[发明专利]用环介导等温扩增方法检测河流弧菌的试剂盒及方法有效
申请号: | 200710026391.4 | 申请日: | 2007-01-18 |
公开(公告)号: | CN101020922A | 公开(公告)日: | 2007-08-22 |
发明(设计)人: | 任春华;胡超群;罗鹏;王青柏 | 申请(专利权)人: | 中国科学院南海海洋研究所 |
主分类号: | C12Q1/04 | 分类号: | C12Q1/04;C12Q1/68;G01N21/25 |
代理公司: | 广州科粤专利代理有限责任公司 | 代理人: | 赖汉光 |
地址: | 510301广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 涉及一种用环介导等温扩增方法检测河流弧菌的试剂盒及方法,试剂盒包括(1)LAMP反应液A,其中上游内引物为:gtgccttccacatcaccaggattttggtgacctgatcgtcacac;下游内引物为:tccgcagtgactggtcgagtcttttgaagccttggctgacttgg;上游外引物为:tcctgcaagacgaaatggc;下游外引物为:ctcactaaacgtcggtgctc;(2)BstDNA聚合酶B;(3)显色剂C;检测方法包括:细菌DNA的提取、河流弧菌的环介导等温扩增、显色检测;优点是快速、特异性强、灵敏度高,且成本低。 | ||
搜索关键词: | 用环介导 等温 扩增 方法 检测 河流 弧菌 试剂盒 | ||
【主权项】:
1.一种用环介导等温扩增方法检测副溶血弧菌的试剂盒,其试剂包括:(1)环介导等温扩增反应液A:含有10×Thermopol反应缓冲液、300-500uM dNTP、2-4mM硫酸镁、0.8-1.2uM上游内引物、0.8-1.2uM下游内引物、0.2-0.3uM上游外引物、0.2-0.3uM下游外引物和1-1.5M甜菜碱;其中10×Thermopol反应缓冲液含有200mM pH8.8的三羟基甲基氨基甲烷-盐酸、100mM氯化钾、100mM硫酸铵、20mM硫酸镁和1%曲拉通X-100;上游内引物为:gtgccttccacatcaccaggattttggtgacctgatcgtcacac;下游内引物为:tccgcagtgactggtcgagtcttttgaagccttggctgacttgg;上游外引物为:tcctgcaagacgaaatggc;下游外引物为:ctcactaaacgtcggtgctc。
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