本发明公开一种用于凡纳滨对虾多性状育种的SNP位点引物组合,其包括如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.72序列所示的引物。本发明的SNP位点是通过构建凡纳滨对虾SNP遗传连锁图谱并进行QTL分析获得的,分别与凡纳滨对虾的生长、抗病、耐氨氮、耐亚硝氮性状连锁。在凡纳滨对虾育种实践中,可以应用本发明的SNP位点引物组合,检测凡纳滨对虾育种材料的SNP位点基因型,筛选有利基因型的个体,培育经济性状优良的凡纳滨对虾新品种。
本发明公开了一种凡纳滨对虾耐亚硝酸盐性状相关的SNP分子标记,所述SNP分子标记是如序列表中SEQ ID NO.3序列所示核苷酸序列,其中第88位碱基n为T或C,所述SNP分子标记为T/C颠换类型的SNP标记。本发明的SNP分子标记是通过构建凡纳滨对虾SNP遗传连锁图谱并进行QTL分析获得的,与凡纳滨对虾的耐亚硝酸盐性状紧密连锁,为凡纳滨对虾的遗传育种提供了有效途径。本发明还公开了用于检测凡纳滨对虾耐亚硝酸盐性状相关的SNP分子标记的引物组合以及检测方法,用于筛选对耐亚硝酸盐性状有利的凡纳滨对虾基因型个体,辅助选育凡纳滨对虾新品种。
本发明提供了一种突变型Tn5转座酶及试剂盒,属于生物技术领域。本发明在野生型Tn5转座酶的基础上,具有下述五个氨基酸位点突变:R26W、E54K、R62P、D156K和L372P,以及S19R、N204K、S267T三个突变点中至少2个突变点,所述野生型Tn5转座酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还涉及所述突变型Tn5转座酶在文库构建中的应用。与野生型Tn5酶相比,本发明所提供的突变型Tn5转座酶的活性显著提高,对DNA序列的偏好性显著降低,可以无偏好识别dsDNA及DNA/RNA杂交链,2.5h左右可以实现任意(0.1ng~50ng)投入量建库,可以满足多种高通量测序建库的需求。