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[发明专利]基于QD-LUMABS的抗体定量检测的曲线建立方法、检测方法及其试剂盒-CN202111503164.2在审
发明人：金宗文;卫小元;罗擎颖 -专利权人：深圳先进技术研究院
申请日： 2021-12-09 - 公布日： 2023-06-13 - 主分类号： G01N33/535 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于QD‑LUMABS的抗体定量检测的曲线建立方法、检测方法及其试剂盒。本发明通过链霉亲和素‑生物素体系实现LUMABS与量子点(QD)自组装，在特定抗原识别表位‑LUMABS探针中引入QD，使BRET(生物发光能量共振转移)对的受体荧光发射波长红移，可与供体荧光光谱充分分离开，使受体荧光信号免受供体荧光信号干扰，提高检测灵敏度，还能够实现同一样品的多通道检测和同一样品中多组分均相检测。
基于 qd lumabs 抗体定量检测曲线建立方法及其试剂盒

[发明专利]基于磁球分离时间分辨荧光的抗原检测的曲线建立方法、检测方法及其试剂盒-CN202111510376.3在审
发明人：金宗文;卫小元;罗擎颖 -专利权人：深圳先进技术研究院;鲁米博公司
申请日： 2021-12-10 - 公布日： 2023-06-13 - 主分类号： G01N33/543 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于磁球分离时间分辨荧光的抗原检测的曲线建立方法、检测方法及其试剂盒。本发明的曲线建立方法结合磁球分离与时间分辨荧光检测技术，充分利用磁球可快速分离和富集抗原，通过后续的杂交链式反应，大幅提高磁球表面特异性吸附的时间分辨荧光发卡核酸探针的浓度，从而放大荧光信号，建立抗原浓度‑荧光强度工作曲线，之后基于工作曲线可以根据待测抗原的荧光强度计算得出待测抗原的浓度。所述检测方法提高检测灵敏度和特异性的同时还能缩短检测时间，本发明的抗原快速检测试剂盒可用于生物标志物的快速检测。
基于分离时间分辨荧光抗原检测曲线建立方法及其试剂盒

[发明专利]具有近红外荧光及超氧化物歧化酶活性碳点纳米酶及其制备方法和应用-CN202111495919.9在审
发明人： 罗擎颖;刘翠;金宗文 -专利权人：深圳先进技术研究院
申请日： 2021-12-08 - 公布日： 2023-06-09 - 主分类号： C01B32/15 文献下载
摘要：本发明公开了一种具有近红外荧光及超氧化物歧化酶活性碳点纳米酶及其制备方法和应用。所述制备方法利用磺酸基与酰氯的反应，在碳纤维粉与强酸共反应得到的原料碳点的基础上，修饰具有近红外荧光性质的小分子，获得同时具有近红外荧光及超氧化物歧化酶活性的碳点纳米酶。所述制备方法简单、产物具有近红外荧光性质及良好的超氧化物歧化酶活性，在细胞成像、氧化损伤保护、抗老化、抗炎治疗中具有广阔的应用前景。
具有红外荧光超氧化物歧化酶活性碳纳米及其制备方法应用

[发明专利]一种荧光素酶荧光互补体系及其制备方法和应用-CN201711420283.5有效
发明人：金宗文;袁静;杨偲;罗擎颖;朱海;袁克湖;付辉 -专利权人：中国科学院深圳先进技术研究院
申请日： 2017-12-25 - 公布日： 2022-09-02 - 主分类号： C12Q1/66 文献下载
摘要：本发明提供了一种荧光素酶荧光互补体系及其制备方法和应用，所述体系包括Rab1、SidM/DrrA、荧光素酶C端、荧光素酶N端、连接肽和还原剂TCEP，所述Rab1的C端通过连接肽与荧光素酶N端相连，所述SidM/DrrA通过连接肽与荧光素酶C端片段相连；本发明通过引入特异性相互作用的蛋白对，并设计适宜的柔性肽和结合位置，优化缓冲液中还原剂的种类和浓度，最终显著提高荧光互补效率，最高达到30倍；本发明提供的制备方法简洁高效，便于操作，易于推广，具备广阔的应用前景和市场价值。
一种荧光互补体系及其制备方法应用

[发明专利]一种核酸检测的曲线建立方法、检测方法及其试剂盒-CN202011423657.0在审
发明人：金宗文;罗擎颖;刘翠;卫小元 -专利权人：深圳先进技术研究院;鲁米博公司
申请日： 2020-12-08 - 公布日： 2022-06-10 - 主分类号： C12Q1/682 文献下载
摘要：本发明涉及一种核酸检测的曲线建立方法、检测方法及通过该方法实现核酸快速检测的试剂盒，本发明的曲线建立方法结合磁球分离与时间分辨荧光检测技术，充分利用磁球可快速分离和富集痕量核酸，通过后续的杂交链式反应，大幅提高磁球表面特异性吸附的时间分辨荧光探针的浓度，从而放大荧光信号，建立核酸浓度‑时间分辨荧光强度工作曲线，之后基于工作曲线可以根据待测目标物的荧光强度计算得出待测目标物的核酸浓度。所述检测方法提高检测灵敏度和特异性的同时还能缩短检测时间，本发明的核酸快速检测试剂盒可用于新冠病毒核酸的快速检测。
一种核酸检测曲线建立方法及其试剂盒

[发明专利]一种基于荧光素酶互补的生物传感器及其制备方法和应用-CN201911112734.8有效
发明人：金宗文;卫小元;罗擎颖;赵江林;金虹;朱海;严义勇;付辉 -专利权人：深圳先进技术研究院
申请日： 2019-11-14 - 公布日： 2022-04-29 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明提供一种基于荧光素酶互补的生物传感器，包括荧光素酶氨基端片段和荧光素酶羧基端片段，荧光素酶氨基端片段的氨基端和荧光素酶羧基端片段的羧基端中的其中一个与G蛋白连接，另一个与第一标记物连接，荧光素酶氨基端片段和荧光素酶羧基端片段为同一荧光素酶的两个互补片段；连接有第二标记物的待测物抗原，第二标记物与第一标记物互补；待测物抗体；以及荧光素酶底物。通过利用荧光素酶氨基端片段和羧基端片段互补、第一标记物和第二标记物互补、待测物/待测物抗原和待测物抗体互补以及G蛋白和待测物抗体互补的四元互补体系，实现对待测物的快速检测，检测灵敏度高、特异性强、背景噪音小，可用于复杂样品中待测物的定量分析。
一种基于荧光互补生物传感器及其制备方法应用

[发明专利]一种可控调节pH敏感性的荧光碳点的制备方法-CN201911261931.6有效
发明人： 罗擎颖;刘翠;金宗文;庞代文 -专利权人：深圳先进技术研究院
申请日： 2019-12-10 - 公布日： 2022-04-05 - 主分类号： C01B32/15 文献下载
摘要：本发明公开了一种有效调节碳点荧光pH敏感性质的方法，可以制得对不同pH范围内敏感的荧光碳点材料。通过钝化碳点表面的羧基来消除酸性条件下的荧光猝灭，通过β‑二羰基的裂解反应来抑制β‑二羰基的α‑氢解离所引起的荧光强度降低及光谱红移。本发明利用1,3丙烷磺内酯在三乙胺催化下与碳点在40℃下反应24h，可以得到在酸性条件荧光稳定而对碱性条件敏感的碳点；将碳点在10mM NaOH中进行水热反应，可以得到在碱性条件下荧光稳定而对酸性条件敏感的碳点。从碳点的结构出发，通过控制碳点表面结构来调控碳点的荧光pH敏感性质，操作简单、方法普适性高、对碳点pH敏感性质调控的效率高。
一种可控调节 ph 敏感性荧光制备方法

[发明专利]一种基于核酸杂交增强稀土配合物荧光的检测方法-CN202010797826.0在审
发明人：金宗文;刘翠;罗擎颖;尼科·希尔德布兰特 -专利权人：深圳先进技术研究院;鲁米博公司
申请日： 2020-08-10 - 公布日： 2022-02-18 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于核酸杂交增强稀土配合物荧光的检测方法，对第一核酸链进行中间修饰，加入稀土配合物，获得第一核酸链和稀土配合物的偶联产物，然后加入与所述第一核酸链互补的第二核酸链，从而达到增强荧光的效果。该方法具有反应操作简单，条件绿色温和、反应时间短等优点。核酸与稀土配合物的偶联产物在核酸互补链存在的情况下，荧光最高可以增强至20倍以上，可用于生理条件对各种核酸、蛋白质及其他生物小分子的高灵敏检测。
一种基于核酸杂交增强稀土配合荧光检测方法

[发明专利]一种可调节的荧光素酶分段融合蛋白、其制备方法及应用-CN201510981857.0有效
发明人：金宗文;袁静;罗擎颖 -专利权人：中国科学院深圳先进技术研究院
申请日： 2015-12-24 - 公布日： 2021-12-10 - 主分类号： C12N9/02 文献下载
摘要：本发明涉及分子生物学技术领域，尤其涉及一种可调节的荧光素酶分段融合蛋白、其制备方法及应用，所述融合蛋白包括荧光素酶N端蛋白、柔性肽段1、MBP蛋白、活性阀门、柔性肽段2和荧光素酶C端蛋白；其中，所述荧光素酶N端蛋白和荧光素酶C端蛋白共同组成荧光素酶；所述活性阀门为一段4‑8个疏水短肽氨基酸。通过短肽链氨基酸序列作为“活性阀门”并以特异性剪切酶作为“阀门钥匙”的活性调节方式，实现一种新型的荧光互补蛋白开关模式，可用于评估其他蛋白质动态相互作用如配体与底物的结合作用、能产生新结合位点的相互作用、使蛋白去活化的蛋白‑蛋白相互作用、改变蛋白作用底物特异性的蛋白‑蛋白相互作用。
一种调节荧光分段融合蛋白制备方法应用

[发明专利]多组分纳米颗粒簇的构建方法-CN201811594865.X有效
发明人：金宗文;罗擎颖;卫小元;袁静;赵江林 -专利权人：深圳先进技术研究院
申请日： 2018-12-25 - 公布日： 2021-11-19 - 主分类号： C07K14/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种所述多组分纳米颗粒簇的构建方法，包括以下步骤：分别提供N种锌指蛋白、N种蛋白标签和M种纳米颗粒；将一种所述纳米颗粒与至少一种所述蛋白标签交联，且一种蛋白标签只交联一种纳米颗粒，获取N种纳米颗粒/蛋白标签复合体；按唯一配对的关系将一种所述锌指蛋白与一种配体交联，获取N种锌指蛋白/配体复合体；提供核苷酸序列，将所述核苷酸序列与所述N种纳米颗粒/蛋白标签复合体、N种锌指蛋白/配体复合体混合并孵育，形成核苷酸序列‑锌指蛋白‑蛋白标签‑纳米颗粒的连接体系，分离后收集得到的纳米颗粒簇，其中，所述核苷酸序列中的碱基按照预设的纳米颗粒簇中锌指蛋白的排列顺序设定。
组分纳米颗粒构建方法

[发明专利]一种甘油激酶高密度发酵方法-CN201911260729.1在审
发明人：金宗文;刘宇光;苏少博;卫小元;罗擎颖 -专利权人：深圳先进技术研究院
申请日： 2019-12-10 - 公布日： 2021-06-11 - 主分类号： C12N9/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种甘油激酶高密度发酵方法，当发酵罐内菌体密度达到OD600≥30后降温，温度降到15‑20℃后，调节控制pH在6.4‑6.6，加入诱导剂诱导10‑24h，控制溶氧在30％‑40％，恒速补料。本发明通过改进发酵罐培养基配方，尤其是在配方中添加了适量甘油，并配合特定的诱导方法和诱导条件，能够保障发酵生产稳定获得高产量的酶活。从而降低了生产成本，达到规模化生产要求。
一种甘油激酶高密度发酵方法

[发明专利]一种HEK293F悬浮细胞高效电转染方法-CN201911140162.4在审
发明人：金宗文;卫小元;罗擎颖;赵江林;刘宇光;苏少博 -专利权人：中国科学院深圳先进技术研究院;山西瑞亚力科技有限公司
申请日： 2019-11-20 - 公布日： 2021-05-21 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明提供一种HEK293F悬浮细胞高效电转染方法，该方法通过对电转染时的电压强度、脉冲次数、脉冲间隔时长、电击时长等方面进行优化，实现了对悬浮培养的HEK293F细胞的高效电转染，其在电转时无需配制电转染缓冲液，即可得到较高的转染效率。该方法可用于不同质粒转染悬浮培养的HEK293F细胞，得到大量的目的蛋白(如抗体、酶等蛋白产物)的真核表达。
一种 hek293f 悬浮细胞高效转染方法

[发明专利]一种水溶性磺化杯芳烃的制备方法-CN201911251840.4有效
发明人：金宗文;赵江林;阮琴;罗擎颖;卫小元 -专利权人：深圳先进技术研究院
申请日： 2019-12-09 - 公布日： 2020-11-10 - 主分类号： C07D341/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种水溶性磺化杯芳烃的制备方法，具体包括如下步骤：(1)将杯芳烃加入到计算好定量的浓硫酸中进行磺化反应，同时监测反应进度，确保反应完成；(2)待反应完毕后，冷却至室温，将反应物倒入碎冰中，析出絮状沉淀物，收集固体产物即得磺化杯芳烃粗品；(3)对粗品采用溶剂溶解分离纯化，获得纯水溶性磺化杯芳烃产品。本发明通过控制反应物杯芳烃和浓硫酸的最佳比例，结合反应产物在硫酸溶液中的溶解度不同，调整最佳硫酸浓度，无需添加氯化钠盐进行盐析，同时对粗品进行溶解纯化获得了高纯度无硫酸的水溶性磺化杯芳烃。
一种水溶性磺化芳烃制备方法

[发明专利]基于反向扩增全长质粒和In-fusion连接的快速克隆方法-CN201811540662.2在审
发明人：金宗文;袁静;罗擎颖;赵江林;卫小元;苏少博;刘宇光 -专利权人：中国科学院深圳先进技术研究院
申请日： 2018-12-17 - 公布日： 2020-06-23 - 主分类号： C12N15/66 文献下载
摘要：本发明提供了一种快速克隆方法，包括以下步骤：设计用于扩增目的基因的第一引物对和用于扩增载体模板的第二引物对；其中，所述第一引物对包括第一上游引物和第一下游引物，第一上游引物包括末端重叠序列A，第一下游引物包括末端重叠序列B；所述第二引物对包括第二上游引物和第二下游引物，第二上游引物包括末端重叠序列B’，第一下游引物包括末端重叠序列A’，且所述末端重叠序列A与所述末端重叠序列A’反向互补，所述末端重叠序列B与所述末端重叠序列B’反向互补；采用PCR反向扩增技术扩增线性化载体以及目的基因；采用连接酶将所述线性化载体与所述目的基因连接，得到环状克隆载体；将所述环状克隆载体导入宿主细胞，进行表达。
基于反向扩增全长质粒 in fusion 连接快速克隆方法

[发明专利]简易碳点的制备方法-CN201811515618.6有效
发明人：金宗文;赵江林;罗擎颖;袁静;苏少博;卫小元 -专利权人：深圳先进技术研究院
申请日： 2018-12-12 - 公布日： 2020-05-22 - 主分类号： C09K11/65 文献下载
摘要：本发明提供了一种碳点的制备方法，包括以下步骤：按照稠环芳烃化合物与浓硫酸的质量体积比为50mg:(1～5mL)的比例，提供稠环芳烃化合物和浓硫酸的混合体系；将所述稠环芳烃化合物和浓硫酸的混合体系在25℃～80℃的条件下加热处理，反应1.5h～10min后，收集反应液；将所述反应液溶于去离子水中形成混合液，加入无机碱调节溶液pH至中性；采用3KD的超滤管对所述混合液进行超滤处理，收集分子量大于等于3KD的产物；采用50KD的超滤管对所述分子量大于等于3KD的产物进行超滤处理，得到分子量为3KD～50KD的碳点。
简易制备方法

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