本发明属于生物制药领域,具体涉及一种幽门螺杆菌重组蛋白CagA1及其制备方法和用途。目前Hp疫苗的研究主要集中在尿素酶UreA、UreB或空泡毒素VacA等毒力因子上,还未见有对CagA1蛋白是否能作为疫苗抗原成分的研究,本发明提供了一种幽门螺杆菌疫苗重组蛋白抗原CagA1,氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还提供了该幽门螺杆菌疫苗重组蛋白抗原CagA1的编码核苷酸,以及制备方法和用途。该蛋白具有易纯化、纯度高、制备方法简便等优点,具有显著的经济效益,且动物实验证明其有效刺激机体产生免疫应答并具备良好的免疫保护作用,可作为预防幽门螺杆菌感染的疫苗抗原候选成分。
本发明提供了一种幽门螺杆菌疫苗重组蛋白抗原NC‑1,氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还提供了一种核酸,编码权利要求1所述的幽门螺杆菌疫苗重组蛋白抗原NC‑1。该核酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明提供的幽门螺杆菌疫苗重组蛋白抗原NC‑1具有可溶性表达、易纯化、纯度高、制备方法简便等优点,具有显著的经济效益,且动物实验证明其有效刺激机体产生免疫应答并具备良好的免疫保护作用,可作为预防幽门螺杆菌感染的疫苗候选成分。
本发明提供了一种幽门螺杆菌疫苗重组蛋白抗原TonB,氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还提供了一种核酸,编码幽门螺杆菌疫苗重组蛋白抗原TonB。该核酸序列如SEQID NO:2所示。本发明提供的幽门螺杆菌疫苗重组蛋白抗原TonB可溶性表达、易纯化、纯度高等,具有显著的经济效益,且动物实验证明其有效刺激机体产生免疫应答并具备良好的免疫保护作用,可作为预防幽门螺杆菌感染的疫苗候选成分。
本发明提供了一种幽门螺杆菌重组蛋白抗原FlgK,氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还提供了一种编码幽门螺杆菌重组蛋白抗原FlgK的核酸,其核酸序列如SEQ NO:2所示。本发明提供的幽门螺杆菌重组蛋白抗原FlgK,能够有效刺激体液免疫应答,血清IgG显著提高,也能有效刺激黏膜免疫应答,产生较高的sIgA,并经免疫保护力评价实验证实具有非常好的保护效果。
本发明涉及基因工程领域,公开了一种鲍曼不动杆菌的PAL重组蛋白及其编码基因和它们的应用。PAL重组蛋白为:(a)如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:3所示的重组蛋白;(b)SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:3所示的重组蛋白具有相同功能的由(a)衍生的蛋白质,或者,在SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:3的氨基末端和/或羧基末端连接有标签的氨基酸序列所示的蛋白质。该重组蛋白表达量高,便于分离纯化,高效安全,可以直接与佐剂配合使用,用于制备抗鲍曼不动杆菌感染的亚单位疫苗以及相关的检测产品。
本发明公开了一种幽门螺杆菌重组抗原蛋白SecG及其制备方法与应用,该重组抗原蛋白SecG的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,该重组抗原蛋白SecG编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明通过质粒构建、诱导表达、亲和层析和交换层析纯化等步骤得到高纯度的抗原蛋白,纯化工艺简单、成本低、可操作性强,经过纯化制备后的抗原具有较高免疫原性和免疫效价,可以用作基因工程亚单位疫苗。作为幽门螺杆菌膜转运蛋白中的重要组成蛋白,抗原蛋白SceG将会成为幽门螺杆菌基因工程疫苗研制过程中最有希望的候选抗原之一。
本发明公开了一种抗糖基转移酶A亚单位的纳米抗体及其应用,该纳米抗体可变区具有具有SEQ ID NO.5所示可变区中的互补决定区CDR‑1、CDR‑2、CDR‑3。本发明提供的抗糖基转移酶A亚单位的纳米抗体具有与糖基转移酶A亚单位特异性结合的活性,并中和糖基转移酶A的活性,可以用于检测艰难梭菌,也可用用于制备治疗抗艰难梭菌的药物;该纳米抗体还具有分子量小、亲和力高、结构和性能稳定等特点;能够耐受胃部酸性环境,不易被胃蛋白酶降解等优势。
本发明公开了一种抗糖基转移酶A亚单位的纳米抗体及其应用,该纳米抗体可变区具有SEQ ID NO.6所示可变区中的互补决定区CDR‑1、CDR‑2、CDR‑3。本发明提供的抗糖基转移酶A亚单位的纳米抗体具有与糖基转移酶A亚单位特异性结合的活性,并中和糖基转移酶A的活性,可以用于检测艰难梭菌,也可用用于制备治疗抗艰难梭菌的药物;该纳米抗体还具有分子量小、亲和力高、结构和性能稳定等特点;能够耐受胃部酸性环境,不易被胃蛋白酶降解等优势。