本发明公开了水解酶基因ipcH及其编码的蛋白质和应用。本发明水解酶基因ipcH全长为1983bp,序列如SEQ ID NO.1所示,其编码产物水解酶IpcH含660个氨基酸,序列为SEQ ID NO.2。IpcH能降解氨基甲酸酯类杀虫剂异丙威。水解酶IpcH可用于降解水体、土壤中异丙威的残留,具有非常重要的理论和应用价值。
本发明公开了用于提高枯草芽孢杆菌自发突变频率的质粒。所述选自pUS20D9M,pUS20XP1以及pUS20XP2中的任意一个;其中,质粒pUS20D9M序列如SEQ ID NO.1所示,质粒pUS20XP1序列如SEQ ID NO.2所示,质粒pUS20XP2序列如SEQ ID NO.3所示。枯草杆菌是一种重要的微生物。很多育种工作需要提高枯草杆菌的基因突变频率。然而,目前尚缺乏理想的控制枯草杆菌自发突变频率的方法。本发明借助CRISPRi技术和过表达易错型DNA聚合酶的方法,提高宿主的自发突变频率(最高达5128倍)。整个操作可通过质粒的转化和消除实现,无需对宿主进行基因敲除。