本发明属于病原菌检测技术领域，具体涉及一种牛多杀性巴氏杆菌荚膜A型ELISA抗体检测试剂盒及其制备方法和应用。将序列如SEQ ID NO.1所示的基因整合到表达载体上并转入宿主菌；诱导宿主菌表达并纯化后获得序列如SEQ ID NO.2所示的PmA153重组抗原蛋白；将PmA153包被在固相载体上，即可通过酶联免疫吸附的检测方法实现对样品中的牛多杀性巴氏杆菌荚膜A型的抗体的检测，实现诊断目的。本发明提供的试剂盒，不使用多杀性巴氏杆菌作为抗原来源，具有良好的生物安全性及生产便宜性，对牛多杀性巴氏杆菌荚膜A型抗体检测具有良好的特异性，能够精准诊断牛多杀性巴氏杆菌荚膜A型肺炎，具有重要的临床应用价值。
本发明提供了一种制备防治牛、羊棘球蚴病多表位重组疫苗的基因、蛋白质、疫苗和应用，属于动物疫苗制备技术领域，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明提供的基因制备得到的多表位重组疫苗具有良好的免疫原性和安全性，且目的蛋白表达量高，抗原纯度高，制备工艺简单，不使用尿素，安全环保，提高了生产效率，具有重要的工业和研究价值。
本发明公开了一种可溶性表达EG95蛋白及其制备方法和应用，该蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，是在羊棘球蚴EG95基因后通过柔性连接子连接一个促溶标签而得到，其保留了完整的EG95蛋白序列，最大限度地保留了原蛋白的免疫原性，所使用的促溶标签对原蛋白影响小，不但能有效促溶，还不会对镍柱纯化或免疫等造成影响；相对于包涵体表达生产工艺的复杂性，可溶性表达简化了蛋白生产工艺，提高了生产效率，减少了多个纯化步骤带来的蛋白损失，还减少了氨氮废水的排放量；该蛋白可作为抗原用于制备羊棘球蚴病基因工程亚单位疫苗，动物试验结果证实，由其制得的疫苗具有良好的免疫效力和安全性。
