本发明公开了一种烟草NtCCC1基因突变体及分子鉴定方法和应用，所述烟草NtCCC1基因突变体为Ntccc1‑1，其为烟草NtCCC1基因第650位的T突变为A，形成终止密码子，使该基因提前终止；所述基因突变体Ntccc1‑1的核苷酸序列如SEQ ID N0.2所示。本发明通过系统研究，首次提出了一种烟草NtCCC1基因突变体及分子鉴定方法和应用，本发明提出的降低烟草烟叶中氯离子含量的NtCCC1基因突变体为Ntccc1‑1获得的烟草植株，烟叶中氯离子含量比对照降低57.1％，使烟叶的氯离子含量显著降低。
本发明公开了一种烟草NtSLAC1基因突变体及分子鉴定方法和应用，所述烟草NtSLAC1基因突变体为Ntslac1‑1，其为烟草NtSLAC1基因第57位的G突变为A，形成终止密码子，使该基因提前终止；所述基因突变体Ntslac1‑1的核苷酸序列如SEQ ID N0.2所示。本发明通过系统研究，首次提出了一种烟草NtSLAC1基因突变体及分子鉴定方法和应用，本发明提出的降低烟草烟叶中氯离子含量的NtSLAC1基因突变体Ntslac1‑1获得的烟草植株，烟叶中氯离子含量比对照降低51.4％，使烟叶的氯离子含量显著降低。
本发明涉及一种植物编码序列、扩增引物及在优化株型节间距的应用，本发明所涉编码基因：烟草NtbHLH137基因核苷酸序列如SEQ ID No：1所示；编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No：2所示；过量表达该基因能增加烟草的节距，改善烟草植株的株型，因此NtbHLH137在烟草株型育种领域有广阔的应用前景。本发明所述的NtbHLH137是植物MYC转录因子基因，调控NtbHLH137的表达能够调节烟株的节间距。因此所述的调控株型的基因NtbHLH137在植物株型育种领域应用前景，其经济效益潜力巨大。
本发明涉及烟草NtPht1‑7基因突变体及其应用，属于基因工程技术领域。本发明将NtPht1‑7基因经甲基磺酸乙酯(EMS)诱变引起烟草NtPht1‑7基因编码区第648位碱基发生G‑A的突变，导致氨基酸发生从色氨酸到终止突变的变化，将该NtPht1‑7基因突变体命名为NtPht1‑7，其编码区核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，该基因发生突变后会导致烟草叶片中总砷离子含量降低。砷离子含量是烟草安全性的重要指标，因此该突变体材料在烟草上具有极大的育种价值。
本发明涉及一种植物编码序列、扩增引物及其在优化株高上的应用，本发明所涉编码基因：烟草NtbHLH137基因核苷酸序列如SEQ ID No：1所示；编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No：2所示；过量表达该基因能增加烟株的株高，NtbHLH137在烟草株型育种领域有广阔的应用前景。本发明所述的蛋白NtbHLH137是植物MYC转录因子基因，调控NtbHLH137的表达能够调节烟株的株高，在烟草中过表达该基因能够显著增加烟草的株高。因此所述的调控株型的基因NtbHLH137在植物株型育种领域应用前景，其经济效益潜力巨大。
本申请公开了一种PR‑1B蛋白在烟草植株育种中的应用，包括以下步骤：检测感染黑胫病的烟草植株中PR‑1B蛋白的表达量，当PR‑1B蛋白的表达量处于过表达时，该烟草植株具有抗黑胫病特性；PR‑1B蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No:1所示。本申请中公开的PR‑1B蛋白能够运用于可靠、灵敏地检测烟草对黑胫病的抗性，同时为筛选烟草耐黑胫病品种以及辅助传统杂交育种提供一条全新的途径，适于大规模推广应用。
本发明“用于鉴别烟草尼古丁含量高低的分子标记Nicotine Associated SNP 1及其试剂盒与应用”属于分子生物学技术领域。所述分子标记Nicotine Associated SNP 1为位于烟草基因组版本Nitab v4.5Genome Scaffolds Edwards2017的第0002539号基因组片段第95304位的SNP位点Nitab4.5_0002539:95304A/G。本发明可100％准确地鉴别筛选尼古丁含量高低的烟草种质资源，筛选得到的烟草材料可不经转基因方法，直接用于选育新的烟草品种。
本发明公开了一种烟草NtSLAH3基因突变体及分子鉴定方法和应用，所述烟草NtSLAH3基因突变体为NtSLAH3‑1，其为烟草NtSLAH3基因第487位的C突变为T，形成终止密码子，使该基因提前终止；所述基因突变体NtSLAH3‑1的核苷酸序列如SEQ ID N0.2所示。本发明通过系统研究，首次提出了一种烟草NtSLAH31基因突变体及分子鉴定方法和应用，本发明提出的降低烟草烟叶中氯离子含量的NtSLAH3基因突变体NtSLAH3‑1获得的烟草植株，烟叶中氯离子含量比对照降低62.9％，使烟叶的氯离子含量显著降低。
本发明公开了一种烟草NtCLC‑f基因突变体及分子鉴定方法和应用，所述烟草NtCLC‑f基因突变体为Ntclc‑f，其为烟草NtCLC‑f基因第1003位的C突变为T，形成终止密码子，使该基因提前终止；所述基因突变体Ntclc‑f的核苷酸序列如SEQ ID N0.2所示。本发明通过系统研究，首次提出了一种烟草NtCLC‑f基因突变体及分子鉴定方法和应用，本发明提出的降低烟草烟叶中氯离子含量的NtCLC‑f基因突变体Ntclc‑f获得的烟草植株，烟叶中氯离子含量比对照降低28.6％，使烟叶的氯离子含量显著降低。
烟草细胞色素C基因NtCYP94B3s及对提高烟草茉莉酸含量的应用，所述的烟草细胞色素C基因NtCYP94B3s的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示；或者与序列表SEQ ID No：1限定的DNA序列杂交的核苷酸序列；或者与序列表SEQ ID No：1限定的DNA序列具有70％以上同源性，且编码相同功能蛋白质的DNA序列。本发明中，在烟草植株内抑制烟草内源基因NtCYP94B3s的表达，会使烟草烟叶的JA及JA‑IIe含量明显提高，在植物高JA及JA‑IIe含量育种领域具有广阔的应用前景。
利用烟草细胞色素C基因NtCYP94B3s提高烟草叶片数与生物量的方法，所述烟草细胞色素C基因NtCYP94B3s的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示，方法是先构建植物RNAi载体。然后鉴定农杆菌介导的烟草转化及转基因植株，之后提取野生型植株和25株转pHellsgate12的RNA基因T0代植株的总RNA，进行Real time‑PCR分析，内参基因为26s，分析不同株系的表达情况，选取表达量最低的2株植株。本发明中，在烟草植株内抑制烟草内源基因NtCYP94B3s的表达会使烟草叶片数及生物量明显提高。该方法具有广阔的应用前景，经济效益潜力巨大。
一种烟草NtbHLH13基因突变体及分子鉴定方法和应用，所述烟草NtbHLH13基因突变体为Ntbhlh13，其为烟草Ntbhlh13基因第215位的G突变为A，形成终止密码子，使该基因提前终止，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明的烟草NtbHLH13基因突变体Ntbhlh13在基因发生突变后，烟草烟碱含量会明显上调，显著提高烟草品质，在烟草育种上具有极大的价值。
一种烟草NtIAA27基因突变体及分子鉴定方法和应用，所述烟草NtIAA27基因突变体为Ntiaa27‑1，其为烟草NtIAA27基因第576位的G突变为A，形成终止密码子，使该基因提前终止，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明的烟草NtIAA27基因突变体Ntiaa27‑1在基因发生突变后，烟草烟碱含量会明显上调，显著提高烟草品质，在烟草育种上具有极大的价值。
