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[发明专利]一种能够表达金针菇免疫调节蛋白的重组菌株及其构建方法、蛋白表达纯化方法和蛋白应用-CN201210475139.2有效
发明人：孔祥辉;张介驰;张丕奇;戴肖东;韩增华;马庆芳;刘佳宁;党阿丽 -专利权人： 黑龙江省科学院微生物研究所
申请日： 2012-11-21 - 公布日： 2013-02-13 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：一种能够表达金针菇免疫调节蛋白的重组菌株及其构建方法、蛋白表达纯化方法和蛋白应用，它涉及一种重组菌株的构建、表达纯化及其应用。本发明要解决现有金针菇免疫调节蛋白工程菌株表达率低，表达产物多为不溶性的包涵体，结构不确定以及菌体破碎、纯化工艺复杂不适合大规模生产应用的问题。本发明将金针菇免疫调节蛋白基因，以Transetta(DE3)作为宿主菌，构建重组菌株；再用IPTG诱导表达，通过溶菌酶法结合超声法处理后采用Ni-His·Band柱层析，Sephadex G25凝胶层析柱方法脱盐，即完成重组菌株的构建及表达纯化。其用于制备预防或治疗过敏症的药物。其纯化过程简单而快速，适于规模化发酵生产。
一种能够表达金针菇免疫调节蛋白重组菌株及其构建方法纯化应用

[发明专利]产色氨酸基因工程菌株的构建方法-CN201210234304.5无效
发明人：于冲;夏海华;曲晓军;王金英;孙建华;李思明 -专利权人： 黑龙江省科学院微生物研究所
申请日： 2012-07-09 - 公布日： 2012-10-10 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：产色氨酸基因工程菌株的构建方法，涉及一种产色氨酸基因工程菌株的构建方法。是要解决目前色氨酸生产方法存在色氨酸产率低、成本高的问题。方法：以大肠杆菌JMl09基因组DNA为模板，进行PCR扩增，获得目的基因aroG和trpBA；构建pMD18-T-aroG；和pET-32a载体酶切后连接，获得连接产物X；构建pMD18-T-trpBA；和pET-30a载体酶切后连接，获得连接产物Y；将连接产物X转化感受态细胞，再将连接产物Y转入，阳性重组菌即为产色氨酸基因工程菌株。本发明构建的工程菌株可过量表达DAHP合成酶和色氨酸合成酶，减少由反应产物对色氨酸合成酶的反馈抑制，增加色氨酸产量。用于生产色氨酸。
色氨酸基因工程菌株构建方法

[发明专利]一种奶牛乳房炎疫苗的制备方法-CN201210221977.7无效
发明人：曲晓军;孙建华;夏海华;于冲;王金英;李思明 -专利权人： 黑龙江省科学院微生物研究所
申请日： 2012-06-29 - 公布日： 2012-10-10 - 主分类号： A61K39/108 文献下载
摘要：一种奶牛乳房炎疫苗的制备方法，它涉及一种疫苗的制备方法。本发明提供一种奶牛乳房炎疫苗的制备方法，方法为：制备效价为1024以上的金黄色葡萄球菌毒素，效价为128以上的金黄色葡萄球菌类毒素，金黄色葡萄球菌菌体蛋白，无乳链球菌菌苗和大肠杆菌菌苗，经配伍后得到奶牛乳房炎疫苗。本发明的奶牛乳房炎疫苗是安全、无毒的，对攻毒组小白鼠的保护率达到了91.7％。本发明应用于奶牛乳房炎防治领域。
一种奶牛乳房疫苗制备方法

[发明专利]一株兼有高效解磷固氮及抑制病原真菌生长的产酸克雷伯氏菌-CN201210176840.4无效
发明人：吴皓琼;牛彦波;曹亚彬;郭立姝;殷博;甄涛 -专利权人： 黑龙江省科学院微生物研究所
申请日： 2012-05-31 - 公布日： 2012-09-26 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：一株兼有高效解磷固氮及抑制病原真菌生长的产酸克雷伯氏菌，涉及一株克雷伯氏菌菌株。本发明提供了克雷伯氏菌菌株，不仅具有高效稳定的解磷固氮、营养促生的功能同时还具有抑制多种植物病原真菌的能力。本发明的一株兼有高效解磷固氮及抑制病原真菌生长的产酸克雷伯氏菌属于产酸克雷伯氏菌ASP-15，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2010年12月17日，保藏号为CGMCC No.4488。本发明的产酸克雷伯氏菌ASP-15可取代单一功能的解磷、固氮菌株，可单独或与其它微生物菌株复合形成微生物制剂。
兼有高效固氮抑制病原真菌生长产酸克雷伯氏菌

[发明专利]白蚁内源木质纤维酶Bac-to-Bac重组杆状病毒的构建方法-CN201210170995.7无效
发明人：原韬;张介驰;谷军;张晓彦;于德水 -专利权人： 黑龙江省科学院微生物研究所
申请日： 2012-05-29 - 公布日： 2012-09-19 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：白蚁内源木质纤维酶Bac-to-Bac重组杆状病毒的构建方法，它涉及白蚁内源木质纤维酶重组杆状病毒的构建方法。本发明的目的是为了解决现有白蚁内源木质纤维酶的蛋白表达很难保证具有原始活性的问题。本发明利用PCR获得白蚁内源纤维素酶EG基因片段，连入pMD18-T，获得重组质粒，经转化、蓝白筛选后获得重组质粒p18EG1，经PCR及酶切鉴定，将EG基因片段转入pFastBack1质粒中，转化筛选后获得pFBEG1重组质粒，转染昆虫细胞后，即得。本发明最大程度接近白蚁自身内源木质纤维酶的表达环境，为提高表达产物活性提供最佳条件，从而找到高效、低成本的转化木质纤维的酶系。
白蚁内源木质纤维 bac to 重组杆状病毒构建方法

[发明专利]绿脓杆菌10118 PEA基因-CN201210114673.0无效
发明人：夏海华;于冲;李思明;曲晓军;王金英;孙建华 -专利权人： 黑龙江省科学院微生物研究所
申请日： 2012-04-18 - 公布日： 2012-09-12 - 主分类号： C12N15/54 文献下载
摘要：绿脓杆菌10118 PEA基因，涉及绿脓杆菌10118 PEA基因。本发明提供绿脓杆菌10118 PEA基因，其编码的绿脓杆菌10118 PEA蛋白具有很强的毒性，用于抑制肿瘤细胞内蛋白质的合成。本发明绿脓杆菌10118 PEA基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：1所示。绿脓杆菌10118 PEA基因编码蛋白绿脓杆菌10118外毒素A，对绿脓杆菌10118外毒素A进行毒力检测，与绿脓杆菌PA103外毒素A的毒力相近。说明绿脓杆菌10118 PEA蛋白具有很强的毒性，利用这种毒性作用制成针剂，对多种肿瘤细胞的免疫毒素进行肿瘤治疗将获得较好的效果。用于肿瘤质量领域。
绿脓杆菌 10118 pea 基因

[发明专利]一株降解二氯甲烷的甲基细菌-CN201210051551.1无效
发明人：曹亚彬;牛彦波;吴皓琼;甄涛;郭立姝;殷博 -专利权人： 黑龙江省科学院微生物研究所
申请日： 2012-03-01 - 公布日： 2012-07-18 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：一株降解二氯甲烷的甲基细菌，它涉及一株降解二氯甲烷的甲基细菌，本发明提供一株甲基细菌菌株，可高效降解二氯甲烷，可在有氧条件下降解二氯甲烷，为以二氯甲烷为代表的卤代烃类有机污染物的生物降解机理的研究提供了重要基础。本发明降解二氯甲烷的甲基细菌为甲基细菌Met26，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2012年1月4日，保藏号为CGMCC No.5693。本发明甲基细菌Met26能够高效降解二氯甲烷，甲基细菌Met26在以二氯甲烷为唯一碳源、二氯甲烷终浓度为30mmol/L的培养基中，培养10d后二氯甲烷浓度下降63.5％，15d后二氯甲烷浓度下降78.6％。
降解二氯甲烷甲基细菌

[发明专利]导入clfA基因的乳酸乳球菌基因工程菌株的构建方法-CN201210065114.5无效
发明人：曲晓军;崔艳华;张超;孙建华;夏海华;王金英;于冲 -专利权人： 黑龙江省科学院微生物研究所;哈尔滨工业大学
申请日： 2012-03-13 - 公布日： 2012-07-11 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：导入clfA基因的乳酸乳球菌基因工程菌株的构建方法，涉及一种导入clfA基因的乳酸乳球菌基因工程菌株的构建方法。是要解决目前使用大肠杆菌作为宿主表达clfA基因，研制基因工程疫苗存在侵袭性和毒性问题。方法：提取金黄色葡萄球菌的基因组DNA；以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板进行PCR扩增，获得clfA基因；提取保存于大肠杆菌JM109中的质粒pMG36c；分别对clfA基因和质粒pMG36c进行双酶切，将酶切后产物连接；将连接产物转化到大肠杆菌JM109感受态细胞中，采用氯霉素筛选转化子，构建重组质粒；将重组质粒电转化乳酸乳球菌，即完成。本发明可用于研制基因工程疫苗，安全、无致病性。
导入 clfa 基因乳酸球菌基因工程菌株构建方法

[发明专利]一种具有防治水稻稻瘟病的水稻内生细菌及其在水稻稻瘟病防治中的用途-CN201210049875.1无效
发明人：王玉霞;李晶;张淑梅;赵晓宇;孟利强;曹旭;张先成;张云湖 -专利权人： 黑龙江省科学院微生物研究所
申请日： 2012-02-29 - 公布日： 2012-07-11 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：一种具有防治水稻稻瘟病的水稻内生细菌及其在水稻稻瘟病防治中的用途，涉及一种具有防治水稻稻瘟病微生物材料及其在水稻稻瘟病防治中的用途。具有防治水稻稻瘟病的水稻内生细菌为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis Bsw-10，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.5742。所述的具有防治水稻稻瘟病的水稻内生细在水稻稻瘟病防治中的用途。本发明用于生物防治水稻稻瘟病。
一种具有防治水稻稻瘟病细菌及其中的用途

[发明专利]一株降解甲烷气体的甲基细菌-CN201210051553.0无效
发明人：殷博;牛彦波;甄涛;吴皓琼;郭立姝;曹亚彬 -专利权人： 黑龙江省科学院微生物研究所
申请日： 2012-03-01 - 公布日： 2012-07-04 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：一株降解甲烷气体的甲基细菌，它涉及一株甲基细菌。本发明提供一株甲基细菌菌株，可高效降解甲烷气体，为使用生物手段控制甲烷排放提供了重要基础。本发明降解甲烷气体的甲基细菌为甲基细菌Met18，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2012年1月4日，保藏号为CGMCC No.5692。本发明甲基细菌Met18能够高效降解甲烷气体，甲基细菌Met18在甲烷气体浓度为30％的培养瓶中，培养9天对甲烷气体的降解率达到55％，培养15天对甲烷气体的降解率达到89％。
降解甲烷气体甲基细菌

[发明专利]一种黑木耳栽培分床器-CN201110309846.X无效
发明人：张介驰;马庆芳;姜广文;张丕奇;刘佳宁 -专利权人： 黑龙江省科学院微生物研究所
申请日： 2011-10-13 - 公布日： 2012-05-02 - 主分类号： A01G1/04 文献下载
摘要：一种黑木耳栽培分床器，它涉及一种分床器。本发明解决了现有黑木耳的分床采用徒手操作，不但操作速度慢，每小时能分菌袋数目400-600袋，而且易把幼小的耳片碰掉，影响黑木耳栽培产量的问题。本发明包括手柄(1)、固定环(2)、两根连接筋(3)和多根插头(4)，两根连接筋(3)交叉设置在固定环(2)上，插头(4)为锥形插头，多根插头(4)的根部环形阵列在固定环(2)上，多根插头(4)的尖部悬置，手柄(1)固装在两根连接筋(3)的交汇处。本发明有效的提高了分床速度和黑木耳栽培产量，减少了黑木耳栽培中春耳秋管的打孔过程，同时本发明应用范围广、生产制造容易，成本低。本发明适用于黑木耳栽培的分床过程中。
一种黑木耳栽培分床器

[发明专利]一种适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法-CN201110286493.6无效
发明人：马庆芳;沙长青;张介驰;张丕奇;刘佳宁;戴肖东;孔祥辉;韩增华 -专利权人： 黑龙江省科学院微生物研究所
申请日： 2011-09-23 - 公布日： 2012-05-02 - 主分类号： A01G1/04 文献下载
摘要：一种适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法，涉及一种适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法。要解决目前食用菌菌种的优选方法存在操作过程复杂、周期长、需要空间大、观察结果不直观的问题。方法：一、取无霉变的秸秆，干燥后粉碎，过70目筛，得秸秆粉；二、配制培养基A；三、将食用菌菌种接种到食用菌母种培养基中，培养至长满食用菌母种培养基，得食用菌母种；四、将食用菌母种接入平板培养基培养，观察食用菌菌种的萌发和生长情况，选取萌发最快和长势最好的食用菌菌种，即完成适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选。本发明周期短，需要空间小，操作过程简单；观察食用菌菌种萌发、生长情况更直观，更明了。用于食用菌菌种的优选。
一种适于秸秆栽培食用菌菌种优选方法

[发明专利]一株具有双重酶活用于好氧堆肥发酵的高温菌-CN201110074212.0无效
发明人：牛彦波;吴皓琼;殷博;曹亚彬;郭立姝 -专利权人： 黑龙江省科学院微生物研究所
申请日： 2011-03-25 - 公布日： 2012-04-11 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：一株具有双重酶活用于好氧堆肥发酵的高温菌，它涉及一株高温菌。具有双重酶活用于好氧堆肥发酵的高温菌，它为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)NF705，属于芽孢杆菌属(Bacillus)，已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC No：4489，保藏日期为2010年12月17日。本发明以自然堆积的牛粪为分离源，采用高温培养驯化的手段分离筛选出一株具有双重酶活用于好氧堆肥发酵的高温菌，它具有较高纤维素酶活与蛋白酶活，羧甲基纤维素相对酶活性，1.56±0.11cm.d-1，蛋白酶相对活性1.28±0.2cm.d-1。
具有双重活用堆肥发酵高温

[发明专利]一种防治黑木耳黄孢原毛平革菌病害的方法-CN201110208934.0无效
发明人：刘佳宁;张介驰;张丕奇;戴晓东;韩增华;马庆芳;孔祥辉 -专利权人： 黑龙江省科学院微生物研究所
申请日： 2011-07-25 - 公布日： 2012-01-18 - 主分类号： A01G1/04 文献下载
摘要：一种防治黑木耳黄孢原毛平革菌病害的方法，它涉及一种防治黑木耳病害的方法。方法：一、将石膏、石灰、麦麸和木屑混合，得干料；二、将2，4，5，6-四氯-1，3-二氰基苯和干料混合，得物料，然后加水，获得培养料；三、将培养料装入菌袋中，装入的培养料上下松紧一致，装实后采用插棒方式封口，然后灭菌；四、灭菌后的菌袋冷却后接种黑木耳菌，按照常规方法进行栽培，即完成。本发明利用2，4，5，6-四氯-1，3-二氰基苯防治病原菌为的黄孢原毛平革菌的黑木耳病害，防治效率达到95％～100％；可保证2，4，5，6-四氯-1，3-二氰基苯与其它原料混合均匀，并生产污染降低，操作简单，容易掌握。
一种防治黑木耳原毛平革菌病害方法

[发明专利]一种以食用菌菌糠为原料的沼气制备方法-CN201110153826.8无效
发明人：谷军;沙长青;张晓彦;原韬 -专利权人： 黑龙江省科学院微生物研究所
申请日： 2011-06-09 - 公布日： 2011-12-21 - 主分类号： C12P5/02 文献下载
摘要：一种以食用菌菌糠为原料的沼气制备方法，涉及一种沼气制备方法。本发明是要解决目前食用菌生产后的废弃物菌糠被丢弃或燃烧而造成了资源浪费和环境污染的问题。方法：首先去除菌糠中的杂物，粉碎后晾干，加入复合微生物菌剂，密封，厌氧发酵；将处理后的菌糠与牛粪混合，然后加入到发酵池中，调节发酵池中固形物的含量，控制沼气发酵温度，控制发酵池装池容量，经过25～45天之后，即完成一个批次的沼气发酵。本发明利用食用菌生产后的废弃物菌糠作为发酵原料，解决了废弃菌糠造成的环境污染问题，变废为宝，不会造成环境的二次污染。应用于沼气发酵领域。
一种食用菌原料沼气制备方法

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