[发明专利]醛缩酶和编码醛缩酶的核酸以及它们的制备和使用方法

摘要

本发明涉及具有醛缩酶活性的多肽、编码这些多肽的多核苷酸、以及制备与使用这些多核苷酸和多肽的方法，所述醛缩酶包括丙酮酸醛缩酶，例如，但不限制于HMG和/或KHG醛缩酶。在一些实施方式中，本发明提供了具有醛缩酶活性的多肽、编码这些多肽的多核苷酸和制备与使用这些多核苷酸和多肽的方法，所述醛缩酶活性包括丙酮酸醛缩酶活性，例如，但不限制于HMG和/或KHG醛缩酶活性，包括热稳定性和耐热活性。本发明的多肽可以用于各种制药、农业和工业领域。在一些实施方式中，本发明提供了多肽和用于制备以下化合物的生物合成途：R-2-羟基-2-(吲哚基-3-甲基)-4-酮戊二酸(R-MP)和某些莫那亭的立体异构体(如R，R和R，S莫那亭)、它们的盐；以及某些莫那亭衍生物的立体异构体的衍生物(如R3R和S5R构型)、和它们的盐。

主权项

1、一种方法，该方法包括以多步式途径生成选自莫那亭、莫那亭衍生物、莫那亭和莫那亭衍生物的盐、以及它们的组合中的产物，其中，通过选自分离的或重组的多肽、或者该多肽的具有醛缩酶活性的片段或子序列中的一种或多种多肽来促进所述途径中的反应，所述分离的或重组的多肽含有如下氨基酸序列：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：16、SEQ ID NO：18、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：22、SEQ ID NO：24、SEQID NO：26、SEQ ID NO：28、SEQ ID NO：30、SEQ ID NO：32、SEQ ID NO：34、SEQ ID NO：36、SEQ ID NO：38、SEQ ID NO：40、SEQ ID NO：42、SEQ ID NO：44、SEQ ID NO：46、SEQ ID NO：48、SEQ ID NO：50、SEQID NO：52、SEQ ID NO：54、SEQ ID NO：56、SEQ ID NO：58、SEQ ID NO：60、SEQ ID NO：64、SEQ ID NO：66、SEQ ID NO：68、SEQ ID NO：70、SEQ ID NO：72、SEQ ID NO：74、SEQ ID NO：76、SEQ ID NO：78、SEQID NO：80、SEQ ID NO：82、SEQ ID NO：84、SEQ ID NO：86、SEQ ID NO：88、SEQ ID NO：90、SEQ ID NO：92、SEQ ID NO：94、SEQ ID NO：96、SEQ ID NO：98、SEQ ID NO：100、SEQ ID NO：104、SEQ ID NO：106、SEQ ID NO：108、SEQ ID NO：110、SEQ ID NO：112、SEQ ID NO：114、SEQ ID NO：116、SEQ ID NO：118、SEQ ID NO：120、SEQ ID NO：122、SEQ ID NO：124、SEQ ID NO：126、SEQ ID NO：128、SEQ ID NO：130、SEQ ID NO：132、SEQ ID NO：134、SEQ ID NO：136、SEQ ID NO：138、SEQ ID NO：140、SEQ ID NO：142、SEQ ID NO：144、SEQ ID NO：146、SEQ ID NO：148、SEQ ID NO：150、SEQ ID NO：152、SEQ ID NO：154、SEQ ID NO：156、SEQ ID NO：158、SEQ ID NO：160、SEQ ID NO：162、SEQ ID NO：164、SEQ ID NO：166、SEQ ID NO：168、SEQ ID NO：170、SEQ ID NO：172、SEQ ID NO：174、SEQ ID NO：176、SEQ ID NO：178、SEQ ID NO：180、SEQ ID NO：182、SEQ ID NO：184、SEQ ID NO：186、SEQ ID NO：188、SEQ ID NO：190、SEQ ID NO：192、SEQ ID NO：194、SEQ ID NO：196、SEQ ID NO：198、SEQ ID NO：200、SEQ ID NO：204、SEQ ID NO：206、SEQ ID NO：208、SEQ ID NO：210、SEQ ID NO：212、SEQ ID NO：214、SEQ ID NO：216、SEQ ID NO：218、SEQ ID NO：220、SEQ ID NO：222、SEQ ID NO：224、SEQ ID NO：226、SEQ ID NO：228、SEQ ID NO：230、SEQ ID NO：232、SEQ ID NO：234、SEQ ID NO：236、SEQ ID NO：238、SEQ ID NO：240、SEQ ID NO：242、SEQ ID NO：244、SEQ ID NO：246、SEQ ID NO：248、SEQ ID NO：250、SEQ ID NO：252、SEQ ID NO：254、SEQ ID NO：256、SEQ ID NO：258、SEQ ID NO：260、SEQ ID NO：262、SEQ ID NO：264、SEQ ID NO：266、SEQ ID NO：268、SEQ ID NO：270、SEQ ID NO：272、SEQ ID NO：274、SEQ ID NO：276、SEQ ID NO：278、SEQ ID NO：282、SEQ ID NO：284、SEQ ID NO：286、SEQ ID NO：288、SEQ ID NO：290、SEQ ID NO：292、SEQ ID NO：294、SEQ ID NO：296、SEQ ID NO：298、SEQ ID NO：300、SEQ ID NO：302、SEQ ID NO：304、SEQ ID NO：306、SEQ ID NO：308、SEQ ID NO：310、SEQ ID NO：312、SEQ ID NO：314、SEQ ID NO：316、SEQ ID NO：318、SEQ ID NO：320、SEQ ID NO：322、SEQ ID NO：324、SEQ ID NO：326、SEQ ID NO：328、SEQ ID NO：330、SEQ ID NO：332、或SEQ ID NO：334。