本发明公开了鼠抗人血管内皮生长因子的单克隆抗体及其制备方法和应用，包括VEGFA‑Clone1和VEGFA‑Clone2，VEGFA‑Clone1的重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；VEGFA‑Clone2的重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。制备方法：将亲和纯化后的人血管内皮生长因子VEGF165与弗氏佐剂进行等体积混合乳化，采集小鼠血液分离血清，筛选免疫好的小鼠进行杂交瘤融合实验，经过筛选培养后，取上清进行酶联免疫吸附测定，筛选出能识别VEGF165、VEGF121、VEGF145、VEGF189、VEGF206所有亚型的阳性细胞株，克隆出单克隆细胞株。此抗体组合具有特异性和高亲和力的特点，同时也提供了上述抗体的诊断检测试剂盒，从而提高诊断试剂的特异性和灵敏度。
