[发明专利]灰树花多糖中淀粉含量的测定方法

摘要

本发明公开一种灰树花多糖中淀粉含量的测定方法，其方法包括脂溶性成分除去，可溶性糖类干扰物质除去，酶法分解淀粉，淀粉酶解检测，淀粉酶解液处理，斐林法测定还原糖含量等步骤。本发明的方法具有可操作性强、测定结果稳定可靠、测定结果的变异系数小、误差小、重现性高等优点。

主权项

1.一种灰树花多糖中淀粉含量的测定方法，由以下步骤组成：1)除去脂溶性成分：取烘干磨碎的待测多糖样品，分别称0.5～2克于6个离心杯中，分别加入30ml乙醚，充分振荡5～15分钟，以4000～5000转/分钟离心5～10分钟，弃去上清液，再加入30ml乙醚，如此重复离心3次；2)除去可溶性糖类干扰物质：向上述弃去上清液后的离心杯中加入50～60℃的80％乙醇30ml，充分振荡5～15分钟，以4000～5000转/分钟离心5～10分钟，弃去上清液，如此重复离心3次；然后再向弃去上清液后的离心杯中加入40～50℃蒸馏水30ml，在40～50℃恒温水浴中振荡60分钟，以4000～5000转/分钟离心5～10分钟，弃去上清液，再加入30ml蒸馏水，如此重复离心3次；3)酶法分解淀粉：向步骤2)离心弃去上清液后的杯中加入5ml蒸馏水，湿润并搅拌分离出的样品，再加入80～90℃蒸馏水40ml，搅匀后，置沸水浴中处理50～60分钟使淀粉糊化；之后冷却至50℃，加入1％的糖化酶液10ml，并立即加入pH4～6的磷酸盐缓冲液25ml，再加入甲苯5～7滴，混匀，封口，置于45～48℃条件下保温20～24小时进行淀粉酶解；4)淀粉酶解检测：取上述淀粉酶解液1滴加入碘溶液1滴进行酶解效果检测，若显蓝色、红色或紫色，即为淀粉酶解不完全，应再重复步骤3)的酶法分解淀粉，直至加碘溶液检测不显蓝色、红色或紫色为止，即为淀粉酶解完全；5)淀粉酶解液处理：将上述完全酶解的淀粉酶解液冷后，用6molL-1NaOH中和至中性，然后边搅动边逐滴加入饱和Pb(OAc)2溶液，直至淀粉酶解液无白色絮状沉淀为止；再向淀粉酶解液中逐滴加入饱和的硫酸钠溶液，直至不产生白包沉淀为止；以4000-5000转/分钟离心5-10分钟，将上清液转移入容量瓶，调节pH为9.1～9.6，以测定需求量定容；6)斐林法测定还原糖含量：取步骤5)中处理后的淀粉酶解液为样品，按GB5009.7-85《食品中还原糖的测定方法》直接滴定法，测定样品中可溶性糖的含量。