本发明公开了一种AS-PCR法检测抗嘧菌酯柑橘褐斑病菌的引物对和方法,该引物对包括上游引物和下游引物,上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。检测方法,包括以下步骤:(1)提取待测菌的DNA;(2)以提取的DNA为模板,利用所述的引物对进行AS-PCR扩增;(3)AS-PCR扩增产物进行凝胶电泳分离,染色;(4)结果判断。本发明的引物对是基于病菌对嘧菌酯的抗性分子机制设计的,特异性强;通过PCR参数的优化,建立了快速检测抗嘧菌酯的柑橘褐斑病菌的等位基因PCR法,该方法快速,灵敏,适合用于监测田间抗嘧菌酯菌系的发生和发展动态,为甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的合理使用提供依据。
本发明公开了一种顶头孢霉噻唑合成酶及其基因和应用。该基因是一种分离的核酸,其是(1)由序列表中SEQ ID No:1所示核苷酸序列组成的核酸;(2)编码如序列表中SEQ ID No:2所示氨基酸序列组成的蛋白质,一种分离的蛋白质,由序列表中SEQ ID No:2所示氨基酸序列组成。本发明还公开了一种包含如上所述核酸的重组表达载体,一种包含如上所述重组表达载体的重组表达转化体,上述重组表达载体以及重组表达转化体在制备头孢霉素C中的应用以及一种产头孢霉素C菌株的培养方法。本发明公开的顶头孢霉噻唑合成酶基因及其编码的蛋白质能够有效地调节头孢菌素C的合成速率和产量,具有很好的工业应用前景。