本发明公开了一种胸腺癌类器官培养液、培养方法与应用。所述胸腺癌类器官培养液由DMEM/F12培养基、HEPES缓冲液、青霉素‑链霉素、B27、N2、Glutamax、A83‑01、EGF、Noggin、R‑spondin1、N‑cetylcysteine、SB203580、Y‑27632、FGF10、IGF‑1和新型HGF模拟物组成,所述新型HGF模拟物由核苷酸序列如SEQ ID NO.1~2所示的单价核酸适体组成。本发明的培养液各组分之间协同作用,适用于胸腺癌类器官的培养,具有培养周期短、增殖速度快和细胞存活率高的优点,可为胸腺癌的发生、发展、药物筛选及体外药敏测试研究提供一个理想的模型。