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[发明专利]一种双胞旋沟藻细胞核增殖抗原基因及其应用-CN202110018155.8有效
发明人：黎双飞;张惠萍;陈辉蓉;杨雪薇 -专利权人：深圳大学
申请日： 2021-01-07 - 公布日： 2023-08-25 - 主分类号： C12N15/31 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种双胞旋沟藻细胞核增殖抗原基因及其应用。其中，所述细胞核增殖抗原基因扩增长度为430bp，其核苷酸序列为SEQ NO.1。在应用方面，构建该基因的氨基酸序列(SEQ ID NO:2)系统发育树，可为研究甲藻的系统发育提供蛋白质方面的证据，探索该基因在溶藻菌上清液胁迫下的表达量变化，为研究非生物胁迫响应打下基础，进而为探究海洋藻类的死亡机理提供基因来源与技术支持。
一种双胞旋沟藻细胞核增殖抗原基因及其应用

[发明专利]一种基于微生物制剂的黑臭水体原位修复方法及微生物制剂-CN201811278544.9有效
发明人：黎双飞;柳新月;杨雪薇;陈辉蓉;王科举;刘良叙 -专利权人：深圳大学
申请日： 2018-10-30 - 公布日： 2022-06-10 - 主分类号： C02F3/34 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于微生物制剂的黑臭水体原位修复方法及微生物制剂，是以微生物为主的组合生物修复方法，包括清淤构建生态护岸、曝气复氧、投加高效微生物制剂、悬浮填料等技术的组合应用。微生物制剂是本原位修复方法的核心，向水体内投加具有高效降解能力的微生物制剂，微生物制剂是由不同类型的微生物组成，依托高密度菌群的协同作用，对水体中的有机污染物进行转移、转化和降解，将水体中的各种有机污染物分解为二氧化碳、氮气、硝酸盐、硫酸盐等，并通过水体生态群落的食物链形成物质和能量循环，增强水体的自净能力。
一种基于微生物制剂水体原位修复方法

[发明专利]检测甲藻细胞凋亡的方法-CN201910246905.X有效
发明人： 陈辉蓉;吴梓涵;黎双飞;胡章立;陈秀锐;李城彦 -专利权人：深圳大学
申请日： 2019-03-29 - 公布日： 2022-04-05 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测甲藻细胞凋亡的方法。所述检测甲藻细胞凋亡的方法包括步骤有：对甲藻细胞进行凋亡处理；对凋亡处理的甲藻细胞进行浓缩处理；对甲藻细胞浓缩液进行AnnexinV、PI染色处理；对染色甲藻细胞液进行成像流式检测处理；依据AnnexinV/PI散点图计算甲藻细胞的凋亡率。本发明检测甲藻细胞凋亡的方法通过成像流式细胞仪能够有效区分AnnexinV荧光、碘化丙啶荧光、叶绿素自发荧光，从而直接定量测出待测甲藻细胞中发生凋亡的甲藻细胞个数，从而得出细胞早期凋亡率，而且还具有定量可靠，分析准确，结果精度高等优点。
检测细胞方法

[发明专利]一种溶藻巴西弧菌H115的培养方法-CN201610964185.7有效
发明人：黎双飞;陈辉蓉;刘燕;王月;胡章立;徐颖 -专利权人：深圳大学
申请日： 2016-10-28 - 公布日： 2022-02-18 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：一种溶藻巴西弧菌H115的培养方法，涉及一种溶藻巴西弧菌的培养方法。是要解决现有溶藻巴西弧菌H115的培养方法获得的菌株的溶藻效果差的问题。方法：一、菌株活化：将保存的巴西弧菌H115菌种涂布到培养基平板上培养，用接种环转接至液体培养基中进行活化；二、将活化获得的菌种稀释至OD600值为1，接种至装有100mL扩增培养基的250mL三角瓶中培养。培养得到的巴西弧菌H115，其溶藻率可达到100％，扩大培养后在4h时溶藻率即达到100％，与摇瓶培养相比溶藻所需时间大大缩短，产生了预料不到的技术效果。本发明用于培养巴西弧菌H115。
一种巴西弧菌 h115 培养方法

[发明专利]一种黄杆菌、分泌物的应用及制备方法-CN201711318256.7有效
发明人： 陈辉蓉;童晶;胡章立;黎双飞;王立岩 -专利权人：深圳大学
申请日： 2017-12-12 - 公布日： 2021-11-09 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明提供一种黄杆菌及黄杆菌分泌物的制备方法和应用，涉及微生物技术领域。其中，黄杆菌的保藏编号为M2017262。利用黄杆菌的分泌物具有溶藻活性，可以对赤潮中的藻类起到抑藻和杀藻的作用，为治理赤潮起到良好的作用。
一种杆菌分泌物应用制备方法

[发明专利]一种吡咯-2-羧酸的应用及制备方法-CN201711318227.0有效
发明人：王立岩;伍嘉慧;陈辉蓉;童晶;胡章立 -专利权人：深圳大学
申请日： 2017-12-12 - 公布日： 2021-03-30 - 主分类号： C12P17/10 文献下载
摘要：本发明提供一种吡咯‑2‑羧酸的应用及制备方法，涉及化合物制备技术领域。其中，吡咯‑2‑羧酸应用于抑藻或杀藻中。利用吡咯‑2‑羧酸抑制赤潮中藻类的生长，使藻类细胞停止生长，甚至杀灭藻类细胞，以对大量爆发的赤潮进行治理。
一种吡咯羧酸应用制备方法

[发明专利]对羟基苯甲酸的提取方法及应用-CN201810454298.1有效
发明人： 陈辉蓉;童晶;伍嘉慧;胡章立;黎双飞;王立岩 -专利权人：深圳大学
申请日： 2018-05-14 - 公布日： 2020-11-06 - 主分类号： C07C51/42 文献下载
摘要：本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种对羟基苯甲酸的提取方法及应用。包括如下步骤：将海洋细菌Arenibacter sp.6A1接种到发酵培养基中进行发酵培养，得到发酵液；调节所述发酵液至pH＝3～4，然后进行萃取处理得到萃取物；将所述萃取物溶解，依次进行凝胶柱层析和HPLC分离，得到对羟基苯甲酸；其中，所述HPLC分离的条件包括：用甲醇/水混合溶剂进行梯度洗脱，检测波长为254nm，收集液相峰的时间为25min。该方法最终得到高纯度、具有溶藻活性的羟基苯甲酸，为羟基苯甲酸的工业化生产提供很好的基础。
羟基苯甲酸提取方法应用

[发明专利]弧菌菌株及其用途-CN201510409499.6有效
发明人：胡章立;胡平;陈辉蓉 -专利权人：深圳大学
申请日： 2015-07-13 - 公布日： 2020-08-07 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种保藏编号为CCTCC‑M2015093的弧菌菌株，该菌为溶藻弧菌。其发酵液具有极强的溶藻活性，而且，利用其发酵液对斑马鱼、丰年虾等进行急性毒理实验显示其没有明显的生物毒性，可大规模用于赤潮防治。
弧菌菌株及其用途

[发明专利]用于脱氮的复合微生物菌剂及其制备方法和应用-CN201911178128.6在审
发明人：黎双飞;陈辉蓉;杨雪薇;柳新月;徐芳芳;欧阳潦;吴圳添 -专利权人：深圳大学
申请日： 2019-11-27 - 公布日： 2020-02-28 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于脱氮的复合微生物菌剂及其制备方法和应用，该用于脱氮的复合微生物菌剂，包括不动杆菌MZ5、不动杆菌MZ16和假单胞菌MZ17，所述不动杆菌MZ5（Acinetobactersp.MZ5）、保藏编号为CCTCC No:M2019796；不动杆菌MZ16（Acinetobactersp.MZ16）、保藏编号为CCTCC No:M2019797；假单胞菌MZ17（Pseudomonas sp.MZ17）、保藏编号为CCTCC No:M2019798，复合微生物菌剂可以直接投加到水体中，相对于单个菌种的适应能力更强，且微生物组合的每个菌种联合发挥作用，能够增强复合微生物菌剂的稳定性，且可以在有氧环境下发挥作用，极大提高了脱氮效率。
用于复合微生物及其制备方法应用

[发明专利]溶藻微生物微球及其制备方法和应用-CN201910621077.3在审
发明人：黎双飞;王科举;陈辉蓉;杨雪薇;徐芳芳;胡章立;吴圳添 -专利权人：深圳大学
申请日： 2019-07-10 - 公布日： 2019-09-24 - 主分类号： C12N11/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种溶藻微生物微球及其制备方法和应用，步骤包括：将溶藻微生物接种到配制好的培养基中进行培养，得到活化的溶藻微生物的活化菌液，溶藻微生物为巴西弧菌H115或黄杆菌；将溶藻微生物的活化菌液加入离心管中进行离心，弃去上清液；接着向离心管中滴入无机溶剂进行重新悬浮，得到溶藻微生物的重悬菌液；在步骤(2)中的离心管中分别加入30‑80目的玉米芯粉末或秸秆粉末，再加入固定化材料进行混合得到混合菌液；在步骤(3)得到的混合菌液中滴入质量分数为2％‑4％的CaCl₂溶液进行交联形成溶藻微生物微球，并将其应用在海洋赤潮控制与治理中。本发明的溶藻微生物微球具有良好的悬浮性和稳定性，且具备溶藻效率高、环境适用性强、无二次污染风险等优点。
溶藻微生物微球微生物离心管制备方法和应用混合菌液活化菌液滴入固定化材料环境适用性微生物接种无二次污染玉米芯粉末海洋赤潮秸秆粉末无机溶剂质量分数重悬菌液培养基黄杆菌上清液悬浮性弧菌活化交联配制悬浮应用治理

[发明专利]一种微生物生长刺激剂及其制备方法-CN201811277527.3在审
发明人：黎双飞;柳新月;杨雪薇;陈辉蓉;王科举;刘良叙 -专利权人：深圳大学
申请日： 2018-10-30 - 公布日： 2019-02-12 - 主分类号： C02F3/34 文献下载
摘要：本发明公开了一种微生物生长刺激剂及制备方法，用于黑臭水体的修复，所述微生物生长刺激剂由氧化剂和刺激剂组成；所述的氧化剂为过氧化钾或硝酸钾中的一种或两种；所述的刺激剂含有配制有机酸、微生物碳源、维生素、无机盐、微量元素等组分。向黑臭水体投加本发明提供的微生物生长刺激剂，有助于黑臭水体微生态系统向着有利于黑臭水体污染修复的方向演变，能够刺激黑臭水体微生物群落多样性提高，被修复水体污染物降解率显著高于未投加的情况，可从根本上解决底泥污染对上覆水体的影响，为黑臭水体的治理提供了优秀得解决方案。
微生物生长刺激剂水体氧化剂刺激剂制备硝酸钾水体污染修复无机盐修复群落多样性水体微生物水体污染物微生态系统微生物碳源底泥污染过氧化钾微量元素降解率有机酸维生素配制刺激治理

[发明专利]一种实验室用细菌固定化方法-CN201710257505.X在审
发明人：黎双飞;王月;赵敏雅;胡章立;徐颖;陈辉蓉 -专利权人：深圳大学
申请日： 2017-04-19 - 公布日： 2017-06-13 - 主分类号： C12N11/08 文献下载
摘要：一种实验室用细菌固定化方法，涉及一种细菌固定化方法。本发明是要解决现有方法中菌体包埋量较低，细菌固定化颗粒的稳定性差，连续反应系统难以长期运行的问题。方法一、进行细菌培养得到菌液；二、将菌液离心，获得用于固定化的菌体；三、将菌体用生理盐水分散，加入聚乙烯醇溶液混合，获得PVA‑菌体混合溶液；四、使用细菌固定化反应装置进行反应，得到细菌固定化颗粒；五、将步骤四得到的细菌固定化颗粒放入冰水中静置，即完成。本发明方法显著提高了固定化颗粒中菌体的包埋量，可达到15～20g/L，而且能够很好的成型，不破裂、不粘连。固定化颗粒稳定性好，此细菌固定化颗粒用于连续发酵系统时，系统可以稳定至少2个月。本发明用于细菌固定化。
一种实验室细菌固定方法

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