[发明专利]一种结核分枝杆菌快速检测系统及方法

摘要

本发明属于医学分子生物学检测技术领域，具体涉及一种结核分枝杆菌快速检测系统，包括结核菌液体培养基和结核分枝杆菌检测试剂条，结核分枝杆菌检测试剂条利用胶体金免疫层析技术对结核分枝杆菌特异性抗原MPB64进行特异性检测，该试剂条依次由样品垫、标记垫、延展垫、吸收垫组成。同时还公开了一种利用上述系统的检测方法，具体步骤如下：第一步：样本处理；第二步：接种后的液体培养基，放入到5％-10％CO2的培养箱中，35℃-38℃培养；第三步：样本在液体培养基中培养7-14天，添加到试剂条的样品垫上10min-15min读出检测结果。本发明具有成本低且检测特异性好、灵敏性高的优点。

主权项

1、一种结核分枝杆菌快速检测系统，包括结核菌液体培养基和结核分枝杆菌检测试剂条，其特征在于：结核分枝杆菌检测试剂条利用胶体金免疫层析技术对结核分枝杆菌特异性抗原MPB64进行特异性检测，该试剂条依次由样品垫、标记垫、延展垫、吸收垫组成：样品垫用于承接吸收样本；标记垫上含有胶体金标记的MPB64蛋白单克隆抗体，其制备过程如下：取胶体金标记MPB64蛋白单克隆抗体溶液，均匀含浸在标记垫上，然后将标记垫放入冷冻干燥机上冻干过夜，至完全干燥制得；延展垫上设有两个条带，一条是检测线T线，T线上固定MPB64蛋白另一单克隆抗体，其制备过程如下：将MPB64蛋白另一单克隆抗体用0.01M PBS稀释成浓度为2.5±0.1mg/ml的抗体溶液，用点膜仪以1μl/cm的量喷于延展垫上形成T线；一条是控制线C线，C线上固定有免疫球蛋白多克隆抗体，其制备过程如下：将免疫球蛋白多克隆抗体用0.01M PBS稀释成浓度为2±0.1mg/ml的抗体溶液，和T线间隔为0.8cm的位置，用点膜仪以1μl/cm的量将抗体溶液喷于延展垫上，形成C线，最后将设有T线和C线的延展垫置37℃烤箱中干燥30min，充分干燥制得；吸收垫用于拉动液体样本通过整个试剂条完成检测反应；上述样品垫、标记垫、延展垫、吸收垫依次设在底板上。