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[发明专利]利用高渗低聚糖液制备固态益生菌制剂的方法-CN201310662943.6有效
发明人：童立恒;徐曙光;陈文静;赵西选;杨富键 -专利权人：湖北花果山实业有限公司
申请日： 2013-12-09 - 公布日： 2014-04-02 - 主分类号： A61K35/74 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用高渗低聚糖液制备固态益生菌制剂的方法，包括以下步骤：1）量取体积为Vml的益生菌菌液，向益生菌菌液中加入保护剂混合均匀后，再加入低聚糖充分搅拌，得到益生菌混合液，所加入保护剂的质量为1～8%Vg，所加入的低聚糖质量为30～70%Vg；2）将益生菌混合液在20～42℃的条件下保温处理30～240min；3）向经保温处理的益生菌混合液中加入发泡膨松剂混合均匀后，再加入辅料充分搅拌，得到益生菌混合物料，所加入的发泡膨松剂质量为0.1～0.8%Vg，所加入辅料的质量为40～80%Vg；4）将益生菌混合物料在30～37℃下真空干燥，然后进行粉碎，即得到固态益生菌制剂。该方法工艺简单、能耗低、节能环保。
利用高渗低聚糖制备固态益生菌制剂方法

[发明专利]一种离体高效构建多拷贝毕赤酵母表达载体的方法-CN201210591987.X有效
发明人：马立新;赵西选;陈晚苹;李晔星;付玲;姚永兰 -专利权人：湖北大学;湖北花果山实业有限公司
申请日： 2012-12-29 - 公布日： 2014-02-05 - 主分类号： C12N15/66 文献下载
摘要：本发明提出了一种离体高效构建多拷贝毕赤酵母表达载体的方法，其步骤为：1）在pPIC9K表达载体的基础上，构建载体pHBM905A；2）构建重组载体pHBM905BDM；3）选择需表达的外源基因蛋白；4）构建含有外源基因蛋白的单拷贝重组载体pHBM905BDM-gene-1；5）基于Biobrick方法，构建了人工体外串联重复表达盒式结构多拷贝的新载体pHBM905BDM-gene-n。本发明基于对pPIC9K表达载体的一系列改造，构建了适合于离体构建多拷贝的重组载体pHBM905BDM；进一步实现了构建含有外源基因的单拷贝重组载体pHBM905BDM-gene-1和多拷贝重组载体pHBM905BDM-gene-n。这些高拷贝的重组质粒只是在测序正确的1拷贝的基础上酶切酶连得到，无需再测序，这样就可以节约成本，省时省力，同时大大提高了外源基因蛋白表达能力。
一种高效构建拷贝酵母表达载体方法

[发明专利]一种高纯度甘露低聚糖的制备方法-CN201310428885.0有效
发明人：王光荣;赵西选;杨富键;向阳;梅德斌;徐曙光;余梦成 -专利权人：恩施天天佳生物科技有限公司
申请日： 2013-09-18 - 公布日： 2013-12-25 - 主分类号： C12P19/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种高纯度甘露低聚糖的制备方法，步骤：1、酶解转化生产出甘露低聚糖混合物；2、离心分离：用离心机分离酶解液；（3）陶瓷膜过滤：离心液采用陶瓷膜组作为精密分离的过滤，去除蛋白质、淀粉和多糖物质；（4）离子交换精制：对甘露低聚糖陶瓷膜过滤液进行脱盐、脱色、脱味；（5）2千分子量超滤：将离子交换精制液用截留量道尔顿聚醚砜聚酰胺复合膜超滤，获得聚合度；（6）纳滤：经过陶瓷膜、离子交换精制、超滤膜过滤后的糖液；（7）喷雾干燥：将纳滤后的浓缩液预热，进入喷雾干燥塔进行干燥。干燥后成品甘露低聚糖含量在95%以上，具有明显的增殖双歧杆菌功能，同时减少有害菌，是一种最具前景的抗生素替代品。
一种纯度甘露聚糖制备方法

[发明专利]一种重组甘露聚糖酶及其基因工程菌和水解制备甘露寡糖的方法-CN201210591856.1有效
发明人：马立新;赵西选;喻诗;李晔星;王亚平;姚永兰 -专利权人：湖北大学;湖北花果山实业有限公司
申请日： 2012-12-29 - 公布日： 2013-06-12 - 主分类号： C12N15/56 文献下载
摘要：本发明提出了一种重组甘露聚糖酶及其基因工程菌和水解制备甘露寡糖的方法，其步骤为：1）根据毕赤酵母密码子偏爱性，优化重组β-甘露聚糖酶基因；2）构建含有重组β-甘露聚糖酶基因的表达载体pHBM905BDM-Man，转化毕赤酵母GS115感受态细胞，培养验证得单拷贝基因工程菌；3）构建培养验证多拷贝的基因工程菌；4）用不同拷贝数的基因工程菌高效表达制备重组β-甘露聚糖酶；5）用重组β-甘露聚糖酶水解甘露聚糖底物生产甘露寡糖，底物水解浓度15-40%，温度50-55℃，时间0.5-2小时。目前，两拷贝β-甘露聚糖酶基因工程菌GS115/MAN78（CCTCCNo：2012554）表达水平较高。本发明重组β-甘露聚糖酶活性高达5000U/mL（DNS法），水解底物特异性高，水解底物浓度明显高于其他方法。
一种重组甘露聚糖及其基因工程水解制备寡糖方法

[发明专利]一种离体高效构建多拷贝解脂耶氏酵母表达载体及其应用方法-CN201210587997.6有效
发明人：马立新;赵西选;陈羽西;李晔星;张玲;姚永兰 -专利权人：湖北大学;湖北花果山实业有限公司
申请日： 2012-12-29 - 公布日： 2013-04-24 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明提出一种离体高效构建多拷贝解脂耶氏酵母表达载体及其应用方法，重组表达载体步骤为：设计4条引物，分别加在pINA1296载体的启动子上游和终止子下游，分别PCR扩增包括以启动子和终止子为区域的小片段及以载体的其他框架为区域的大片段，经回收纯化后，转化大肠杆菌XL10-Gold；验证重组子，得用于多拷贝解脂耶氏酵母表达载体pINA1296I。应用方法为：选择需表达的目的基因，将目的基因插入pINA1296I载体中，组成新的含有目的基因的单拷贝重组质粒pINA1296I-xxx-A1。再利用生物砖方法来实现体外串联多拷贝目的基因，pINA1296I-xxx-A2，pINA1296I-xxx-A3，pINA1296I-xxx-A4等。本发明安全、简单、易操作，可以提高目的蛋白的表达量。
一种高效构建拷贝解脂耶氏酵母表达载体及其应用方法

[发明专利]一种离体高效构建多拷贝乳酸克鲁维酵母表达载体的方法-CN201210587460.X无效
发明人：马立新;赵西选;刘晓倩;李晔星;王亚平;姚永兰 -专利权人：湖北大学;湖北花果山实业有限公司
申请日： 2012-12-29 - 公布日： 2013-04-24 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明提出了一种离体高效构建多拷贝的乳酸克鲁维酵母表达载体的方法，步骤为：1）根据乳酸克鲁维酵母KluyveromyceslactisGG799的载体pKLAC2基因序列，设计合成PCR用的10个引物；2）合成四个限制性内切酶位点的酵母表达核式结构的基因片段；3）构建表达载体BpKLAC2；4）用限制性内切酶酶切验证重组载体的正确性；5）在表达载体BpKLAC2上插入目的基因成为含有目的基因的单拷贝表达载体；6）应用生物砖法，离体多拷贝表达载体。应用本发明能够提高乳酸克鲁维酵母表达目的蛋白质基因的表达量和稳定性。
一种高效构建拷贝乳酸克鲁酵母表达载体方法

[发明专利]渣变煤技术-CN201010267656.1无效
发明人： 赵西选;曹玉昆;艾名炎 -专利权人： 赵西选;曹玉昆;艾名炎
申请日： 2010-08-31 - 公布日： 2012-03-21 - 主分类号： C10L9/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种使煤矿渣转化为燃煤的专有技术，属能源开发利用技术领域。煤矿渣系矿渣、煤矸石及煤粉的混合物，均含有一定量固定碳，历来被作为废弃物。本发明以一套系列的专用技术，将煤矿渣之潜在热能释放，使之燃烧，发挥燃煤之热功能；采用配煤原理，将其配制成不同用户所需之理想煤种，实现被作为“弃物”的煤矿渣转变为煤的能源开发利用目标。该系统由释热、激活、引燃、层燃技术以及配煤技术组成。采用该技术，将可使常规条件下不能利用的煤矿渣产生2000-3000大卡热量；与一定量中低热值煤配制，可成为CFB锅炉的理想用煤；与一定量的中高热值煤配制，则可作为常规煤种使用。采用此类煤种的成本比常规用煤降低25％-30％。煤矿渣有量大、成本极低的优势，本发明具有利用废物、开发热能资源、减少弃物堆积、减轻污染、降低用煤成本等多重效果。
渣变煤技术

[发明专利]煤矿矿渣热能激活剂-CN201010250664.5无效
发明人： 赵西选;曹玉昆;艾名炎 -专利权人： 赵西选;曹玉昆;艾名炎
申请日： 2010-08-11 - 公布日： 2012-03-14 - 主分类号： C10L9/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种激活煤矿渣潜在热能的制剂，属节能环保技术领域。煤矿渣被作为废弃物，量大堆积占地、有害物析出污染环境。本发明以常见原料特定组分作用成为煤矿渣热能激活制剂。该剂由高碳页岩、矾石、高锰酸钾、硝酸钠、碳酸钠、催化剂、水等物质制成；以该剂1％比例与煤矿渣混合，以其分段增氧、催化、引导机理，激活矿渣热能，促其燃烧产生2500大卡左右热量，可作辅助能源，加适量中热值煤即成为适于CFB锅炉的理想燃料，成本下降30％以上；此制剂在煤燃烧中将SO2等有害物固定于煤渣减少排放。本发明具有资源利用、减少废物堆积、减轻污染、降低用煤成本等功效，用法简单易推广，经济、生态、社会效益显著。
煤矿矿渣热能激活剂

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