本发明公开了一种亮氨酸脱氢酶突变体及其在合成(S)‑邻氯苯甘氨酸中的应用，所述亮氨酸脱氢酶突变体是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列第362位点进行定点饱和突变获得的。本发明构建的亮氨酸脱氢酶突变体EsLeuDH‑F362L的活性较野生型亮氨酸脱氢酶提高了32倍，其中突变体EsLeuDH‑F362L底物邻氯苯甲酰甲酸投料量可达到500mM，产物浓度随时间的推移而逐渐升高，4.0h内可反应完成，底物转化率大于99％，产物e.e值始终保持在99.5％以上。因此亮基酸脱氢酶突变体EsLeuDH‑F362L具有工业应用前景。
本发明公开了一种醛酮还原酶KmAKR突变体、工程菌及其在不对称还原6‑氯‑(5S)‑羟基‑3‑羰基己酸叔丁酯制备6‑氯‑(3R,5S)‑二羟基己酸叔丁酯中应用，所述醛酮还原酶KmAKR突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第164位、第182位、第232位或第266位进行单突变或多突变获得的。本发明构建的突变体单位菌体酶活较对照组增加了0.24～0.30倍；全细胞下的T5015值则提高了0.6～6.3℃，最大底物投料量可达到400g/L，底物转化率大于99％，dep值始终保持在99.5％以上，时空产率达到449.2g/L/d。
