本发明适用于生物技术领域,提供了一种PD‑L1单克隆抗体、试剂盒、其制备方法和应用。PD‑L1单克隆抗体的重链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列;PD‑L1单克隆抗体的轻链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO.9所示的氨基酸序列。本发明的PD‑L1单克隆抗体,具有较高的亲和力,特异性强,在体外具有良好的生物学活性;包含有PD‑L1单克隆抗体的检测试剂盒具有检测方法简便、准确性强、成本低的优点。本发明的检测试剂盒可作为非小细胞肺癌辅助诊断的手段和PD‑1/PD‑L1通路肿瘤靶向药物的监测工具。