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[发明专利] 一种用于百蕊草种植的播种装置 -CN202210234831.X 有效
发明人：
梁思佳 ;张新民 ;金双侠 刘宜源 ;许忠平 ;张新勤 ;陈渺生
- 专利权人：
黄淮学院
申请日：
2022-03-11
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公布日：
2023-06-16
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主分类号：
A01C7/04 文献下载
摘要： 本发明公开了一种依靠依靠取种板往复运动从而实现草种单粒落种进行播种的用于百蕊草种植的播种装置，种斗下方设置取种区，取种区中安装取种板，取种板下方安装支撑托板，支撑托板上安装落种管，种斗底部设置下种孔连通取种区，取种板上设置取种孔，取种板外侧连接有往复机构，移动取种板带动取种孔交替对应下种孔和落种管，气动落种机构安装在落种管的上方，取种板安装在气动落种机构和落种管之间。本发明能够实现连续的单粒播种，使草种独立分散播种，提高播种效率降低草种在播种过程中的浪费，提高草种的利用率，同时在落种管上方安装高压气体装置，通过高压气流主动推动草种落地播种，保证下种的均匀、流畅、不堵塞，提高草种的播种效率。一种 用于 百蕊草 种植 播种 装置
[实用新型] 一种百蕊草种子筛选设备 -CN202320407126.5 有效
发明人：
梁思佳 ;张新民 ;刘宜源 ;金双侠 许忠平
- 专利权人：
黄淮学院
申请日：
2023-03-07
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公布日：
2023-06-16
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主分类号：
B07B9/00 文献下载
摘要： 本实用新型公开了一种百蕊草种子筛选设备，包括：振动筛、振动组件、风鼓转筒和可调风鼓，振动筛的底面设有分别靠近振动筛两端的第一出料筛板和第二出料筛板，振动组件包括固定座、主轴杆和驱动电机，驱动电机的底面设有固定于地面的支撑架，主轴杆转动安装于固定座的表面且一端设有与驱动电机输出端传动连接的皮带轮，主轴杆的表面固定套接有偏心振子，可调风鼓转动安装于风鼓转筒的内侧。本实用新型中，利用振动组件和风鼓转筒进行百蕊草种子的筛分工作，由振动组件工作带动振动筛整体振动实现饱满种子与空壳的上下分层并配和风鼓转筒的送风进行表面空壳种子的分离工作，提高筛分工作效率且不影响种子正常培育。一种 百蕊草 种子 筛选 设备
[发明专利] 一种适用于陆地棉的基因精准高效编辑的方法 -CN202110583896.0 在审
发明人：
金双侠 张献龙 ;余露 ;王琼琼
- 专利权人：
华中农业大学
申请日：
2021-05-27
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公布日：
2021-09-03
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主分类号：
C12N15/84 文献下载
摘要： 本发明涉及植物基因工程技术领域，且公开了一种适用于陆地棉的基因精准高效编辑的方法，所述该载体的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。该适用于陆地棉的基因精准高效编辑的方法，通过对含有棉花内源启动子pGhU6‑7的pRGEB32‑GhU6.7‑NPTⅡ载体进行改造，以BeYDV双生病毒中复制子元件为载体，将sgRNA序列构建在复制环内，构建了在棉花中具有基因编辑功能的载体BeYDV‑Cas9，选取GhCLA为目标基因验证BeYDV‑Cas9在棉花中的应用，并且设计1个靶标，利用农杆菌介导的遗传转化将BeYDV‑Cas9基因编辑系统导入棉花基因组，对转基因植株进行Sanger测序，检测本发明在异源四倍体棉花基因组中的编辑效率类型，从而有效的解决了传统的CRISPR‑Cas9系统在对陆地棉进行基因编辑时无能为力，且并无可行有效编辑工具的问题。一种 适用于 陆地棉 基因 精准 高效 编辑 方法
[发明专利] 一种陆地棉基因组的高效定向基因调控的编辑方法 -CN202110572919.8 在审
发明人：
金双侠 张献龙 ;王茂军 ;李波 ;惠凤娇
- 专利权人：
华中农业大学
申请日：
2021-05-25
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公布日：
2021-08-20
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主分类号：
C12N15/82 文献下载
摘要： 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种陆地棉基因组的高效定向基因调控的编辑方法，本发明对含有棉花内源启动子pGhU6‑7的GhBE3‑Dcas9载体进行改造，以6TAL‑2VP64+2linker+dCas9融合蛋白取代原有的APOBEC1‑XTEN‑dCas9‑UGI蛋白，构建在棉花中具有定向上调单个基因表达量的载体Gh‑dCas9‑TV。选取GhEPSP和GhPAP1D为目标基因验证Gh‑dCas9‑TV在棉花中的应用。设计2个单靶标以及一个双靶标，利用农杆菌介导的遗传转化将转录激活编辑系统导入棉花基因组，对转基因植株进行表达量检测和转录组测序，检测本发明在异源四倍体棉花基因组中的编辑效率及全基因组和全转录组检测靶标基因，非靶标基因表达量效应。本发明具有良好的编辑效率和特异性。一种 陆地棉 基因组 高效 定向 基因 调控 编辑 方法
[发明专利] 利用单碱基编辑技术创造除草剂抗性植物的方法 -CN202110609717.6 在审
发明人：
金双侠 张献龙 ;王茂军 ;丁霄 ;惠凤娇
- 专利权人：
华中农业大学
申请日：
2021-06-01
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公布日：
2021-08-06
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主分类号：
C12N15/113 文献下载
摘要： 本发明涉及除草剂技术领域，且公开了利用单碱基编辑技术创造除草剂抗性植物的方法，包括以下步骤：1)GhEPSP基因的sgRNA设计：选择陆地棉5‑烯醇式丙酮酰莽草酸‑3‑磷酸合酶(5‑Enolpyruvylshikimate‑3‑phosphatesynthase，EPSP合酶)为验证基因，利用在线软件CRISPR‑P(http：//cbi.hzau.edu.cn/cgi‑bin/CRISPR)(Lei et al 2014)在基因外显子区域设计sgRNA靶标序列，并且在编辑窗口内C‑T突变改变氨基酸功能的靶点，最终选择1个sgRNA用来构建单碱基系统植物表达载体。该利用单碱基编辑技术创造除草剂抗性植物的方法，在棉花中首次成功应用棉花基因组特性的单碱基编辑系统对棉花GhEPSP实现单碱基突变，突变位点未见其他作物报道，通过叶片草甘膦涂抹实验，表现出一定的草甘膦耐受性，提高了棉田除草效率，降低了人工除草成本，防范棉田超级杂草。利用 碱基 编辑 技术 创造 除草剂 抗性 植物 方法
[发明专利] 一种高效的棉花代谢组学样本制备方法 -CN202110499760.1 在审
发明人：
金双侠 张献龙 ;斯欢 ;孙艺文
- 专利权人：
华中农业大学
申请日：
2021-05-08
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公布日：
2021-07-30
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主分类号：
G01N30/02 文献下载
摘要： 本发明涉及棉花代谢组学解析领域技术领域，且公开了一种高效的棉花代谢组学样本制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)、取棉花特定组织样品，迅速浸没于液氮中保存制成冷冻样本。本发明的样品制备和检测方法，通过真空冷冻干燥使样品的称量更加方便、准确，同时也保证了样品内代谢物的稳定性；在提取液中加入甲酸，通过降低提取液PH的方法，减弱提取反应过程中代谢产物发生的氧化反应，进一步保持样品提取过程的稳定性；通过多次试验，优化出一个相对合适的色谱梯度，这一个色谱方法可以旨在压缩较少代谢物出峰阶段的时间，减少分析时长，提升分离效率，与此同时，延长较多代谢物出峰的时间段，减少质谱分析中的离子抑制作用。一种 高效 棉花 代谢 样本 制备 方法
[发明专利] 基因编辑介导的外源基因敲入到棉花基因组的方法及载体 -CN202110608540.8 在审
发明人：
金双侠 张献龙 ;王茂军 ;李波 ;惠凤娇
- 专利权人：
华中农业大学
申请日：
2021-06-01
-
公布日：
2021-07-27
-
主分类号：
C12N15/82 文献下载
摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，且公开了基因编辑介导的外源基因敲入到棉花基因组的方法，包括以下步骤：1)菜豆黄矮病毒的复制子元件BeSRL和ULIR目的序列的获得：查阅文献DNA Replicons for Plant Genome Engineering从中获取菜豆黄矮病毒的复制子元件BeSRL和ULIR目的序列，然后经过(GenScript)合成；2)转化载体BeYDV‑Cas9‑KI的构建：利用限制性内切酶Sbf I酶切pRGEB32‑GhU6.7‑NPTⅡ载体，连接黄矮病毒的复制子元件BeSRL，将pRGEB32‑GhU6.7‑NPTⅡ进行Sbf I酶切。该基因编辑介导的外源基因敲入到棉花基因组的方法及载体，在棉花中首次成功建立了适应于棉花基因组特性的基因敲入编辑系统，该系统能够将外源基因定点插入到棉花基因组中，它将成为棉花功能基因组研究新的重要的技术手段，且在棉花中的敲入效率达1.0％。基因 编辑 敲入到 棉花 基因组 方法 载体
[发明专利] 一种新型CRISPR/Cas9基因编辑载体的载体制备方法 -CN202110583863.6 在审
发明人：
金双侠 张献龙 ;周家伟 ;扶春阳
- 专利权人：
华中农业大学
申请日：
2021-05-27
-
公布日：
2021-07-16
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主分类号：
C12N15/82 文献下载
摘要： 本发明涉及植物基因工程技术领域，且公开了一种新型CRISPR/Cas9基因编辑载体的载体制备方法，所述CRISPR/Cas9载体p7N‑EC通过下列步骤制备获得：获得目的序列EC1.2en‑1.1p，具体地，该目的序列通过以下步骤制备获得：先获得含有目的序列EC1.2en‑1.1p的载体pHEE401E‑ccdB，以pHEE401E‑ccdB载体为模板，利用Primer5软件设计引物，通过PCR扩增获得EC1.2en‑1.1p目的序列，利用SbfⅠ、BstBⅠ两种酶对pRGEB32‑GhU6.7‑NPT Ⅱ载体进行双酶切去除Ubiquitin启动子得到线性载体，然后与获得的EC1.2en‑1.1p目的序列进行In‑fusion连接。该新型CRISPR/Cas9基因编辑载体的载体制备方法，能对棉花基因组进行有效的基因编辑，且具有一定的基因编辑效率。一种 新型 crispr cas9 基因 编辑 载体 制备 方法
