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[发明专利]乙型肝炎病毒感染合并酒精性脂肪肝小鼠模型的构建方法-CN201510027523.X有效
发明人：宁琴;罗小平;王洪武;吴婷;王亚琦;王晓晶;习东;严伟明;陈培哲;黄丽华 -专利权人：华中科技大学同济医学院附属同济医院
申请日： 2015-01-20 - 公布日： 2019-02-01 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明公开了一种建立慢性乙型肝炎病毒感染合并酒精性脂肪肝小鼠模型的方法。该方法将pGEM4Z/HBV1.3质粒通过高压尾静脉注射于FVB/N小鼠体内，造成小鼠肝脏HBV慢性复制状态，再以含酒精液体饲料喂养5周以上，观察了小鼠肝脏组织学变化和血清学变化，包括谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)及乙肝e抗原(HBeAg)，从而建立模拟人类慢性乙型肝炎病毒感染合并酒精性脂肪肝病理过程的小鼠模型。该模型的建立为系统研究慢性乙型肝炎病毒感染合并酒精性脂肪肝的遗传调控、分子机理及防治措施提供了有力的工具。
乙型肝炎病毒感染合并酒精性脂肪肝小鼠模型构建方法

[发明专利]非酒精性脂肪性肝病合并病毒性肝炎小鼠模型的建立方法-CN201410588721.9在审
发明人：宁琴;罗小平;习东;吴婷;王宏武;王晓晶;严伟明 -专利权人：华中科技大学同济医学院附属同济医院
申请日： 2014-10-28 - 公布日： 2015-02-25 - 主分类号： A01K67/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种建立非酒精性脂肪性肝病合并病毒性肝炎小鼠模型的方法。该方法选择高脂饲料喂养C3H/HeN小鼠12周，观察小鼠体重、肝重、转氨酶、糖脂代谢指标及肝脏组织学变化，建立非酒精性脂肪性肝病小鼠。再选择10PFU量的鼠肝炎3型病毒(MHV-3)感染小鼠，观察受感染后小鼠的存活率、肝脏组织学及肝内病毒复制，从而建立类似人类疾病过程的非酒精性脂肪性肝病合并病毒性肝炎小鼠模型。该模型的建立为系统研究非酒精性脂肪性肝病合并病毒性肝炎的病毒动力学、免疫学改变和防治措施提供了有力的工具。
酒精性脂肪性肝病合并病毒性肝炎小鼠模型建立方法

[发明专利]抗纤维介素蛋白的单克隆抗体及其应用-CN201310219365.9有效
发明人：宁琴;罗小平;习东;王鸣;孙颖;王发席;严伟明 -专利权人：华中科技大学同济医学院附属同济医院
申请日： 2013-06-04 - 公布日： 2013-12-11 - 主分类号： C07K7/08 文献下载
摘要：本发明公开了一种抗纤维介素蛋白单克隆抗体及其应用。本发明采用氨基酸序列为ADDHRDPGGNGGNGA的抗原多肽作为免疫原，免疫小鼠，经细胞融合，筛选得到一株稳定分泌抗纤维介素蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其微生物保藏号是：CCTCC NO:C2012200；该杂交瘤细胞株所分泌的单克隆抗体能够与纤维介素蛋白发生特异性反应，具有明显的抗凝效应，并且同时表现出显著的抑制肝癌生长的作用（既可抑制肝癌HCCLM6细胞的增殖，又可下调肿瘤血管新生），其双重抑制多靶点阻断的抗癌效应在肝癌靶向治疗药物研发中具有重要的意义，在制备用于治疗肝癌的相关药物中应用前景广泛。
纤维蛋白单克隆抗体及其应用

[发明专利]hfgl2抑制剂在制备治疗肝癌的药物中的应用-CN201010610930.0有效
发明人：宁琴;罗小平;习东;王鸣;严伟明 -专利权人：华中科技大学同济医学院附属同济医院
申请日： 2010-12-29 - 公布日： 2011-06-08 - 主分类号： A61K48/00 文献下载
摘要：本申请涉及重组人hfgl2微小核糖核酸在肝癌中的应用，即构建肝癌相关的人fgl2(Human Fibrinogen-like protein 2，hfgl2)凝血酶原酶基因的微小RNA腺病毒表达颗粒，在肝癌中进行治疗并验证其药学用途。利用腺病毒介导的micro RNA干扰技术即利用重组人hfgl2微小核糖核酸(hfgl2-miRNA腺病毒注射液)靶向治疗肝癌，利用已建立的高侵袭性人肝癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型，瘤内多点注射重组人hfgl2-miRNA腺病毒注射液，通过比较肿瘤大小及免疫组化等方法探索hfgl2-miRNA腺病毒注射液的优化治疗剂量，结果发现疗效显著，表明hfgl2的沉默对肝癌的治疗具有潜在的临床应用价值。
hfgl2 抑制剂制备治疗肝癌药物中的应用

[发明专利]重型肝炎相关基因hTNFR1 microRNA腺病毒表达质粒的构建方法及其药学用途-CN201010285887.5有效
发明人：宁琴;罗小平;习东;高随;朱传龙;郭健文;严伟明;王鸣 -专利权人：华中科技大学同济医学院附属同济医院
申请日： 2008-07-18 - 公布日： 2011-04-13 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：重型肝炎相关基因hTNFR1microRNA腺病毒表达质粒的构建方法及其药学用途，本发明涉及构建了一组基因生物制剂，即构建了重型肝炎相关的hTNFR1基因的microRNA腺病毒表达质粒，其产生hTNFR1iRNA的单链寡核苷酸序列为：5′-TGCTGTTCAGGTGTCGATTTCCCACAGTTTTGGCCACTGACTGACTGTGGGAACGACACCTGAA-3′。在细胞水平检测microRNA干扰质粒的有效性和特异性，建立hTNFR1 microRNA腺病毒表达质粒应用于治疗重型肝炎。
重型肝炎相关基因 htnfr1 microrna 病毒表达质粒构建方法及其药学

[发明专利]重型肝炎相关基因hFas microRNA腺病毒表达质粒的构建方法及其药学用途-CN201010285909.8有效
发明人：宁琴;罗小平;习东;高随;朱传龙;郭健文;严伟明;王鸣 -专利权人：华中科技大学同济医学院附属同济医院
申请日： 2008-07-18 - 公布日： 2011-04-13 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：重型肝炎相关基因hFas microRNA腺病毒表达质粒的构建方法及其药学用途，本发明涉及构建了一组基因生物制剂，即构建了重型肝炎相关的hFas基因的microRNA腺病毒表达质粒，其产生hFasmiRNA的单链寡核苷酸序列为：5′-TGCTGTTAAGTTGGAGATTCATGAGAGTTTTGGCCACTGACTGACTCTCATGACTCCAACCTTA-3′。在细胞水平检测microRNA干扰质粒的有效性和特异性，建立hFasmicroRNA腺病毒表达质粒应用于治疗重型肝炎。
重型肝炎相关基因 hfas microrna 病毒表达质粒构建方法及其药学用途

[发明专利]重型肝炎相关基因hfg12、hFas和hTNFR1microRNA腺病毒表达质粒的构建方法及其药学用途-CN200810133445.1有效
发明人：宁琴;罗小平;习东;高随;朱传龙;郭健文;严伟明;王鸣 -专利权人：华中科技大学同济医学院附属同济医院
申请日： 2008-07-18 - 公布日： 2009-01-21 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明涉及构建了一组基因生物制剂，即构建了重型肝炎相关的人fgl2(Human Fibrinogen－like protein 2，hfgl2)凝血酶原酶、Fas和肿瘤坏死因子受体I(tumor necrosis factor，TNFR1)基因的microRNA腺病毒表达质粒，在细胞水平检测microRNA干扰质粒的有效性和特异性，建立三种microRNA腺病毒表达质粒联合应用于治疗重型肝炎。本发明采用pAd/CMV/V5－DEST载体和hfgl2、hFas、hTNFR1的pcDNA表达质粒通过Gateway技术，构建pAd－hfgl2、pAd－hFas、pAd－hTNFR1。
重型肝炎相关基因 hfg12 hfas htnfr1microrna 病毒表达质粒构建

[发明专利]人纤维介素hfgl2 shRNA干扰质粒的构建方法及其药学用途-CN200610019489.2无效
发明人：宁琴;罗小平;李黎;习东;朱传龙;严伟明 -专利权人：华中科技大学同济医学院附属同济医院
申请日： 2006-06-29 - 公布日： 2007-05-09 - 主分类号： C12N15/66 文献下载
摘要：人纤维介素hfgl2 shRNA干扰质粒的构建方法及其药学用途，本发明涉及生物工程领域，具体地说是构建一种新的生物制剂：hfgl2shRNA干扰质粒，实现本发明具体技术方案是发明人构建了一种新的生物制剂－hfgl2 shRNA干扰质粒，根据hfgl2凝血酶原酶cDNA序列及设计原则筛选出靶序列，根据靶序列设计hfgl2 shRNA模板，再将模板设计于下游引物中，PCR扩增U6启动子，两端分别引入酶切位点BamH I和Hind III，将下游带有hfgl2 shRNA模板的U6启动子插入pMSCVneo载体相应酶切位点BamH I和Hind III，我们通过细胞水平实验，证实hfgl2 shRNA干扰质粒可以有效抑制hfgl2基因的表达。
纤维 hfgl2 shrna 干扰质粒构建方法及其药学用途

[发明专利]mfg12－鼠纤维介素反义质粒的构建方法及其药学用途-CN200610018749.4无效
发明人：宁琴;罗小平;朱传龙;孙奕;习东;严伟明 -专利权人：华中科技大学同济医学院附属同济医院
申请日： 2006-04-13 - 公布日： 2006-10-11 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明涉及生物材料领域。具体是利用MouseFibrinogen－like protein2，mfgl2、简称mfgl2鼠纤维介素反义质粒，构建一种新的生物制剂，用于病毒诱导的重型肝炎和其它以微循环障碍损伤为主要病理生理特征疾病的治疗的药学用途。本发明基于重型肝炎暂无确定有效的治疗方法，提出了一种用于治疗病毒诱导的重型肝炎的基因药物。发明人构建了一种新的生物制剂－mfgl2鼠纤维介素反义质粒，用以抑制mfgl2凝血酶原酶的表达。
mfg12 纤维反义质粒构建方法及其药学用途

[发明专利]一种超顺磁氧化铁复合纳米颗粒的制备方法-CN200510019060.9无效
发明人：姚凯伦;卢强华;刘祖黎;宁琴;习东;罗小平 -专利权人：华中科技大学
申请日： 2005-07-07 - 公布日： 2006-02-22 - 主分类号： C01G49/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种超顺磁氧化铁复合纳米颗粒的制备方法，其步骤为：首先通过氨水与柠檬酸钠的同时和速率可控地加入，使碱性条件下Fe³⁺与Fe²⁺离子共沉淀生成水相分散的、柠檬酸根吸附表面的Fe₃O₄纳米颗粒；再将其作为柠檬酸钠－金氯酸还原反应的晶种，形成金包覆SPION纳米颗粒。该Fe₃O₄－Au核－壳结构纳米颗粒兼具磁性和金包覆层。表面吸附的柠檬酸根可经配位交换反应被多种化学功能基团替代。本发明可以延缓四氧化三铁纳米颗粒的成核与生长速率；制成的四氧化三铁纳米颗粒在水相中分散极好，聚集结块的情况最小化。包覆金壳层后，这些高度分散的SPION不再对氧化敏感，磁性可以保持稳定，并且有许多用途，并且其稳定性提高。
一种超顺磁氧化铁复合纳米颗粒制备方法

[发明专利]hfg12凝血酶原酶双链RNA和反义寡核苷酸的构建方法及其应用-CN02154138.8无效
发明人：宁琴;罗小平;汪之沫;习东;严伟明;朱传龙 -专利权人：华中科技大学同济医学院附属同济医院
申请日： 2002-12-26 - 公布日： 2004-07-07 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：本发明公开了一种hfgl2凝血酶原酶双链RNA和反义寡核苷酸的构建方法及将构建的hfgl2凝血酶原酶双链RNA和反义寡核苷酸的应用。它是根据hfgl2凝血酶原酶的mRNA或cDNA序列合成或扩增产生dsRNA或ASON的基因模板，将模板插入一个基因表达的载体中形成的。将构建出的产品用于病毒性肝炎或急性移植排斥反应等的治疗。
hfg12 凝血酶原酶双链 rna 反义寡核苷酸构建方法及其应用

[发明专利]建立乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸的探测系统的方法-CN02154137.X无效
发明人：宁琴;姚凯伦;罗小平;刘祖黎;习东;卢强华 -专利权人：华中科技大学同济医学院附属同济医院
申请日： 2002-12-26 - 公布日： 2004-07-07 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种建立的HBV DNA的探测系统的方法。它是以HBV DNA1873－1912位为靶序列设计寡核苷酸探针，探针包含26个核苷酸，由两部分组成，其中主要部分长20个核苷酸，另外一小部分为6个核苷酸，将寡核苷酸的5’端或3’端进行烷烃硫醇修饰；将烷烃硫醇修饰的探针通过Au－S键共价结合于Au纳米颗粒或Fe₃O₄(核)/Au(壳)纳米颗粒上，采用操控俘捉探针，并在检测系统中加入连接链和信号放大物质，从而实现了临床上HBVDNA及其变异的超灵敏探测。本发明将DNA结合的特异性与纳米材料独有的特性有机地结合起来，具有灵敏度高、特异性强、检测成本低等优点。
建立乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸探测系统方法

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