[发明专利]胶体金和半导体荧光纳米粒子双标记快速免疫检测试纸

摘要

本发明涉及一种胶体金和半导体荧光纳米粒子双标记快速免疫检测试纸的制备和应用。本发明在传统的胶体金免疫检测的基础上，又将半导体荧光纳米粒子与目标抗原的一种抗体形成的复合物固定在检测带上。既通过肉眼对检测带进行初步定性或半定量检测，又由于胶体金对荧光纳米粒子具有荧光淬灭作用，通过荧光信号的变化对该检测带进行定量检测。本发明将胶体金免疫技术和荧光纳米标记技术同时运用到快速检测试纸上，既能进行定性检测同时又能做定量测定，并且实现一项多检，省时省力，节约成本。

主权项

1、一种胶体金和半导体荧光纳米粒子双标记快速免疫试纸的制备，步骤如下：(1)胶体金的制备，胶体金通过用柠檬酸三钠还原氯金酸制备得到，胶体金表面带有负电荷，粒径为13-60nm；(2)胶体金与目标抗原的一种抗体形成免疫复合物(I)，胶体金与目标抗原的一种抗体混合搅拌，带正电荷的抗体通过静电作用吸附在胶体金上；(3)免疫复合物(I)的固定与干燥，将所述的免疫复合物(I)用百德(Bio-Dot)仪的喷头喷到醋酸纤维素膜或硝酸纤维素膜上，形成胶体金垫，于36℃-37℃干燥待用；(4)半导体荧光纳米粒子的制备，半导体荧光纳米粒子为CdTe水溶性纳米粒子，其粒径为2-10nm；CdTe纳米粒子用镉盐-硫醇(MSH)复合物与离子型碲源NaHTe在100℃加热回流制得，控制回流时间，得到发光颜色不同的纳米粒子水溶胶；回流5分钟至2小时，得到绿色发光；回流3小时至8小时，得到黄色发光；回流9小时至14小时，得到橙色发光；回流15-20小时，得到红橙色发光；回流21-24小时，得到红色发光；(5)半导体荧光纳米粒子与目标抗原的另一种抗体形成免疫复合物(II)，半导体荧光纳米粒子与目标抗原的另一种抗体混合搅拌；(6)免疫复合物(II)的固定，将所述的免疫复合物(II)用百德(Bio-Dot)仪的喷头喷到醋酸纤维素膜或硝酸纤维素上形成检测带；(7)将抗抗体(二抗)喷到膜上形成对照带，用中性蛋白封闭对照带，在36℃-37℃下干燥待用。