[发明专利]蛋白功能的体外分子进化方法有效
| 申请号： | 200680050127.8 | 申请日： | 2006-11-17 |
| 公开（公告）号： | CN101351553A | 公开（公告）日： | 2009-01-21 |
| 发明（设计）人： | K·哈拉尔德松;M·卡尔松;A－C·M·哈格尔;C·菲雷布林;F·卡尔松;P·埃尔马克 | 申请（专利权）人： | 鳄鱼生物科学公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京戈程知识产权代理有限公司 | 代理人： | 程伟 |
| 地址： | 瑞典*** | 国省代码： | 瑞典;SE |
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| 摘要： | 本发明提供用于从母多核苷酸序列产生多核苷酸序列或序列的群体的方法，该方法包括步骤(a)提供多核苷酸分子的第一群体和多核苷酸分子的第二群体，第一和第二群体共同组成了母多核苷酸序列的正链和负链，(b)用核酸酶消化多核苷酸分子的第一和第二群体以产生多核苷酸片段，(c)将产生自正链的所述多核苷酸片段与产生自负链的片段接触和(d)扩增退火到彼此的片段以产生与母多核苷酸编码的那些氨基酸序列相比较，具有改变的氨基酸序列的一个或更多个蛋白基序，其中通过加入一个或更多个具有预决的变异性的寡核苷酸控制在步骤(d)中生产的至少一条多核苷酸分子的选择区域内的序列变异性程度，该寡核苷酸退火到位于母多核苷酸分子的3′或5′末端核苷酸间但排除3′或5′末端核苷酸的序列。本发明也提供通过本发明的方法获得的多核苷酸及被相同的多核苷酸编码的多肽。 | ||
| 搜索关键词： | 蛋白 功能 体外 分子 进化 方法 | ||
【主权项】：
1、用于从母多核苷酸序列产生多核苷酸序列或序列的群体的方法，该方法包括下述步骤(a)提供多核苷酸分子的第一群体和多核苷酸分子的第二群体，第一和第二群体共同组成母多核苷酸分子的正链和负链；(b)用核酸酶消化多核苷酸分子的第一和第二群体以生产多核苷酸片段；(c)将产生自正链的所述多核苷酸片段与产生自负链的片段接触(在允许片段退火的条件下)；和(d)扩增退火到彼此的片段以产生至少一条其序列不同于母多核苷酸分子的多核苷酸分子其中通过加入一条或更多条具有预决的变异性的寡核苷酸控制在步骤(d)中生产的至少一条多核苷酸分子的选择区域内的序列变异性程度，该寡核苷酸退火到位于母多核苷酸分子的3’和5’末端核苷酸间但排除3’和5’末端核苷酸的序列上。
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