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[发明专利]一种多酶联产催化合成海藻糖的枯草芽孢杆菌及其应用-CN202310757567.2在审
发明人：付晓平;郑宏臣;柏文琴;宋诙;杨俊;徐健勇;甄杰 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2023-06-26 - 公布日： 2023-10-10 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明于生物技术领域，具体涉及一种多酶联产催化合成海藻糖的枯草芽孢杆菌及其应用。其通过在枯草芽孢杆菌中同时表达普鲁兰酶、海藻糖合酶、海藻糖水解酶的方法，实现了这三种酶在同一个菌株中不同强度的表达。具体地将普鲁兰酶基因表达元件插入至枯草芽孢杆菌基因组中表达，海藻糖合酶与海藻糖水解酶分别用不同的质粒表达的重组菌株其海藻糖转化率与基因组上未整合普鲁兰酶基因的重组菌株提高23%，为进一步实现三个酶的稳定表达，将海藻糖合酶和海藻糖水解酶表达元件插入至枯草芽孢杆菌基因组中表达。
一种联产催化合成海藻枯草芽孢杆菌及其应用

[发明专利]一种提高海藻糖转化率的方法-CN202310754976.7在审
发明人： 郑宏臣;付晓平;柏文琴;宋诙;杨俊;徐健勇;郑雯 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2023-06-26 - 公布日： 2023-10-10 - 主分类号： C12P19/16 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高海藻糖转化率的方法。在海藻糖合酶和海藻糖水解酶双酶法合成海藻糖的过程中，通过添加特定普鲁兰酶，在接近中性pH值条件下，其海藻糖的转化效率提高50%。因此，本发明提供了一种温度和pH性能优良的普鲁兰酶用于生产海藻糖的方法，具有较广的应用价值。
一种提高海藻转化方法

[发明专利]碳水化合物结合结构域CBM68及其应用-CN202110923682.3有效
发明人：付晓平;郑宏臣;宋诙;赵兴亚;杨一凡;徐健勇 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2021-08-12 - 公布日： 2023-08-04 - 主分类号： C12N9/24 文献下载
摘要：本发明公开了碳水化合物结合结构域CBM68及其应用。本发明提供了蛋白质，为如下1)‑2)中至少一种：1)序列表中序列2第1‑109位氨基酸残基的蛋白；2)将1)所示蛋白的氨基酸末端添加标签序列得到的蛋白。本发明克隆出CBM68蛋白，该蛋白可融合目标蛋白提高目标蛋白在宿主细胞中的表达量，较其他常见的分子标签在目标蛋白表达量提高方面具有极大的优势。CBM68在目标蛋白表达过程中将部分目标蛋白分泌到细胞外，这也说明CBM68有一定信号肽的功能。
碳水化合物结合结构 cbm68 及其应用

[发明专利]一株枯草芽孢杆菌及其应用-CN202210834070.1在审
发明人：柏文琴;郑宏臣;谭明;郑雯;付晓平;赵兴亚 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2022-07-14 - 公布日： 2023-04-25 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一株枯草芽孢杆菌在糖基化修饰中的应用。具体而言，本发明从环境中筛选得到的一株枯草芽孢杆菌，以及使用该枯草芽孢杆菌进行糖基化修饰。该菌株保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.19322，本发明以甜菊糖和莱胞迪苷A为底物，添加该枯草芽孢杆菌发酵上清液经12 h转化反应后，生成莱胞迪苷E，产率最高达78.9%；经过30h转化反应后，生成莱胞迪苷D，产率最高达39.7%。
枯草芽孢杆菌及其应用

[发明专利]一种提高织物毛效的生物复合物及其制备方法与应用-CN202010233723.1有效
发明人：宋诙;付晓平;郑雯;王梦超;郑宏臣;徐健勇 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2020-03-27 - 公布日： 2023-02-28 - 主分类号： D06M16/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高织物毛效的生物复合物及其应用。本发明的生物复合物包含自行筛选得到的枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)SH10、枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)SH12。这些芽胞杆菌发酵液单独或一起与淀粉酶、果胶酶、脂肪酶、表面活性剂混合形成的生物复合物，对纺织物进行退浆精炼后的退浆率可达98％，不同的织物毛效提高约1～7cm，能减少染色助剂的用量，提高后续染色工艺上色效果。同时替代传统工艺中的烧碱，节约大量能耗、水耗及废水处理费用等。应用本发明的生物复合物在纺织工艺染前处理中，对退浆、除腊、去除棉籽壳等纺织工艺处理难题有比较全面的处理优势，同时替代烧碱，环境友好。
一种提高织物生物复合物及其制备方法应用

[发明专利]一种低温淀粉酶及其在纺织中的应用-CN202211419212.4在审
发明人：付晓平;柏文琴;郑宏臣;徐健勇 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2022-11-14 - 公布日： 2023-02-03 - 主分类号： C12N9/26 文献下载
摘要：本发明通过生物信息学分析，将低温淀粉酶与中温淀粉酶的不同区域之间重组，改造成新型的低温淀粉酶，重组改造后淀粉酶比低温淀粉酶CPA、PPA酶活力及温度稳定性均有提高，最适温度比中温度淀粉酶降低。其中，获得最优的重组改造的RPA339淀粉酶，其酶活力在室温条件放置16h仍保留82%。因此改造后获得淀粉酶更适合应用于纺织领域，尤其是印染前处理的冷堆工艺中。
一种低温淀粉酶及其纺织中的应用

[发明专利]一种利用出芽短梗霉生产中分子量普鲁兰多糖的方法-CN202211106612.X有效
发明人：柏文琴;马延和;宋诙;陈淑宇;高佳琪;付晓平;陈利梅;谭明;郑宏臣;徐健勇 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2022-09-13 - 公布日： 2022-12-23 - 主分类号： C12N1/15 文献下载
摘要：本发明对保藏编号为CGMCC NO.23807的出芽短梗霉敲除或弱化代谢通路中的聚苹果酸合成酶基因得到的重组菌，并用于发酵生产中分子量的普鲁兰多糖的方法。本发明通过敲除代谢通路中的聚苹果酸合成酶基因，成功将该菌株生产的普鲁兰多糖重均分子量Mw从3.3×106Da降至6×105‑8×105Da，普鲁兰多糖产量达129.1g/L，与原始菌株相比，敲除聚苹果酸合成酶基因（PMAs）菌株普鲁兰多糖的产量提高50%，进一步低了生产成本，且中分子量的普鲁兰多糖应用领域更广，极具工业生产潜力。
一种利用出芽短梗霉生产分子量普鲁兰多糖方法

[发明专利]一种裂解性多糖单加氧酶及其应用-CN202210683411.X在审
发明人：柏文琴;郑宏臣;付晓平;甄杰 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2022-06-17 - 公布日： 2022-09-06 - 主分类号： C12N9/02 文献下载
摘要：本发明通过生物信息学分析从公共数据库中挖掘裂解多糖单加氧酶AA13家族成员，获得具有淀粉活性裂解多糖单加氧酶的序列，并对其进行蛋白表达和酶活表征发现其能高效协同淀粉酶分解淀粉底物，可有效提高淀粉酶降解底物的催化效率。将该酶应用到纺织冷堆工艺中发现，添加有裂解性多糖单加氧酶的冷堆工艺处理时间在室温范围内20‑30℃可有效缩短其冷堆处理时间，节约成本，提高了生产效率。
一种裂解多糖单加氧酶及其应用

[发明专利]一种裂解性多糖单加氧酶及其在精炼中的应用-CN202210706737.X在审
发明人：柏文琴;付晓平;郑宏臣;谷荣荣;郑雯 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2022-06-21 - 公布日： 2022-08-30 - 主分类号： C12P19/02 文献下载
摘要：本发明公开一种生物酶法提高织物印染前精炼效果的方法。通过生物信息学分析从公共数据库中挖掘裂解多糖单加氧酶AA9家族成员，获得具有纤维素酶活性的裂解多糖单加氧酶的序列，并对其进行蛋白表达和酶活表征发现其能高效协同纤维素酶分解纤维素底物，将此裂解性多糖单加氧酶和H2O2应用到纺织印染前处理退浆精炼工艺中，发现其可协同纤维素酶作用达到提高精炼效果的作用，提高织物毛效和柔软度。
一种裂解多糖单加氧酶及其精炼中的应用

[发明专利]一种生物鲁棒性提高的大肠杆菌底盘细胞及其构建方法与应用-CN202010661070.7有效
发明人：付晓平;郑宏臣;宋诙;束文举;甄杰;谭明;徐健勇 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2020-07-10 - 公布日： 2022-07-12 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种生物鲁棒性提高的大肠杆菌底盘细胞及其构建方法与应用。本发明提供了一种单独或同时过表达大肠杆菌本源的基因prpD和malK的方法，构建一生长速率加快、ATP能量供应稳定充足、乙酸积累受抑制的鲁棒性能提高的大肠杆菌底盘细胞，利用该大肠杆菌底盘细胞表达外源蛋白其表达量可提高80％‑200％。本发明的大肠杆菌底盘细胞适用于植物、微生物等不同来源的外源蛋白在大肠杆菌中的表达，解决了因更换不同重组目标蛋白而需对宿主菌重新改造的问题，且该方法工艺简化、通用性高、便于实验研究及工业化放大应用。
一种生物鲁棒性提高大肠杆菌底盘细胞及其构建方法应用

[发明专利]一种密码子优化的脂肪酶基因、工程菌及其纺织应用-CN201910161637.1有效
发明人： 郑宏臣;宋诙;谭明;马红丽;付晓平;徐健勇 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2019-03-04 - 公布日： 2022-04-15 - 主分类号： C12N15/55 文献下载
摘要：本发明公开了一种密码子优化的脂肪酶基因、工程菌及其纺织应用。对来源于Aspergillus fischeri NRRL 181的脂肪酶基因（NCBI accession No.XM_001261900.1）针对毕赤酵母宿主的密码子优化，得到如SEQ ID NO.1的基因序列，应用该序列构建的毕赤酵母工程菌产脂肪酶酶活可达524.3U/ml，为原始基因的5.2倍。并且，将该脂肪酶作为退浆精炼复合酶制剂的新成分，应用于坯布染前处理，可显著提高精炼效果，使处理后布的毛效和退浆率分别提高50%和5%。因此，本发明的脂肪酶具有很好的工业化生产及纺织应用潜力。
一种密码子优化脂肪酶基因工程及其纺织应用

[发明专利]一株降解呕吐毒素的地衣芽孢杆菌及其应用-CN202111322954.0有效
发明人： 郑宏臣;付晓平;宋诙;杨世彬;赵兴亚;徐健勇 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2021-11-10 - 公布日： 2022-03-29 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明提供一株高效降解呕吐毒素的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)及其应用。具体为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)131，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.14853。该菌具有优异的降解呕吐毒素的效果，研究表明可在80h内降解浓度为200ug/ml的呕吐毒素，并且此地衣芽孢杆菌在培养过程产生大量的多糖，可提高产品应用的附加值，具有重要的应用价值。
降解呕吐毒素地衣芽孢杆菌及其应用

[发明专利]一株枯草芽孢杆菌及其在降解玉米赤霉烯酮中的应用-CN202011446971.0有效
发明人：付晓平;郑宏臣;宋诙;杨世彬;赵兴亚;甄杰;徐健勇 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2020-12-09 - 公布日： 2021-10-22 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一株枯草芽孢杆菌及其在降解玉米赤霉烯酮中的应用。枯草芽孢杆菌具体为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)816，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.14854。实验证明，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)816 CGMCC No.14854可以将玉米赤霉烯酮降解为生物毒性大大降低且稳定存在的玉米赤霉烯酮磷酸盐。本发明具有重要的应用价值。
枯草芽孢杆菌及其降解玉米赤霉烯酮中的应用

[发明专利]植物乳杆菌发酵产高活性抗菌肽的方法-CN201910384922.X在审
发明人：宋诙;郑雯;徐健勇;谭明;郑宏臣 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2019-05-09 - 公布日： 2020-11-10 - 主分类号： C12P21/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种植物乳杆菌CGMCC5297发酵产高活性抗菌肽的发酵条件，优化发酵培养基配方为葡萄糖10‑60g/L，胰酪胨8‑12g/L，酵母粉3‑7.5g/L，发酵罐优化发酵条件为通气比4.7‑6.4vvm，转速100‑150r/min，接种量1.5‑3.5％。培养基的pH为5.8‑6.2。该种方法优化了培养基中碳源和氮源的质量比，同时控制无机盐及表面活性剂的添加量，大大提高了抗菌肽的产量，获得的抗菌肽效价是未优化前的1.4倍，显示了良好的产业化生产潜力。
植物杆菌发酵活性抗菌方法

[发明专利]一种植物乳杆菌抗菌肽的提取方法-CN201910392270.4在审
发明人：宋诙;郑雯;谭明;徐健勇;郑宏臣 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2019-05-09 - 公布日： 2020-11-10 - 主分类号： C07K14/335 文献下载
摘要：本发明设计一种涉及双水相法提取植物乳杆菌抗菌肽的方法。在发酵液中加入聚乙二醇4000及磷酸氢盐静置分层，取上层液相加入90％(NH4)2SO4粉末，4℃静置过夜，次日以8000rpm低温离心15min，取沉淀。将沉淀溶于少量水后，透析除盐，冷冻干燥或喷雾干燥获得抗菌肽纯品。本发明采用双水相萃取技术提取植物乳杆菌抗菌肽，与经典盐析法比较，具有操作条件简单，节省时间，能耗小，成本低，避免培养基中颜色污染产品等优点。所提取到的植物乳杆菌抗菌肽纯度较经典盐析法要高，但可比盐析法减少离心次数，节省一天时间，得率约为经典盐析法的一倍。
一种植物杆菌抗菌提取方法

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