本发明公开了一种柔嫩艾美耳球虫重组多肽疫苗VKVQ的制备方法，制备方法包括：步骤一，VKVQ编码基因的克隆，根据鸡球虫基因序列设计上游引物SEQ ID NO:3和下游引物SEQ ID NO:4,进行PCR扩增、电泳得到一条约1200bp的片段，将该产物连接转化后得到序列全长为1245bp的VKVQ,其序列为SEQ ID NO:1以及后续相关步骤。该方法制备的疫苗通过免疫柔嫩艾美耳球虫重组多肽疫苗VKVQ真核表达质粒和原核表达蛋白，能有效控制鸡体感染柔嫩艾美耳球虫，大大降低养鸡场抗球虫药的使用量，有效控制鸡球虫病。
本发明公开了一种核酸分子、PCR引物对及用于检测禽毛滴虫β‑tubulin基因的试剂盒。发明人通过广泛研究，在禽毛滴虫中克隆得到如SEQ ID NO:1所示的禽毛滴虫β‑tubulin全长基因编码序列，并利用该β‑tubulin全长基因编码序列进一步设计得到能够检测禽毛滴虫β‑tubulin基因及其转录水平的PCR引物对和相应的PCR反应条件，进而组装成用于检测禽毛滴虫β‑tubulin基因的试剂盒，从而可以满足寄生生物学、生命科学研究者的检测需要，以及促进对该病原的基因水平检测及其致病机制的研究进展，为基因功能研究和药物开发等研究工作提供有利技术支撑。
本发明公开了一种核酸分子、PCR引物对及用于检测禽毛滴虫EF1A基因的试剂盒。发明人通过广泛研究，在禽毛滴虫中克隆得到如SEQ ID NO:1所示的禽毛滴虫EF1A全长基因编码序列，并利用该EF1A全长基因编码序列进一步设计得到能够检测禽毛滴虫EF1A基因及其转录水平的PCR引物对和相应的PCR反应条件，进而组装成用于检测禽毛滴虫EF1A基因的试剂盒，从而可以满足寄生生物学、生命科学研究者的检测需要，以及促进对该病原的基因水平检测及其生长应激反应的研究进展，为基因功能研究和药物开发等研究工作提供有利技术支撑。上述PCR引物对重复性高，特异性强，灵敏度高，对非目的基因没有扩增信号。
本发明公开了一种柔嫩艾美耳球虫重组多肽疫苗VNQS的制备方法，制备方法包括：步骤一，VNQS编码基因的克隆，根据鸡球虫基因序列设计上游引物SEQ ID NO:3和下游引物SEQ ID NO:4,进行PCR扩增、电泳得到一条约1500bp的片段，将该产物连接转化后得到序列全长为1452bp的VNQS,其序列为SEQ ID NO:1以及其他相关制备步骤。该方法制备的疫苗通过免疫柔嫩艾美耳球虫重组多肽疫苗VNQS真核表达质粒和原核表达蛋白，能有效控制鸡体感染柔嫩艾美耳球虫，大大降低养鸡场抗球虫药的使用量，有效控制鸡球虫病。
本发明公开了一种核酸分子、PCR引物对及用于检测禽毛滴虫rpoB基因的试剂盒。发明人通过长期研究，在禽毛滴虫中克隆得到如SEQ ID NO:1所示的禽毛滴虫rpoB全长基因编码序列，并利用该rpoB全长基因编码序列进一步设计得到能够检测禽毛滴虫rpoB基因及其转录水平的PCR引物对和相应的PCR反应条件，进而组装成用于检测禽毛滴虫rpoB基因的试剂盒，从而可以满足寄生生物学、生命科学研究者的检测需要，以及促进对该病原的基因水平检测及其致病机制研究的进展，为基因功能研究和药物开发等研究工作提供有利技术支撑。上述PCR引物对重复性高，特异性强，灵敏度高，对非目的基因没有扩增信号。
本发明涉及一种用于鉴别柔嫩艾美耳球虫的野毒虫株和疫苗虫株的特异性引物对、鉴别产品及方法。特异性引物对包括如SEQ ID No.1所示的上游引物和如SEQ ID No.2所示的下游引物。采用该特异性引物对检测柔嫩艾美耳球虫，能够实现对其野毒虫株和疫苗虫株的区别，填补了目前柔嫩艾美耳球虫研究的空白。并且，发明人还发现，采用该引物对检测柔嫩艾美耳球虫的过程中，还能有效避免其他鸡球虫病病原虫虫株的干扰。本发明提供的特异性引物对，适用于PCR检测、HRM检测和芯片检测等，操作简单，重复性高。采用该特异性引物对建立的鉴别方法有助于精准监测活疫苗免疫后鸡群的野毒感染情况，为鸡球虫的疫病防控提供参考。
本发明涉及一种用于鉴别巨型艾美耳球虫的野毒虫株和疫苗虫株的特异性引物对、鉴别产品及方法。所述特异性引物对包括如SEQ ID No.1所示的上游引物和如SEQ ID No.2所示的下游引物。采用该特异性引物对检测巨型艾美耳球虫，能够实现对其野毒虫株和疫苗虫株的鉴别，并且在检测过程中能够避免其他鸡球虫病病原虫的干扰，特异性很强，同时还具有操作简单、重复性高的特点。该特异性引物适用于PCR检测、HRM检测和芯片检测等，采用该特异性引物对建立的鉴别方法，有助于精准监测活疫苗免疫后鸡群的野毒感染情况，为鸡球虫的疫病防控提供参考。
