[发明专利]一种制备人参皂甙Compound－K的方法

摘要

本发明属于药学领域，涉及一种制备人参皂甙Compound－K的方法。本发明采用霉菌好气性发酵技术、固定化细胞技术和固定化酶技术，直接以各种人参总皂甙作为底物，发酵转化制备Compound－K，并将其分离纯化，进行含量分析和结构确证。检测结果证实，本方法所得产物符合Compound K结构。本方法简便易操作，成本低，不需要花费人力和财力进行单体皂甙分离，转化率高达15％，易于制药或保健品工业产业化。

主权项

1.一种制备人参皂甙Compound-K的方法，其特征是采用霉菌好气性发酵技术、固定化细胞技术和固定化酶技术，直接转化人参总皂甙，生成Compound-K后，进行分离纯化，含量分析和结构确证，所述方法包括下述步骤：1)分离霉菌菌种；2)发酵摇瓶发酵：孢子悬浮液直接接入发酵培养基，培养60～72小时，人参总皂甙1～5％投料，进行转化，发酵罐发酵：孢子悬浮液接入种子培养基，将种子培养液按5-10％比例接入发酵罐，人参总皂甙1～5％投料，转化40～56小时；3)固定化收集菌体，海藻酸钠包埋法制备固定化细胞，纯化皂甙糖苷酶，以聚乙烯氧化物为载体制备固定化人参皂甙糖苷酶；4)提取分离酒精浸提，正丁醇萃取，活性炭脱色，浓缩制得浸膏，上硅胶柱分离，制备HPLC精制后甲醇-水重结晶；5)TLC，HPLC方法分析检测Compound K；6)核磁共振和单晶衍射技术Compound K结构鉴定。