本发明涉及蛋白质合成技术领域,具体是一种蜂毒素的制备方法。本发明方法步骤如下:(1)将钙调蛋白、smt3(SUMO family protein)以及蜂毒素三者核苷酸序列与表达载体组成的重组质粒转入大肠杆菌菌株;(2)将(1)所得菌株接种于TB培养基或改进后的TB培养基,IPTG过夜诱导表达;(3)将(2)所得菌体超声破碎、离心,上清经Ni‑NTA亲和层析、sumo蛋白酶酶切,在1.0mM EDTA存在下再次经Ni‑NTA亲和层析以及Sephadex G‑25分子筛分离获得纯度高达95%的蜂毒素,产量可达每升菌体16mg蜂毒素。本方法能克服目前蜂毒素产量低、成本高、无法满足对蜂毒素应用需求的缺陷,是目前高产量、低成本的表达方法。