本发明公开了一种新型基因组编辑工具(Lb2Cas12a‑RVR)及其构建方法和应用方法,其技术方案要点是包括包括编码表达Lb2Cas12a‑RVR突变型蛋白编码质粒pcDNA3.1‑hLb2Cas12a‑RVR,编码蛋白的DNA序列如SEQ ID NO.1所示,该新型改造的基因组编辑工具及其构建方法和应用方法,以解决在精确位点特异性基因编辑的低活性和低保真性的问题,有助于临床肿瘤治疗靶标的筛选,药物开发,致病突变纠正等进行深入研究,其在人类细胞中具有基因组编辑活性,并且具有更好的的PAM灵活性、高保真度和特殊的切割方式。