本发明公开了一种亮氨酸脱氢酶突变体及其在合成(S)‑邻氯苯甘氨酸中的应用,所述亮氨酸脱氢酶突变体是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列第362位点进行定点饱和突变获得的。本发明构建的亮氨酸脱氢酶突变体EsLeuDH‑F362L的活性较野生型亮氨酸脱氢酶提高了32倍,其中突变体EsLeuDH‑F362L底物邻氯苯甲酰甲酸投料量可达到500mM,产物浓度随时间的推移而逐渐升高,4.0h内可反应完成,底物转化率大于99%,产物e.e值始终保持在99.5%以上。因此亮基酸脱氢酶突变体EsLeuDH‑F362L具有工业应用前景。