本发明公开了一种玉米转化事件HiII‑AtAAP1‑1及其特异性鉴定方法与应用。所述转化事件以SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列为外源基因的左侧翼序列,以SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列为外源基因的右侧翼序列。本发明提供的玉米转化事件可实现将外源基因特异性引入到玉米品系中,赋予受体玉米氮素高效利用以及耐除草剂草铵膦的能力。外源基因在受体玉米中能够稳定遗传;外源基因的表达对受体玉米的生理形态及氮素利用效率均有提高。本发明检测方法可以为利用转化事件进行分子标记检测,提高育种工作效率。
本发明涉及一种用于检测玉米植物ND4401的核酸分子及其检测方法,所述玉米植物的核酸分子序列包括SEQ ID NO:1所示序列或其互补序列、或者SEQ ID NO:2所示序列或其互补序列。本发明玉米植物ND4401具有高产和/或氮缺乏耐受性状,且检测方法可以准确快速地鉴定生物样品中是否包含转基因玉米事件ND4401的DNA分子。
本发明涉及一种用于检测玉米植物ND6603的核酸分子及其检测方法,所述玉米植物的核酸分子序列包括SEQ ID NO:1所示序列或其互补序列、或者SEQ ID NO:2所示序列或其互补序列。本发明玉米植物ND6603具有氮缺乏耐受性状,且检测方法可以准确快速地鉴定生物样品中是否包含转基因玉米事件ND6603的DNA分子。
本发明涉及一种用于检测玉米植物ND4403的核酸分子及其检测方法,所述玉米植物的核酸分子序列包括SEQ ID NO:1所示序列或其互补序列、或者SEQ ID NO:2所示序列或其互补序列。本发明玉米植物ND4403具有高产和/或氮缺乏耐受性状,且检测方法可以准确快速地鉴定生物样品中是否包含转基因玉米事件ND4403的DNA分子。
羊草几丁质酶LcChi2基因在提高植物耐冷性方面的应用,涉及植物分子生物学领域。该应用方法包括以下步骤:(1)将羊草几丁质酶LcChi2基因可操作地连于载体上的表达调控序列后,形成含SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的重组载体;(2)将步骤(1)获得的重组载体转化宿主植物细胞,经过筛选获得转化细胞;(3)将步骤(2)获得的转化细胞培育成具有耐冷性的转LcChi2基因植株及其后代。步骤(1)中,所述载体为植物表达载体pBI121或植物表达载体pCAMBIA3300。通过实验证实了转LcChi2基因烟草在冷环境下其种子萌发率有了明显提高,双子叶植物烟草和单子叶植物玉米、水稻过表达LcChi2基因都显著提高了植物苗期耐冷性,从而证明了过表达LcChi2基因显著提高了烟草、玉米、水稻等植物的耐冷能力。
一种人工合成的Bt抗虫基因FLIa及其制备方法和应用,属于抗虫蛋白及生物安全技术领域。该Bt抗虫基因FLIa的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,其编码的蛋白的氨基酸序列如序列表中的SEQ ID NO:2所示。该Bt抗虫基因FLIa的制备方法为:将抗虫基因Cry1Ab的Domain Ⅰ和Domain Ⅱ与抗虫基因Cry1Ia的Domain Ⅲ进行交换融合,获得重组抗虫基因MCry1I;在重组抗虫基因MCry1I的基础上,在3’端连入抗虫基因Cry1Ja1的碳末端,得到重组抗虫基因FLMCry1Ia;对重组抗虫基因FLMCry1Ia进行密码子改造,获得Bt抗虫基因FLIa。该Bt抗虫基因FLIa可在转化植物中稳定遗传和表达,且表达量高,所得转基因植物抗虫性好。该基因转化玉米、棉花、水稻、蔬菜等农作物,使其具备相应的抗虫活性,从而降低农药的使用量,以减少环境污染和生产成本。
本发明公开了一种人工合成的BT抗虫基因FLAc及其应用,其核苷酸序列为:1)序列如SEQ ID NO.1所示的DNA分子;或2)SEQ ID NO.1所示核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或几个核苷酸所得的DNA分子;或3)在严格条件下与1)限定的DNA序列杂交且编码相同功能多肽的核苷酸序列。本发明抗虫基因FLAc已报道的Cry基因最大同源性为77%,在拔节期、吐丝期高密度人工接玉米螟均显现出突出的抗玉米螟虫活性,为抗虫性基因的推广及商业化奠定基础。