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[发明专利]一种检测碱基突变和甲基化分析的TJ-ARMS方法-CN202310419068.2在审
发明人：刘家兴;祝海宝;李嘉奇;黄智豪;籍雁竹;黄郁媚;王涛;邓荣浩;魏炽炬 -专利权人：汕头大学
申请日： 2023-04-18 - 公布日： 2023-08-01 - 主分类号： C12Q1/6848 文献下载
摘要：本发明公开一种检测碱基突变和甲基化分析的TJ‑ARMS方法，以模板片段结合区的3′末端第1个碱基为扩增决定位点，在进行引物的设计时，在所述引物的3′末端碱基处引入所需突变碱基，在所述引物的3′末端的第2个或第3个碱基处引入第一错配碱基，在所述引物的3′末端的第8～12个碱基处引入第二错配碱基。本发明拟解决单碱基突变检测的低灵敏度和特异性的问题。该技术不仅可以用于qPCR检测平台，同时还可以用于数字PCR平台。根据单碱基突变序列或甲基化位点设计特殊的ARMS引物和探针序列，建立新型TJ‑ARMS方法，从而以极高的灵敏度和特异性检测单碱基突变，亦可用于插入突变、缺失突变(indels)和甲基化分析。
一种检测碱基突变甲基化分析 tj arms 方法

[发明专利]血影紫杉醇及其制备方法与应用-CN202011308501.8有效
发明人： 魏炽炬;张薇 -专利权人：汕头大学
申请日： 2020-11-20 - 公布日： 2023-06-09 - 主分类号： A61K47/46 文献下载
摘要：本发明涉及一种血影紫杉醇及其制备方法与应用；本发明采用助水溶剂DEN作为PTX溶剂，极大提高PTX的溶解度；DEN与红细胞孵育，获得装载高浓度PTX的血影，且PTX以晶体形式存在；DEN显著提高PEG‑脂肪修饰血影细胞膜表面的效率，从而提高血影的生物相容性。步骤包括(1)制备压积红细胞；(2)用戊二醛固定红细胞；(3)用DEN与步骤(2)所得红细胞孵育，获得表面修饰PEG的血影紫杉醇；(4)对步骤(3)制得血影表面进行RGD修饰。本发明血影紫杉醇所含紫杉醇浓度为20g/L，且紫杉醇以晶体形式存在，具备缓慢释放药物的效果，血影表面PEG修饰防止吞噬细胞清除，提高生物相容性，延长循环时间，血影表面RGD修饰提高靶向新生血管内皮细胞和肿瘤细胞的能力。
紫杉醇及其制备方法应用

[发明专利]一种可追踪细胞分化发育的双重诱导mCreER系统及其建立与应用-CN202110141835.9有效
发明人： 魏炽炬;陈勉乔;田雄 -专利权人：汕头大学
申请日： 2021-02-02 - 公布日： 2023-04-14 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及一种可追踪细胞分化发育的双重诱导mCreER系统，包括mCreER和mTEVp蛋白；mCreER和mTEVp蛋白分别通过FRB蛋白、FKBP蛋白与定位于细胞膜上的CD8连接，相对应固定在细胞膜上；当加入雷帕霉素时，FKBP蛋白与FRB蛋白相互靠近并结合形成复合体，诱导mTEVp蛋白的切割，使mCreER从质膜释放，并在他莫昔芬作用下入核介导loxP位点重组，实现重组时间的可控性。本发明的双重诱导mCreER系统只有在诱导的条件下，Cre重组酶才能进入到细胞核中进行重组，避免了传统CreER系统自发重组现象。mCreER是膜蛋白，相对表达量比较低，经诱导进入细胞核后，能够减少Cre重组酶的脱靶现象，降低细胞毒性，提高组织特异性；实现对组织细胞更严密和精确的追踪，为细胞发育、组织再生及疾病治疗提供新思路。
一种追踪细胞分化发育双重诱导 mcreer 系统及其建立应用

[发明专利]经修饰的CrRNA片段及非洲猪瘟病毒试剂盒-CN202111593197.0有效
发明人：祝海宝;黄郁媚;籍雁竹;魏炽炬;黄戴纯;邓荣浩;胥立群 -专利权人：汕头大学
申请日： 2021-12-24 - 公布日： 2022-04-01 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种经修饰的CrRNA片段及非洲猪瘟病毒试剂盒。所述经修饰的CrRNA片段是在CrRNA片段的3’端增加了DNA修饰片段。经修饰的CrRNA片段能够进一步提高CRISPR/DX检测体系的反应速率，从而缩短检测时间。CRISPR/DX检测体系采用独特的双靶配合，将两个针对不同靶点的经修饰的CrRNA配合在一个反应体系当中，可提高整体反应速率。该CRISPR/DX检测体系与RPA扩增体系结合后能够构建CcMFD非洲猪瘟病毒的试剂盒。特别能够提高LBcas12a蛋白的切割效率，并可以提高靶点特异性。
修饰 crrna 片段非洲猪瘟病毒试剂盒

[发明专利]一种可表达VSV-G的重组毕赤酵母菌及其制备和应用-CN201610488661.2有效
发明人： 魏炽炬;王靖荃;董莹;刘鑫;李龙 -专利权人：汕头大学
申请日： 2016-06-29 - 公布日： 2019-06-18 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明涉及一种可表达VSV‑G的重组毕赤酵母菌及其制备和应用，重组毕赤酵母菌具有毕赤酵母菌KM71的形态、遗传和生理生化特征，且通过发酵能够表达VSV‑G。制备方法包括（1）采用PCR反应从质粒pLP/VSV‑G中克隆VSV‑G基因片段；（2）制备重组质粒pGM‑T‑VSV‑G；（3）制备重组质粒pPIC3.5K‑VSV‑G；（4）重组表达载体通过电转化法转化毕赤酵母KM71，利用组氨酸缺陷平板、遗传霉素平板及PCR筛选阳性重组子；（5）取阳性重组子进行培养诱导离心收集菌体并用酸性玻璃珠裂解。本发明采取的表达策略为胞内表达，有效消除了甲醇对细胞裂解液的污染。利用毕赤酵母表达系统制备VSV‑G蛋白，裂解液经过滤除菌后可直接用于细胞转染。为VSV‑G的大批量制备提供了基础，也对VSV‑G的研究及相应疾病治疗具有重要意义。
一种表达 vsv 重组酵母菌及其制备应用

[发明专利]一种表达融膜蛋白的细胞膜颗粒及其制备和应用-CN201510655854.8有效
发明人： 魏炽炬;林浩鹏;郑德锦 -专利权人：汕头大学
申请日： 2015-10-13 - 公布日： 2019-01-15 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种表达融膜蛋白的细胞膜颗粒及其制备和应用，在细胞膜颗粒上表达VSVG；细胞膜颗粒包裹生物大分子和细胞器；细胞膜颗粒不具有细胞核。制备方法：先用表达水疱性口炎病毒蛋白质粒对Ad293细胞瞬时转染；转染48h后用胰酶消化细胞，再离心3min；将所得细胞悬液置于针筒，并将针筒安装到已安置聚碳酸酯膜的针头式过滤器中，推动针管使细胞悬液从过滤器一边推出到另外一边，获得表达VSVG的细胞膜颗粒。表达融膜蛋白的细胞膜颗粒应用于传递生物大分子和细胞器中。本发明膜颗粒颗粒更大，能包裹生物大分子和线粒体，在功能上传递蛋白质和线粒体。不添加额外化学试剂，有效维持VSVG活性，提高膜颗粒进入内体后释放线粒体效率，从而提高线粒体转递效率。
一种表达膜蛋白细胞膜颗粒及其制备应用

[发明专利]多西环素在制备治疗或预防衰老性疾病的药物中的用途-CN201610427906.0在审
发明人： 魏炽炬;林浩鹏;王娜;潘峰;郑德锦 -专利权人：汕头大学
申请日： 2016-06-16 - 公布日： 2016-10-12 - 主分类号： A61K31/65 文献下载
摘要：本发明涉及多西环素在制备治疗和/或预防衰老性疾病的药物中的用途，其中所述多西环素以小于2μg/ml的剂量施用，所述衰老性疾病主要包括皮肤老化、神经退行性疾病、2型糖尿病、线粒体疾病和由高血脂与高胆固醇引发的动脉粥样硬化、冠心病等心血管疾病。多西环素在小于2μg/ml时可以减少成纤维细胞分泌的颗粒物，促进成纤维细胞的增值以及降低III型胶原蛋白的表达量；还可以减少细胞内的应激性颗粒，促进线粒体缺陷型细胞的增值；刺激胰岛beta细胞的胰岛素分泌以及肝脏细胞的胰岛素敏感性；最后，多西环素能与脂肪代谢调节分子SREBP特异性结合，抑制脂肪与胆固醇合成。
多西环素制备治疗预防衰老性疾病药物中的用途

[发明专利]DNA重组酶Cre基因的改造、重组蛋白表达方法及应用-CN201110297620.2无效
发明人： 魏炽炬;范文竹;李迪峥 -专利权人：汕头大学
申请日： 2011-09-27 - 公布日： 2013-04-03 - 主分类号： C12N9/00 文献下载
摘要：本发明涉及DNA重组酶Cre氨基酸序列的改造和应用，其是通过点突变技术将Cre基因第173位的精氨酸改变为组氨酸，上述Cre突变体由一个大鼠胰岛素启动子（RIP）控制其在胰岛beta细胞中的表达。另外，本发明对Cre突变体在胰岛beta标记中的应用进行了初步研究，利用Cre突变体及其作用位点loxP、CMV启动子、绿色荧光报告基因（EGFP）、及红色荧光报告基因（DsRed），组装成一个双质粒的胰岛素阳性细胞的标记系统。
dna 重组 cre 基因改造蛋白表达方法应用

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