本发明公开了一种区分检测花生黑腐病菌和花生基腐病菌的双重PCR检测引物及应用，所述引物包括一对针对花生黑腐病菌的特异性引物CC‑F和CC‑R，以及一对针对花生基腐病菌的特异性引物NC‑F和NC‑R，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1～4所示。本发明所提供的双重PCR引物特异性强，建立的双重PCR体系能够从花生黑腐病菌及花生基腐病菌中扩增到相应的单一目的条带。本发明所建立的双重PCR方法可稳定、快速、特异、简便地检测花生植株中是否有引致症状难以区分的黑腐病/基腐病的单一/混合的相应病原菌，具有很好的应用前景和推广价值。
本发明公开了一种检测南洋楹溃疡病菌的巢式PCR试剂盒及方法。所述试剂盒包含一组检测南洋楹溃疡病菌的巢式PCR引物组，由第一轮扩增引物对EF‑688F、EF‑986R和第二轮特异性扩增引物对EF‑AF、EF‑AR组成；所述EF‑688F、EF‑986R、EF‑AF、EF‑AR的核苷酸序列依次如SEQ ID NO:1～SEQ ID NO:4所示。本发明试剂盒具有特异性强、灵敏度高、准确率高的优点，能在南洋楹不显症的病样中或者感染溃疡病菌量极少时准确检测出溃疡病菌，检测速度快，适用于南洋楹溃疡病菌的快速检测和监测。
本发明公开一种马尾松病死木中松材线虫的特异性检测引物、检测方法及其应用，该特异性检测引物其上游引物的核苷酸序列如SEQID NO：1所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明的引物能将松材线虫与马尾松松木、马尾松木中其他12种线虫，以及马尾松木中常见的4种真菌和10种细菌区别开来。本发明还提供一种无需从病木中分离松材线虫，直接对病木中松材线虫进行PCR扩增的方法，将病木液氮研磨后，经WLB和蛋白酶K两次裂解，纯化后得到PCR扩增用DNA模板，扩增效率达到100％，节省了分离时间，提高了检测效率。本发明的检测方法简单高效，准确性高、特异性高，可制备成试剂盒进行大规模推广。
