本发明公开了一种检测血液中HBV pgRNA的试剂盒,属于分子生物学技术领域,试剂盒包括扩增试剂,扩增试剂包括PCR反应液Ⅰ,PCR反应液Ⅰ包括SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的引物以及SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所示的探针。本发明提供的试剂盒,利用RNA单链需逆转录的特点,在逆转录引物的5’端增加一段特异的非HBV的序列,同时将合成该段序列的寡核苷酸作为cDNA扩增的引物,达到特异性扩增pgRNA的目的,检测过程中不受DNA干扰,有效提高了试剂盒检测时的灵敏度,对乙肝病毒pgRNA的检测下限可达10copies/ml。