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[发明专利]一种III型人源化胶原蛋白及其制备方法和应用-CN202310932321.4在审
发明人：李爽;黄壮壮;朱晁谊;陈东莹;蔡昇良;张释元 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2023-07-27 - 公布日： 2023-10-13 - 主分类号： C07K14/78 文献下载
摘要：本发明公开一种III型人源化胶原蛋白及其制备方法和应用，涉及合成生物学技术领域。本发明的III型人源化胶原蛋白氨基酸序列采用100％的人胶原蛋白序列，无免疫原性和内毒素；水溶性较好，可塑性强，具有可加工性；存在三螺旋结构，能够促进成人成纤维细胞和HaCaT细胞增殖，具有应用于组织工程等领域的潜在价值；并且利用毕赤酵母进行分泌重组表达，产物结构单一，分离纯化工艺简单，生产成本低，有利于工业规模的放大生产。
一种 iii 型人源化胶原蛋白及其制备方法应用

[发明专利]基于全细胞生物传感器的水溶性样品中重金属离子半定量检测方法-CN202210085929.3有效
发明人：李爽;马浩;朱晁谊 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2022-01-25 - 公布日： 2023-09-26 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开一种基于全细胞生物传感器的水溶性样品中重金属离子半定量检测方法，属于环境生物技术领域。该方法操作便利、耗时短、成本低、可视性好、易于定量。利用SRRz裂解基因作为报告元件，响应迅速，菌液在接触重金属2h内光密度明显下降。利用SRRz裂解基因作为报告元件，导致微生物菌体裂解，所得结果与Cd(II)离子浓度相关性较高，检测结果可实现裸眼判断，也可通过可见光分光光度计检测。利用X‑gal对释放到细胞外的β‑半乳糖苷酶进行检测，操作简便。该方法安全性好、无需添加试剂、不受色素干扰、耗时短成本低，具有特异性，易于实现高通量筛查，便于推广；可为重金属污染的日常检测和高通量筛查提供技术支持。
基于细胞生物传感器水溶性样品重金属离子定量检测方法

[发明专利]一种具有快速同化甘露醇能力的酿酒酵母及其在生产萜类化合物中的应用-CN202111581215.3有效
发明人：李爽;朱晁谊;吴涛 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2021-12-22 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： C12N1/18 文献下载
摘要：本发明公开一种具有快速同化甘露醇能力的酿酒酵母及其在生产萜类化合物中的应用，属于合成生物学及工业微生物学技术领域。该酿酒酵母为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)BN9A，保藏编号：GDMCC No：62101。本发明通过适应性进化获得突变株BN9A，该突变株表现为酿酒酵母甘露醇代谢的天然阻遏被有效解除，甘露醇代谢相关的基因的转录水平提高50～420倍不等；可高效快速同化甘露醇，遗传稳定性好，产量性状稳定，应用于工业化发酵价值较高。本发明菌株可大大提高目标萜类化合物的产量及碳转化率，具有充足的乙酰辅酶A前体供应，是一株优秀的萜类化合物生产菌株。
一种具有快速同化甘露醇能力酿酒酵母及其生产化合物中的应用

[发明专利]一种重组蓝铜肽前体-寡肽的高纯度制备方法-CN202011639055.9有效
发明人：李爽;羊凤铃;朱晁谊;刘政宇 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2020-12-31 - 公布日： 2023-08-18 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开一种重组蓝铜肽前体‑寡肽的高纯度制备方法，涉及基因工程领域。该制备方法利用大肠杆菌合成重组多拷贝GHK串联短肽，及酶解法切割释放GHK单体以大量生产GHK单肽。该方法的关键在于(1)利用class‑IIS型限制性核酸内切酶在识别位点下游特定位置切割任意DNA序列的特点，实现短肽的多次串联延长；解决了基因工程表达短肽的低表达量的问题，具有降低生产成本、减轻化学合成中造成的环境负担的优势；(2)无需蛋白纯化柱，简单通过硫酸铵沉淀‑等电点沉淀结合的蛋白纯化方法，即可高效分离纯化酶切获得GHK单体；与GHK标准品具有相同的生物活性，且纯度高、成本低。
一种重组蓝铜肽前体寡肽纯度制备方法

[发明专利]活性聚集肽及其应用-CN202210984387.3在审
发明人：李爽;马佳媛;朱晁谊;刘佩伶 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2022-08-17 - 公布日： 2023-05-12 - 主分类号： C07K14/245 文献下载
摘要：本发明公开了活性聚集肽及其应用，属于生物工程技术领域。该类活性聚集肽来源于大肠杆菌Escherichia coli CFT073的α‑溶血素HlyA，共包含五个序列，分别为HlyA218、HlyA60、H12、H1和H2。通过将该类活性聚集肽与目的蛋白融合表达，可介导目的蛋白在宿主细胞内形成活性包涵体，且该类短肽诱导蛋白活性聚集率高、具有刺激重组菌快速生长的潜力。该类活性聚集肽可应用于重组蛋白的无柱化纯化和原位固定化，生产成本低，步骤简便。
活性聚集及其应用

[发明专利]氧化还原酶及其突变体在生物合成圆柚酮中的应用-CN202210884935.5在审
发明人：李爽;陈东莹;李文;朱晁谊 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2021-12-13 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： C12P7/26 文献下载
摘要：本发明公开一种氧化还原酶及其突变体在生物合成圆柚酮中的应用，属于生物工程技术领域。本发明首次从海洋嗜杀酵母(Wickerhamomyces anomalusM15)中获得对圆柚醇具有较高转化能力的氧化还原酶，通过定点突变获得了更高能力的氧化还原酶突变体。与现有的能够催化圆柚醇的氧化还原酶相比，该氧化还原酶及其突变体具有良好的底物耐受度、转化率高及高耐盐性。本发明所提供的氧化还原酶及其突变体，为体外酶催化方式合成圆柚酮提供了条件，实现以绿色、高效的方式催化圆柚醇合成圆柚酮产物。本发明将为圆柚酮的合成提供一种重要的工具酶，并为圆柚酮的合成工业带来巨大的经济效益。
氧化还原酶及其突变体生物合成圆柚酮中的应用

[发明专利]生产瓦伦西亚烯的酿酒酵母工程菌及其构建方法与应用-CN201910271558.6有效
发明人：李爽;欧阳小丹;察亚平;朱晁谊 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2019-04-04 - 公布日： 2023-02-10 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种生产瓦伦西亚烯的酿酒酵母工程菌及其构建方法与应用。该工程菌是通过将酵母基因组中全局抑制因子基因敲除和角鲨烯合成酶基因下调，表达瓦伦西亚烯合成酶和过表达HMG‑CoA还原酶，且优化瓦伦西亚烯合成酶启动子获得。本发明通过游离载体过表达代谢途径中的关键基因，提高瓦伦西亚烯合成途径中的代谢通量，优化酵母细胞工厂，再结合瓦伦西亚烯合成酶启动子的适配性研究，经培养优化得到的酿酒酵母工程菌实现了对瓦伦西亚烯的高效生产，瓦伦西亚烯细胞干重产量可达到124.40mg/g，具有广阔的工业应用前景，具有积极的经济和社会发展的意义。
生产瓦伦西亚酿酒酵母工程及其构建方法应用

[发明专利]氧化还原酶作为圆柚醇脱氢酶在生物合成圆柚酮中的应用-CN202111012112.5在审
发明人：李爽;李文;刘彤;朱晁谊 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2021-08-31 - 公布日： 2022-12-09 - 主分类号： C12P7/26 文献下载
摘要：本发明公开一种氧化还原酶作为圆柚醇脱氢酶在生物合成圆柚酮中的应用，属于生物工程技术领域。该酶是来源于解脂耶氏酵母Yarrowia lipolyticaCLIB122的氧化还原酶YlADH_Bm6(其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示)及对应经修饰的氧化还原酶(其氨基酸序列如SEQ ID No.3)，使用所述的氧化还原酶和经修饰的氧化还原酶，与其重组表达细胞，耐受底物浓度高，转化率高且反应条件温和；在圆柚酮的细胞发酵合成中也具有优秀的表现能力，获得了较高的圆柚酮产量。本发明所述圆柚酮制备方法，对环境友好，操作简便。因此本发明所述的氧化还原酶和经修饰的氧化还原酶具有很好的应用前景。
氧化还原酶作为圆柚醇脱氢酶生物合成圆柚酮中的应用

[发明专利]氧化还原酶及其突变体在生物合成圆柚酮中的应用-CN202111517500.9有效
发明人：李爽;陈东莹;李文;朱晁谊 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2021-12-13 - 公布日： 2022-10-25 - 主分类号： C12P7/26 文献下载
摘要：本发明公开一种氧化还原酶及其突变体在生物合成圆柚酮中的应用，属于生物工程技术领域。本发明首次从海洋嗜杀酵母(Wickerhamomyces anomalusM15)中获得对圆柚醇具有较高转化能力的氧化还原酶，通过定点突变获得了更高能力的氧化还原酶突变体。与现有的能够催化圆柚醇的氧化还原酶相比，该氧化还原酶及其突变体具有良好的底物耐受度、转化率高及高耐盐性。本发明所提供的氧化还原酶及其突变体，为体外酶催化方式合成圆柚酮提供了条件，实现以绿色、高效的方式催化圆柚醇合成圆柚酮产物。本发明将为圆柚酮的合成提供一种重要的工具酶，并为圆柚酮的合成工业带来巨大的经济效益。
氧化还原酶及其突变体生物合成圆柚酮中的应用

[发明专利]一种构建酿酒酵母裂解工程菌的重组载体及其应用-CN201811019561.0有效
发明人：李爽;察亚平;卓敏;朱晁谊 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2018-09-03 - 公布日： 2021-07-20 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明公开一种构建酿酒酵母裂解工程菌的重组载体及其应用，属于生物技术领域。本发明的重组载体可以敲除酿酒酵母基因组中的SED1基因，得到的突变菌株在裂解酶Zymolyase作用下能使细胞快速裂解，释放细胞内物质至胞外。操作对象为酿酒酵母，具有广泛适用性。裂解过程中无需添加额外试剂，成本廉价。裂解时间短，2h可将细胞完全裂解，大大缩短了以往酿酒酵母细胞裂解的时间。操作简便，不需玻璃珠等繁琐步骤和配制复杂裂解液，只需一种简单的缓冲液，大大简化了实验流程。因此，可利用本发明的酿酒酵母裂解方法进行酶活检测、菌落PCR、质粒提取、蛋白鉴定和高通量筛选等，具有简易、快捷、廉价的优点，具有较广的应用前景。
一种构建酿酒酵母裂解工程重组载体及其应用

[发明专利]一种酵母基因组编辑载体及其构建方法和应用-CN201810064104.7有效
发明人：李爽;陈和锋;朱晁谊;朱牧孜 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2018-01-23 - 公布日： 2019-10-18 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本发明公开了一种酵母基因组编辑载体及其构建方法和应用，以gRNA编码质粒P为出发载体，在该载体的复制起始点Ori两端分别引入同向34bp的LoxP序列，并在质粒P骨架位置引入Cre重组酶基因表达盒，获得酵母基因组编辑载体。该载体在以CRISPR/Cas9为媒介的基因编辑中的应用，能实现对酿酒酵母基因组的高效、多轮编辑。
酵母基因组构建应用酿酒酵母基因组编码质粒出发载体骨架位置引入表达盒起始点多轮同向质粒复制媒介基因

[实用新型]一种连续生产乙醇的装置-CN201721657272.4有效
发明人：李爽;朱晁谊;欧阳小丹 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2017-12-01 - 公布日： 2018-09-07 - 主分类号： C12M1/34 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种连续生产乙醇的装置，包括发酵罐、细胞固定床、膜分离反应器、乙醇冷凝回收装置和乙醇回收罐；所述细胞固定床内部设有多孔纤维材料和不锈钢网，多孔纤维材料缠绕在不锈钢网上；所述膜分离反应器内部含有渗透汽化膜；发酵罐中的细胞培养液输送到细胞固定床中，培养液中的固体细胞附着在多孔纤维材料上，而培养液中的液体成分进入到膜分离反应器；膜分离反应器通过真空泵把过膜的乙醇蒸汽泵入到乙醇冷凝回收装置中，通过液氮冷凝获得乙醇液体送至乙醇回收罐；乙醇分离后的培养液再输送回发酵罐进行循环发酵。该装置有效提高了发酵菌体对底物的耐受性，缓解了产物抑制，大幅度提高了生产效率。该装置操作简单，易于工业化放大。
乙醇膜分离反应器培养液多孔纤维材料细胞固定发酵罐冷凝回收装置乙醇回收罐耐受性本实用新型渗透汽化膜细胞培养液不锈钢网产物抑制发酵菌体固体细胞生产效率循环发酵液氮冷凝乙醇液体乙醇蒸汽装置操作真空泵泵入底物附着不锈钢缠绕放大缓解

[发明专利]一种连续生产乙醇的装置-CN201711250640.8在审
发明人：李爽;朱晁谊;欧阳小丹 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2017-12-01 - 公布日： 2018-04-13 - 主分类号： C12M1/34 文献下载
摘要：本发明公开了一种连续生产乙醇的装置，包括发酵罐、细胞固定床、膜分离反应器、乙醇冷凝回收装置和乙醇回收罐；所述细胞固定床内部设有多孔纤维材料和不锈钢网，多孔纤维材料缠绕在不锈钢网上；所述膜分离反应器内部含有渗透汽化膜；发酵罐中的细胞培养液输送到细胞固定床中，培养液中的固体细胞附着在多孔纤维材料上，而培养液中的液体成分进入到膜分离反应器；膜分离反应器通过真空泵把过膜的乙醇蒸汽泵入到乙醇冷凝回收装置中，通过液氮冷凝获得乙醇液体送至乙醇回收罐；乙醇分离后的培养液再输送回发酵罐进行循环发酵。本发明有效提高了发酵菌体对底物的耐受性，缓解了产物抑制，大幅度提高了生产效率。该装置操作简单，易于工业化放大。
一种连续生产乙醇装置

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