本发明涉及酶工程技术领域,尤其涉及一种提高蔗糖异构酶热稳定性的突变体及其重组菌株。所述蔗糖异构酶突变体的氨基酸如SEQ ID NO.1所示。所述蔗糖异构酶突变体是在分散泛菌(Pantoea dispersa)来源的野生型蔗糖异构酶的基础上,发生第199位氨基酸由Ala突变成Leu获得的,其热稳定性较野生型提高了32.51%。利用本发明中的蔗糖异构酶突变体进行催化实验,催化产物中异麦芽酮糖的纯度可达到100%。本发明为蔗糖异构酶工业化应用方面奠定了基础。
本发明主要利用定点突变技术构建来源于特异腐质霉的β‑葡萄糖苷酶的突变体菌株,获得了一种葡萄糖耐受能力提高的β‑葡萄糖苷酶突变体A354P,其氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。相同条件下,突变体A354P的比活力为36.71U/mg,较野生型提高了40.28%;而且突变体A354P可在600mmol/L葡萄糖的激活下最高达到190.29%的相对活力,相比野生型具有显著提高的葡萄糖耐受能力;突变体A354P对于虎杖苷也具有更强的水解能力。本发明中的突变体在生物燃料、食品保健和生物合成等领域具有较高的应用价值。
本发明主要利用定点突变技术构建来源于特异腐质霉的β‑葡萄糖苷酶的突变体菌株,获得了一种葡萄糖耐受能力提高的β‑葡萄糖苷酶突变体,其氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。相同条件下,本发明突变体可在400mmol/L葡萄糖的激活下最高达到249.61%的相对活力,在葡萄糖浓度为2mol/L时,其相对活力仍能达到98.37%,具有良好的葡萄糖耐受能力。本发明中的突变体在生物燃料、食品保健和生物合成等领域具有较高的应用价值。
本发明主要利用定点突变技术构建来源于特异腐质霉的β‑葡萄糖苷酶的突变体菌株,获得了一种葡萄糖耐受能力提高的β‑葡萄糖苷酶突变体T331Q,其氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。相同条件下,本发明突变体可在400mmol/L葡萄糖的激活下最高达到239.0%的相对活力,在葡萄糖浓度为1.5mol/L时,其相对活力仍能达到112.61%,具有良好的葡萄糖耐受能力。本发明中的突变体在生物燃料、食品保健和生物合成等领域具有较高的应用价值。