[发明专利]在甲醇酵母中高表达的耐高温植酸酶基因

摘要

本发明提供了一种在甲醇酵母中高表达的耐高温植酸酶基因以及它的制备方法，本发明采用PCR扩增技术合成耐高温植酸酶基因，并对其进行DNA改组，在原核表达质粒上构建突变植酸酶基因文库，通过突变植酸酶筛选获得耐高温植酸酶基因，通过改变基因的偏爱密码，使基因适合在酵母中表达，通过电击转化将耐高温的植酸酶基因整合到毕赤酵母中实现高表达。

主权项

1、一种具有如下编码的耐高温植酸酶基因：TCCAAATCCTGCGACACCGTTGACTTGGGATACCAATGCTCCCCTGCTACCTCCCACCTTTGGGGACAATAC  S  K  S  C  D  T  V  D  L  G  Y  Q  C  S  P  A  T  S  H  L  W  G  Q  YTCTCCATTCTTCTCTTTGGAGGACGAACTTTCCGTTTCCTCCAAATTGCCAAAAGATTGCAGAATCACCTTG  S  P  F  F  S  L  E  D  E  L  S  V  S  S  K  L  P  K  D  C  R  I  T  LGTTCAAGTCTTGTCCAGACACGGTGCTAGATACCCAACCTCCTCCAAATCCAAAAAATACAAAAAACTGATC  V  Q  V  L  S  R  H  G  A  R  Y  P  T  S  S  K  S  K  K  Y  K  K  L  IACTGCTATCCAAGCTAACGCTACCGACTTCAAAGGAAAATACACTTTCTTGAAAACCTACAACTACACCTTG  T  A  I  Q  AA  T  D  F  K  G  K  Y  T  F  L  K  T  YY  T  LGGAGCTGACGACTTGACCCCATTCGGAGAACAACAACTTGTCAACTCTGGAATCAAATTCTACCAAAGATAC  G  A  D  D  L  T  P  F  G  E  Q  Q  L  V  N  S  G  I  K  F  Y  Q  R  YAAAGCACTTGCTAGATCCGTTGTTCCTTTCATCAGAGCTTCTGGCTCCGACAGAGTTATCGCTTCTGGAGAA  K  A  L  A  R  S  V  V  P  F  I  R  A  S  G  S  D  R  V  I  A  S  G  EAAATTCATCGAAGGATTCCAACAAGCTAAATTGGCTGACCCTGGAGCTACCAACAGAGCTGCTCCTGCTATC  K  F  I  E  G  F  Q  Q  A  K  L  A  D  P  G  A  T  N  R  A  A  P  A  ITCCGTTATCATCCCAGAATCCGAAACCTTCAACAACACCTTGGACCACGGTGTTTGCACCAAATTCGAGGCT  S  V  I  I  P  E  S  E  T  FN  T  L  D  H  G  V  C  T  K  F  E  ATCTGAACTTGGAGACGAGGTCGAGGCTAACTTCACCGCTTTGTTCGCTCCTGACATCAGAGCTAGAGCTGAAS  E  L  G  D  E  V  E  A  N  F  T  A  L  F  A  P  D  I  R  A  R  A  EAAACACTTGCCTGGTGTCACCTTGACCGACGAAGACGTTGTTTCCTTGATGGATATGTGCCCCTTCGACACC  K  H  L  P  G  V  T  L  T  D  E  D  V  V  S  L  M  D  M  C  P  F  D  TGTTGCTAGAACCTCCGACGCTTCCCAACTTTCCCCATTCTGCCAACTTTTCACCCACAACGAATGGAAAAAA  V  A  R  T  S  D  A  S  Q  L  S  P  F  C  Q  L  F  T  H  N  E  W  K  KTACAACTACCTGCAGTCCTTGGGAAAATACTACGGATACGGAGCTGGAAACCCATTGGGACCAGCTCAAGGA  Y  N  Y  L  Q  S  L  G  K  Y  Y  G  Y  G  A  G  N  P  L  G  P  A  Q  GATCGGATTCGCCAACGAATTGATCGCTAGATTGACCAGATCCCCAGTTCAAGACCACACCTCCACTAACTCC  I  G  F  A  N  E  L  I  A  R  L  T  R  S  P  V  Q  D  H  T  S  TSACCTTGGTTTCCAACCCAGCTACCTTCCCATTGAACGCTACCATGTACGTTGACTTCTCCCACGACAACTCT  T  L  V  S  N  P  A  T  F  P  LA  T  M  Y  V  D  F  S  H  D  N  SATGATCTCCATCTTCTTCGCTTTGGGACTTTACAACGGAACTGAACCATTGTCCAGAACTTCCGTTGAATCC  M  I  S  I  F  F  A  L  G  L  YG  T  E  P  L  S  R  T  S  V  E  SGCTAAAGAACTTGACGGATACTCCGCTTCCTGGGTTGTTCCATTCGGTGCTAGAGCTTACTTTGAAACTATG  A  K  E  L  D  G  Y  S  A  S  W  V  V  P  F  G  A  R  A  Y  F  E  T  MCAATGCAAATCCGAAAAAGAACCATTGGTTAGAGTCTTGATTAACGACAGAGTTGTTCCATTGCACGGATGC  Q  C  K  S  E  K  E  P  L  V  R  V  L  I  N  D  R  V  V  P  L  H  G  CGACGTTGACAAATTGGGAAGATGCAAATTGAACGACTTCGTTAAAGGATTGTCTTGGGCTAGATCCGGTGGT  D  V  D  K  L  G  R  C  K  L  N  D  F  V  K  G  L  S  W  A  R  S  G  GAACTGGGGTGAATGCTTCTCCTAA  N  W  G  E  C  F  S  -