[发明专利]一种制备可重复利用的磁性纳米固定化酶的方法

摘要

本发明公开了一种制备可重复利用的磁性纳米固定化酶的方法，步骤是用共沉淀法制备表面吸附氨基的纳米四氧化三铁粉末；利用该表面基团，在交联剂的作用下与酶分子氨基作用，完成交联过程，再在外磁场作用下固液分离，回收固定化酶，得可重复利用的磁性纳米固定化酶。本发明的磁性纳米固定化酶具有高蛋白质载量，高酶活，便于回收，化学性质稳定的特点，适用于催化领域、环境污染物降解及能源物质的合成过程。

主权项

1.一种制备可重复利用的磁性纳米固定化酶的方法，步骤如下：(1)用共沉淀法制备纳米四氧化三铁粉末，所述共沉淀法是以氨水作为沉淀剂，氮气保护下加入氯化高铁与氯化亚铁，其中Fe³⁺∶Fe²⁺∶OH^-的摩尔比为2∶1∶8，化学反应的方程式是：反应后经冷冻干燥得表面吸附氨基的纳米四氧化三铁粉末；(2)将表面吸附氨基的纳米四氧化三铁粉末分散于蒸馏水中，超声分散得到浓度为0.15～0.5克四氧化三铁/毫升的磁流体；(3)取步骤(2)所述的磁流体，滴加其体积量0.2～2倍的质量浓度为25％的交联剂戊二醛，再加入其体积量0.05～2倍的质量浓度为0.01％～10％的酶溶液；(4)充分混匀后在25℃～30℃温度条件下，交联0.5～1.5小时；(5)在磁场强度为-150000z～150000z的外磁场作用下固液分离步骤(4)所述的交联产物，然后用蒸馏水洗涤固相产物3～4次，得可重复利用的磁性纳米固定化酶。