本发明公开了一种基于拆分型核酸适配体和硫代黄素T检测ATP的方法，属于生物传感及分析领域。该方法为：将拆分型适配体Apt‑1和Apt‑2分别加入到Tris‑HCl缓冲溶液Ⅰ中，其序列分别为Apt‑1：SEQ ID NO.1和Apt‑2：SEQ ID NO.2；将Apt‑1和Apt‑2按摩尔比1：1加入到Tris‑HCl缓冲溶液Ⅱ中预处理；向含有ThT和预处理后的拆分型适配体的Tris‑HCl缓冲溶液Ⅱ中，加入含ATP的待测溶液，以440 nm为激发波长，进行荧光检测，当荧光信号增强时，则待测溶液中的ATP浓度增大；其中ThT和预处理后的拆分型适配体的摩尔比为10：1。本发明的方法不仅简便、快速、成本低，而且具有较高的选择性和实用性，在复杂的生物血清中表现出更好的检测性能，灵敏度提高了两个数量级。
