本发明公开了一种检测大白菜黄萎病病原菌的实时荧光定量PCR方法。本发明公开的一对引物,由SEQ ID No.1所示的DNA分子和SEQ ID No.2所示的DNA分子组成。本发明公开的方法是一种快速、准确、高效的黄萎病抗性分子诊断体系,为大白菜抗黄萎病资源筛选和抗性转育奠定了良好基础;此外,该方法还可用于大白菜黄萎病预测预报,对于大白菜的安全生产具有重要意义。
本发明公开了一种Br-or-Indel分子标记及其应用。本发明公开的一对引物,该对引物由(1)和(2)所示的两条引物组成:(1)Br-or-IndelF,该引物的序列如SEQ ID No.3所示;(2)Br-or-IndelR,该引物的序列如SEQ ID No.4所示。本发明公开的Br-or-Indel标记可以应用于提高橘红心大白菜的选育效率。
本发明公开了一种鉴定白菜紫色性状的方法及专用引物对。该引物对,其中一条引物如SEQ ID NO:1所示,另一条引物如SEQ ID NO:2所示。本发明利用F2群体将控制紫色性状的基因首次定位到A3染色体上,找到了与紫色性状紧密连锁的分子标记,该分子标记可以用于鉴定大白菜的紫色性状,为进一步进行分子标记辅助育种和克隆基因奠定基础。本发明鉴定方法鉴定结果准确可靠,在大白菜的生长早期便可进行鉴定,无需等待其植株长成时再鉴定,节省了时间,降低了劳动成本,加快了育种速度,具有重要意义。
本发明公开了一种与大白菜桔红心性状紧密连锁的特征序列扩增标记,其DNA序列见序列表中SEQ ID NO:1序列。其获得方法包括:1)提取基因组DNA,使用RAPD随机引物对基因组DNA进行PCR反应,对PCR产物进行电泳分析;通过BSA法,寻找与桔红心性状连锁的RAPD标记,测定连锁距离并验证连锁关系。2)对与桔红心性状连锁的RAPD产物进行回收、克隆和测序,根据测序结果的两端序列设计引物对,长度20个碱基,用SCAR引物进行PCR扩增反应,对反应产物进行电泳分析,测定连锁距离并验证连锁关系。本发明的优点是:获得的SCAR标记具有分析程序简单、周期短、所需DNA量极少(一般为5-25ng)且质量要求不苛刻;设备简单;与其他标记类型相比,成本低,重复性好,标记稳定可靠,便于统计。