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[发明专利]一种脂肪组织的保存液及其制备方法与脂肪组织的保存方法-CN201811548606.3在审
发明人：葛啸虎;陈海佳;马岩岩;李学家 -专利权人：广州康琪莱生物科技有限公司
申请日： 2018-12-18 - 公布日： 2019-03-08 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明属于细胞培养技术领域，公开了一种脂肪组织的保存液及其制备方法与脂肪组织的保存方法。本发明所述脂肪组织的保存液为含有海藻糖和枸橼酸钠的磷酸缓冲液，配方简单，不仅能够保持脂肪组织的活性，同时防止脂肪组织中多余的血液成分凝集，防止脂肪颗粒结团，达到延长脂肪组织保存时间的目的。本发明所述脂肪组织冻存液的制备方法为配制磷酸缓冲液，向所述磷酸缓冲液中加入海藻糖和枸橼酸钠，混合均匀，操作简便，易于生产。本发明所述脂肪组织的保存方法为将脂肪组织与本发明所述的保存液混合，2‑8℃保存，对细胞表面标志物无影响，可以有效延长脂肪组织保存时间。
脂肪组织保存液保存磷酸缓冲液制备枸橼酸钠海藻糖细胞表面标志物细胞培养技术凝集脂肪颗粒冻存液结团配制配方血液生产

[发明专利]Y-27632在间充质干细胞培养中的应用及间充质干细胞的培养方法-CN201510288527.3有效
发明人：王一飞;陈海佳;葛啸虎;黎娟妹;王小燕;李平 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2015-05-29 - 公布日： 2019-03-08 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及干细胞培养领域，尤其涉及Y‑27632在间充质干细胞培养中的应用及间充质干细胞的培养方法。本发明提供了Y‑27632作为间充质干细胞增殖促进剂的应用。本发明通过实验证实，相同培养条件下，培养基中添加Y‑27632能够促进间充质干细胞的增殖，本发明还提供了培养间充质干细胞的培养基和培养方法，实验表明，经培养五代后，与未添加Y‑27632的对照组相比，添加Y‑27632的实验组中，脐带间充质干细胞的数量提高31.87％；羊膜间充质干细胞的数量提高30％，骨髓间充质干细胞的数量提高27.27％。
间充质干细胞培养基骨髓间充质干细胞脐带间充质干细胞应用干细胞培养增殖促进剂培养条件实验组羊膜增殖

[发明专利]一种复苏脐带间充质干细胞的方法-CN201510791550.4有效
发明人：王一飞;陈海佳;葛啸虎;冯德龙;王小燕 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2015-11-17 - 公布日： 2019-03-01 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，公开了一种复苏脐带间充质干细胞的方法。该方法将传代至P3‑P5代的脐带间充质干细胞用完全培养基培养后，再用无血清的DMEM/F12培养基培养，分别在培养24h、48h、72h时收集培养基上清，将各上清离心后再取上清混合，获得条件培养基；将冻存的脐带间充质干细胞解冻，并加入到条件培养基中离心去上清，然后再次加入条件培养基重悬并培养至细胞融合度达到要求。本发明以培养过脐带间充质干细胞的培养基上清为复苏时的培养基，替代现有方法中普遍采用的间充质干细胞完全培养基，依靠其中包含的多种细胞在增殖过程中分泌的活性物质来促进复苏后的脐带间充质干细胞的生长，进而提高其活力。
一种复苏脐带间充质干细胞方法

[发明专利]一种复苏骨髓间充质干细胞的方法-CN201510791413.0有效
发明人：葛啸虎;陈海佳;王一飞;冯德龙;张维敏 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2015-11-17 - 公布日： 2019-03-01 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，公开了一种复苏骨髓间充质干细胞的方法。该方法将传代至P3‑P5代的骨髓间充质干细胞先用完全培养基培养后，再用无血清的DMEM培养基培养，分别在培养24h、48h、72h时收集培养基上清，将各时间段上清离心后再取上清混合，获得条件培养基；将冻存的骨髓间充质干细胞解冻，并加入到条件培养基中离心去上清，然后再次加入条件培养基重悬并培养至细胞融合度达到要求。本发明以培养过骨髓间充质干细胞的培养基上清为复苏时的培养基，替代现有方法中普遍采用的诸如α‑MEM、DMEM这种商业培养基，依靠其中包含的多种细胞在增殖过程中分泌的活性物质来促进复苏后的骨髓间充质干细胞的生长，进而提高活力。
一种复苏骨髓间充质干细胞方法

[发明专利]一种培养间充质干细胞的无血清培养基及其制备方法-CN201811339597.7在审
发明人：王一飞;陈海佳;葛啸虎;梁美乐;王小燕 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2018-11-12 - 公布日： 2019-02-26 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本申请属于干细胞技术领域，具体涉及一种培养间充质干细胞的无血清培养基及其制备方法。本发明所提供的一种培养间充质干细胞的无血清培养基，包含：人血白蛋白、表皮细胞生长因子和干细胞生长因子。该培养基成分确定，可避免血清的抑制因子TGF‑b浓度不同和位置成分的干扰，减少过敏源；本发明利用干细胞生长因子的自身特性，使得该无血清培养基针对性很强，有利于促进间充质干细胞的增殖和维持其细胞干性。
间充质干细胞无血清培养基干细胞生长因子制备表皮细胞生长因子干细胞技术人血白蛋白成分确定抑制因子培养基过敏源血清干性增殖细胞申请

[发明专利]一种DC细胞培养方法及培养基-CN201610088092.2有效
发明人： 陈海佳;王一飞;葛啸虎;万桦;张维敏 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2016-02-16 - 公布日： 2019-02-26 - 主分类号： C12N5/0784 文献下载
摘要：本发明涉及一种DC细胞培养方法及培养基。所述培养基含有重组人转铁蛋白、重组人胰岛素、GM‑CSF、IL‑4、IL‑15、黄体酮、人血白蛋白和基础培养基。所述DC细胞培养方法，使用本发明DC细胞培养基和包被有CD28单抗的培养容器培养PBMC。本发明提高了DC细胞的增殖倍数，极大提高了培养出的DC细胞的纯度。
一种 dc 细胞培养方法培养基

[发明专利]一种脂肪间充质干细胞保存液及其制备方法及应用-CN201811553563.8在审
发明人： 陈海佳;葛啸虎;王小燕;张文祺;姜交华 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2018-12-18 - 公布日： 2019-02-22 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明提供了一种脂肪间充质干细胞保存液及其制备方法和应用。本发明提供的脂肪间充质干细胞保存液，包括胎牛血清和DMSO，结果发现，本发明提供的保存液作为脂肪间充质干细胞保存液与现有的保存液相比，在脂肪间充质干细胞冻存复苏培养后，细胞活率以及相应的生物学特性均得到了较好的保护。
保存液脂肪间充质干细胞制备方法和应用生物学特性胎牛血清冻存制备复苏细胞应用发现

[发明专利]诱导脐带间充质干细胞向角膜上皮细胞分化的培养基和方法-CN201510540882.5有效
发明人： 陈海佳;王一飞;葛啸虎;戚康艺;马岩岩 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2015-08-28 - 公布日： 2019-02-22 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明涉及干细胞培养领域，尤其涉及诱导脐带间充质干细胞向角膜上皮细胞分化的培养基和方法。本发明在基础培养液中添加表皮生长因子和胰岛素，从而提高hUC‑MSCs向角膜上皮细胞分化的百分率。并且，该培养液中不含有异源血清，降低了风险。而本发明提供的方法将脐带间充质干细胞和羊膜上皮细胞共培养，能够显著提高分化百分率且所需培养周期较短。采用的脐带间充质干细胞来自脐带和胎盘，来源广泛，不受伦理和法理限制。
诱导脐带间充质干细胞角膜上皮细胞分化培养基方法

[发明专利]一种培养基及其应用、制备方法-CN201510547081.1有效
发明人： 陈海佳;王一飞;葛啸虎;戚康艺 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2015-08-28 - 公布日： 2019-02-22 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明涉及干细胞培养技术领域，特别涉及一种培养基及其应用、制备方法。该培养基包括角膜上皮细胞培养上清液和角膜基质。本发明提供的培养基明显提高了hUC‑MSCs向角膜上皮细胞特异性分化的几率。
一种培养基及其应用制备方法

[发明专利]一种细胞培养液及其在培养巨核祖细胞中的应用-CN201510848685.X有效
发明人： 陈海佳;王一飞;葛啸虎;万桦 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2015-11-27 - 公布日： 2019-02-22 - 主分类号： C12N5/078 文献下载
摘要：本发明涉及细胞培养领域，尤其涉及一种细胞培养液及其在培养巨核祖细胞中的应用。本发明将WNT3a蛋白、胰岛素、Flt‑3L、白蛋白、非必需氨基酸、血小板生成素、干细胞生长因子，白介素3和白介素6进行复配，添加入基础培养基，能够给细胞提供更加丰富的营养。实验表明，本发明提供的培养液用于巨核祖细胞的培养，能够选择性的促进巨核祖细胞的生长和增殖。以本发明提供的培养基培养巨核祖细胞20天，细胞数量增殖400倍～450倍，所得细胞中CD34+、CD41+双阳性表达率不低于35％。该效果显著优于现有技术的培养基(p<0.01)。
一种细胞培养液及其培养巨核祖中的应用

[发明专利]一种美容组合物及其制备方法和应用-CN201610137603.5有效
发明人： 陈海佳;王一飞;葛啸虎;麦锦连;王小燕 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2016-03-10 - 公布日： 2019-02-22 - 主分类号： A61K8/73 文献下载
摘要：本发明属于医学美容领域，尤其涉及一种美容组合物及其制备方法和应用。以重量份数计，本发明提供的美容组合物，包括：透明质酸钠0.2～10份；维生素C 5～50份；肝细胞生长因子0.05～0.5份；血小板衍生因子0.05～0.5份。该美容组合物配方简单，且在抗衰老方面有显著的功效。实验结果表明：在连续涂抹采用本发明提供的方法制得的美容组合物28天后，皮肤的算数平均粗糙度变化率≤‑22％，弹性相对变化率≥21％。
一种美容组合及其制备方法应用

[发明专利]适用于免疫细胞大规模培养的无血清培养基-CN201510475661.4有效
发明人：葛啸虎;陈海佳;王一飞;罗二梅;王小燕 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2015-08-05 - 公布日： 2019-02-19 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明公开了适用于免疫细胞大规模培养的无血清培养基，属于细胞生物学与医学免疫学领域。所述无血清培养基以RPMI1640培养基为基础，还含有添加成分，所述添加成分为羟乙基哌嗪硫磺酸、酚红·钠、L‑谷氨酸盐、碳酸氢钠，还可以添加胰岛素、转铁蛋白、硒、人血白蛋白、白介素‑2。本发明所含成分均为化学限定成分，不含任何动物血清成分，适用于对所有免疫细胞进行大规模培养、临床安全性高，且增殖效果更好。
适用于免疫细胞大规模培养血清培养基

[发明专利]一种免疫细胞及其制备方法-CN201510552168.8有效
发明人： 陈海佳;王一飞;葛啸虎;应杰 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2015-08-31 - 公布日： 2019-02-19 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种免疫细胞及其制备方法。该制备方法包括：将肿瘤细胞核苷酸和上清液混合，获得制剂1；取PBMC进行培养，分离悬浮细胞和贴壁细胞；贴壁细胞采用包含制剂1的培养基培养，获得DC细胞；悬浮细胞经诱导培养，获得杀伤性免疫细胞；将DC细胞与杀伤性免疫细胞共培养，制得免疫细胞。本发明同时利用肿瘤细胞核苷酸和蛋白致敏源，强化刺激DC细胞，发挥更强的抗原致敏作用，达到与肿瘤细胞更高的亲和性，且不存在肿瘤细胞的危险因素。
一种免疫细胞及其制备方法

[发明专利]一种巨核祖细胞制剂及其应用、制备方法-CN201510541192.1有效
发明人：葛啸虎;陈海佳;王一飞;曾维杰;李平 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2015-08-27 - 公布日： 2019-02-19 - 主分类号： A61K38/38 文献下载
摘要：本发明涉及干细胞制剂技术领域，特别涉及一种巨核祖细胞制剂及其应用、制备方法。该巨核祖细胞制剂包括巨核祖细胞、人血白蛋白、干细胞生长因子、白细胞介素‑2和红花注射液。本发明巨核祖细胞制剂对于血小板缺乏症具有显著的改善作用，输注后的患者体内血小板含量恢复正常水平后，能在体内维持较长一段时间，使用后无任何不良反应，使用安全，且制备简单，使用方便。
一种巨核祖细胞制剂及其应用制备方法

[发明专利]一种动员剂组合物及其应用、制剂-CN201510531013.6有效
发明人： 陈海佳;王一飞;葛啸虎;黎娟妹;李平 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2015-08-26 - 公布日： 2019-02-19 - 主分类号： A61K38/18 文献下载
摘要：本发明涉及生物化学技术领域，特别涉及一种动员剂组合物及其应用、制剂。该动员剂组合物包括AMD3100、CTX和G‑SCF。本发明的动员剂组合物动员时间短，相比现有技术需要几天的动员时间，更好地保护患者的身体机能的稳定；动员后的单个核细胞活力相比对照组高，且得到表达CD34的细胞要多；本发明的动员剂组合物各组份浓度用量远远比在临床上运用的小，对本身有重大负担的器官、系统减少损害；动员后的外周血造血干细胞能满足供者的治疗需求，且对患者的副作用小，提高患者生活质量，给患者保持良好预后的身体条件。
一种动员组合及其应用制剂