浓缩液1以去离子水稀释后继续以平均截留分子量为3000～5000的聚砜膜超滤，重复多次直至流出液电导小于500mscm^-1，截留液用平均截留分子量30000～100000的聚砜膜超滤浓缩，得到浓缩液2干燥得到所述酪蛋白糖巨肽。本发明的有益效果主要体现在：本发明以酪蛋白为原料在胃蛋白酶和/或胰蛋白酶作用下专一性、有限水解释放CMP，然后采用酸沉淀初步分离，结合膜超滤实现较高纯度的CMP分离，且工艺简单，易于操作，适宜工业化生产。

主权项

1. 一种酪蛋白糖巨肽的制备方法，所述方法包括：(1)酪蛋白溶于pH2.0～7.6的缓冲液中，加入酶于30～37℃酶解2～5小时，所述酶为胃蛋白酶、胰蛋白酶或胃蛋白酶和胰蛋白酶的混合酶，所述酶加入量以酶活计为400～800IU/g酪蛋白；(2)酶解结束后冷却至0～4℃，以无机酸调pH为4.5～4.8，并于0～4℃保温酸沉5～10小时，离心，取上清液进行下一步操作；所述无机酸为盐酸、三氯乙酸或高氯酸；(3)上清液用平均截留分子量为3000～5000的聚砜膜超滤浓缩，得到截留液1以去离子水稀释后继续以平均截留分子量为3000～5000的聚砜膜超滤，重复多次直至流出液电导小于500mscm-1，得到浓缩液用平均截留分子量30000～100000的聚砜膜超滤浓缩，得到截留液2干燥得到所述酪蛋白糖巨肽。