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[发明专利]鼠伤寒沙门氏工程菌YB1在扩增噬菌体中的应用-CN202310212441.7在审
发明人： 白银山;胡智超;刘芳;陈慧芳;朱翠;刘定发;刘凯;黄文诗;曾四发 -专利权人：汕尾信民生休闲农业有限公司;汕尾市现代畜牧产业研究院
申请日： 2023-03-07 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本发明属于微生物领域，涉及噬菌体的扩增和培养，更具体涉及鼠伤寒沙门氏工程菌YB1在扩增噬菌体中的应用。本发明发现鼠伤寒沙门氏工程菌YB1在机体内不能增殖，具有较高的安全性。通过使用沙门氏菌YB1扩增噬菌体，扩增后噬菌体经电镜观察均属于有尾噬菌体目，效价与初始相近。因而，使用工程菌YB1扩增效率和培养都优于传统沙门氏菌，这为噬菌体工艺化开发提供了新的方法。
伤寒沙门工程 yb1 扩增噬菌体中的应用

[实用新型]一种用于噬菌斑计数测定的装置-CN202320398450.5有效
发明人：胡智超;白银山;朱翠;陈慧芳;刘定发;刘凯;黄文诗;曾四发 -专利权人：汕尾信民生休闲农业有限公司;汕尾市现代畜牧产业研究院
申请日： 2023-03-06 - 公布日： 2023-09-08 - 主分类号： C12M1/34 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种用于噬菌斑计数测定的装置，包括凹坑型LED灯、纸箱、高透明亚克力板，所述纸箱下部为中空结构，所述纸箱由盖板以及侧壁组成，所述纸箱盖设置有透光区，在所述透光区下部、纸箱上盖内侧固定有所述高透明亚克力板，所述亚克力板提供培养皿的承载位置。该装置没有使用新式材料，方便组合安装使用；在装配过程中也仅需用普通胶水即可实现手工的粘合连接，除此之外不需购买其他配件，成本很少，提高了装置市场推广应用前景；通过可调节光源时，根据周围环境以及纸箱的透光度不同调节出不同的光源亮度，提高了观测的准确性。
一种用于噬菌斑计数测定装置

[发明专利]纳米抗体及其制备方法与应用-CN202210298264.4有效
发明人：刘芳;辛美果;白银山 -专利权人：佛山一起思创生物科技有限公司
申请日： 2022-03-25 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C07K16/24 文献下载
摘要：本发明公开了一种纳米抗体及其制备方法与应用，涉及纳米抗体技术领域。具体的，所述纳米抗体的氨基酸核苷酸序列如SEQIDNo.1～2所示。此外，本发明还公开了一种核酸分子、一种载体、一种药物组合物和一种生物制剂。实施本发明，可以辅助对于CXCL16异常高表达的炎症性疾病进行治疗，更可以针对CXCL16高表达的肿瘤进行干预治疗。
纳米抗体及其制备方法应用

[发明专利]一种Atg12基因敲除细胞系构建方法及其应用-CN201911314261.X有效
发明人：李娟;白银山;孙铭飞;廖申权;戚南山;吴彩艳;吕敏娜;林栩慧;蔡海明;胡俊菁;于林增;肖文婉 -专利权人：广东省农业科学院动物卫生研究所
申请日： 2019-12-19 - 公布日： 2022-10-28 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种Atg12基因敲除细胞系构建方法及其应用，提供了用于敲除人结肠癌细胞Atg12基因的SgRNA、构建CRISPR‑Cas9载体，以及构建Atg12基因敲除细胞系的方法。本发明筛选获得的Atg12基因靶点，从多个靶点中优选出来的活性最好的靶点，高效靶向Atg12基因，而且对F2～F5代细胞敲除分析，敲除效率很高，位点均已被切割断，100％成功敲除；蛋白表达分析无Atg12蛋白，此方法可广泛应用于Atg12基因功能研究和药物研发等方面。
一种 atg12 基因细胞系构建方法及其应用

[发明专利]禽肠道上皮细胞及其制备方法和应用-CN202210521390.1在审
发明人：孙铭飞;陈慧芳;李娟;白银山;戚南山;潘晓婷;廖申权;吕敏娜;林栩慧;蔡海明;胡俊菁 -专利权人：广东省农业科学院动物卫生研究所
申请日： 2022-05-13 - 公布日： 2022-08-12 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明涉及一种禽肠道上皮细胞及其制备方法和应用。一种禽肠道上皮细胞，来源于禽胚小肠段细胞，基因组中含有SV40的大T抗原基因。本发明研究人员发现，在禽胚小肠段细胞基因组中整合SV40的大T抗原基因能够使得禽肠道上皮细胞在体外能长期培养，能够连续培养超过6个月，传代超过30代，并且基因表达稳定，呈现肠道上皮细胞的特异性特征，表达肠道上皮细胞标志分子，适用于禽类肠道健康的相关研究和生物制品的开发。
肠道上皮细胞及其制备方法应用

[发明专利]一种使精原干细胞高效向神经细胞分化的培养体系和方法-CN201810841392.2有效
发明人： 白银山;朱翠;刘珊珊;冯美莹;詹小舒;王丙云 -专利权人：佛山科学技术学院
申请日： 2018-07-26 - 公布日： 2022-07-05 - 主分类号： C12N5/079 文献下载
摘要：本发明属于细胞生物学领域，涉及精原干细胞(SSCs)向神经细胞分化的体外高效培养方法。本发明通过多聚赖氨酸处理培养器皿，增加SSCs贴壁能力，添加神经因子B27和N2，以及去除生长因子条件下，结果显示SSCs可高效向神经细胞分化。本发明建立的方法适合流程化操作、重复性高、成功率高、操作简单，无需特殊化条件就能达到效果，可极大的节省时间和试验材料，以往多应用多能干细胞进行神经细胞诱导，存在诱导的不彻底性。本发明应用SSCs，对比胚胎干细胞(ESCs)显示出SSCs向神经细胞分化高效性和彻底性，本研究结果显示SSCs诱导效果明显具有优势。可能成为应用到修复神经组织损伤的一种更优化的干细胞来源，成为一个新的技术方案。
一种使精原干细胞高效神经细胞分化培养体系方法

[发明专利]一种条件性诱导小鼠精原细胞Tet3基因敲除细胞系及其构建方法-CN201810801881.5有效
发明人： 白银山;朱翠;刘珊珊;冯美莹;詹小舒;王丙云 -专利权人：佛山科学技术学院
申请日： 2018-07-19 - 公布日： 2022-05-06 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，涉及一种敲除小鼠Tet3基因的SgRNA导向序列、条件性诱导小鼠精原细胞Tet3基因敲除细胞系及其构建方法及其应用，基因编辑脱靶效应是困扰基因编辑技术应用的一个重要方面，本专利筛选获得的Tet3基因靶点是以整个小鼠基因组筛选出唯一靶向序列的靶点，基因组内无其他类似序列，所以理论上不存在脱靶效应，同时采用诱导型敲除的方法，及时关闭Cas9蛋白表达，也可以有效防止脱靶产生，当添加Dox 24h后小鼠精原细胞基因组得到97％以上敲除，Dox诱导前后作为很好的试验组和对照组，本发明所建立的细胞系和方法可以广泛应用于Tet3和其他基因功能研究。
一种条件诱导小鼠细胞 tet3 基因细胞系及其构建方法

[发明专利]一种小鼠精原干细胞体外向精子高效分化的方法-CN201811368066.0有效
发明人： 白银山;朱翠;刘珊珊;冯美莹;詹小舒;王丙云 -专利权人：佛山科学技术学院
申请日： 2018-11-16 - 公布日： 2022-03-08 - 主分类号： C12N5/076 文献下载
摘要：本发明公开一种小鼠精原干细胞体外向精子高效分化的方法，本专利根据睾丸发育特点，利用性成熟前小鼠睾丸组织细胞为精原干细胞分化精子的微环境，建立了促进精原干细胞体外高效向精子分化方法。本发明建立的小鼠精原干细胞体外向精子高效分化的方法，是对比了不同阶段小鼠睾丸组织细胞状态和组成比例，通过实验方法最后优选出高效促进精原干细胞体外向精子分化的方法，该方法操作简单，重复性好，比目前建立精原干细胞体外分化精子的方法更具有优势，是精原干细胞体外分化研究技术的新突破，在后期科研和相关应用中有广泛的应用前景，同时对于其他物种精子体外分化和人类辅助生殖的研究也具有重要的参考价值。
一种小鼠精原干细胞体外向精子高效分化方法

[实用新型]一种牛羊饮水槽系统-CN202022571348.X有效
发明人：乔慧斌;白银山 -专利权人：乔慧斌;白银山
申请日： 2020-11-09 - 公布日： 2021-08-20 - 主分类号： A01K7/02 文献下载
摘要：本实用新型提供一种牛羊饮水槽系统，包括提水泵、进水管、加热水箱、水温传感器、第一电磁阀、出水管、饮水槽、第一液位计、第二电磁阀与排水管；提水泵的出水端通过进水管连接至加热水箱，加热水箱包括加热器，其内设置有水温传感器，加热水箱通过出水管连接至饮水槽，出水管上设置有第一电磁阀，饮水槽内设置有第一液位计，饮水槽连接排水管，排水管上设置第二电磁阀；还包括远程控制终端、无线传输装置、图像采集装置与控制装置。用户通过远程控制终端控制进出水，住在城市里也可以给牲畜喂水加热水箱将水加热到摄氏10度以上，避免牛羊在冬季喝着接近摄氏零度的凉水，利于牲畜膘情，极大地增加了经济效益。还避免饮水槽里剩余的水就会结成冰。
一种牛羊饮水系统

[发明专利]一种小鼠精原干细胞高效重编程的方法及应用-CN201811368060.3有效
发明人： 白银山;朱翠;刘珊珊;冯美莹;詹小舒;王丙云 -专利权人：佛山科学技术学院
申请日： 2018-11-16 - 公布日： 2021-08-03 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本发明公开一种促进小鼠精原干细胞重编程的方法及应用，该方法利用RNA干扰技术敲减小鼠精原干细胞Tet3的基因表达，结果实现促进了多能因子的表达，再进行重编程诱导时，结果显示获得多能干细胞数量显著增加。本发明建立起一套小鼠精原干细胞高效重编程可行性方案，通过该方案可实现小鼠精原干细胞高效重编程，所需时间短，操作简单，且重复性好，成功率高，无需特殊化条件就能达到效果，极大的节省时间和试验材料，相较于以往小鼠精原干细胞重编程诱导方案具有明显优势。
一种小鼠干细胞高效编程方法应用

[实用新型]一种抗肿瘤实验用肿瘤细胞三维培育装置-CN202021864808.1有效
发明人：师如意;董金垚;张燕燕;刘秀中;王俊田;陈允清;张国栋;王健;贾丽娟;孙小芳;贾志武;白银山;吴嫦丽;孙丽婷;郭敏;张敏;胡晓玲;翟元芳 -专利权人：山西医科大学
申请日： 2020-08-31 - 公布日： 2021-05-28 - 主分类号： C12M3/06 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种抗肿瘤实验用肿瘤细胞三维培育装置，包括外壳体；所述外壳体的外侧面前端设有控制开关组和触控显示器，外壳体的内侧面中部设有培育舱，培育舱的上端面为敞开设置，培育舱的内侧面底部设有第二电动伸缩杆，本抗肿瘤实验用肿瘤细胞三维培育装置，可以在降低培育中的癌细胞感染的情况下，实时观测癌细胞的生长，同时又可以很方便的进行培养液更换，气动伸缩杆的设置方便了密封罩的开启与关闭，触控显示器的设置方便了癌细胞的观测，通过气泵可以对外壳体内部的空气进行快速交换，通过储液箱可以对培养液进行储存，通过纳米级过滤网可以对培育中的癌细胞支撑，废液箱的设置方便了废液的收集。
一种肿瘤实验细胞三维培育装置

[发明专利]一种诱导型精原细胞Tubb4b基因敲除细胞系的构建方法-CN202010456916.3在审
发明人：冯美莹;张守全;白银山;王凯;卫恒习;陈云 -专利权人：肇庆学院
申请日： 2020-05-26 - 公布日： 2020-08-18 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，涉及一种敲除小鼠Tubb4b基因的SgRNA导向序列、诱导精原细胞Tubb4b基因敲除细胞系及其构建方法。本发明提供了高效的Tubb4b基因敲除导向序列，敲除效率高，达到理想效果。本发明所建立的细胞系及其构建方法可以广泛应用于Tubb4b和相关基因功能研究和产品开发应用。
一种诱导型精原细胞 tubb4b 基因细胞系构建方法

[发明专利]一种利用FACT Ⅲ微载体体外扩增精原干细胞的三维动态培养方法-CN202010314524.3有效
发明人：张秀娟;陈金平;白银山;张守全;王承民 -专利权人：广东省生物资源应用研究所
申请日： 2020-04-21 - 公布日： 2020-07-31 - 主分类号： C12N5/076 文献下载
摘要：本发明提供了一种利用FACT Ⅲ微载体体外扩增精原干细胞的三维动态培养方法。该方法利用转壁氏生物反应器（RCCS）构建三维动态培养环境，选择FACTⅢ微载体为支架材料，建立了能支持小鼠睾丸SSCs体外快速增殖和维持其未分化特性的三维动态培养体系。该三维动态培养体系下，SSCs在RCCS中培养一周后，表现出极优的增殖效果，尤其在体外培养17‑22d获得SSCs得到快速增殖，增殖的SSCs细胞仍保留着其未分化状态的生物学特性和功能。本发明方法具有操作简单，培养成本低，重复性好，培养成功率高，无需传代，可避免饲养层细胞污染等明显优势，提供了一种可靠的SSC体外培养技术方案。
一种利用 fact 载体体外扩增干细胞三维动态培养方法

[发明专利]一种快速高效筛选SgRNA靶向DNA序列的方法-CN201810135075.9有效
发明人：朱翠;白银山;蒋宗勇;陈庄 -专利权人：广东省农业科学院农业生物基因研究中心
申请日： 2018-02-09 - 公布日： 2020-06-26 - 主分类号： C12Q1/6811 文献下载
摘要：本发明公开了一种快速高效筛选SgRNA靶向DNA序列的方法，该方法基于SgRNA靶向DNA序列框架，设计多条SgRNA靶向引物；然后以SgRNA载体为模板，通过PCR的方法获得hU6启动子序列+靶向SgRNA序列的DNA片段；接着将其转染到稳定表达Cas9细胞中，48小时后提取基因组；再通过PCR扩增获得含SgRNA靶点的基因组DNA片段，经双向测序分析，从而筛选SgRNA靶向DNA序列切割活性位点。本发明的筛选方法极大地缩短了筛选基因靶点时间，并降低了Crispr‑Cas9系统的操作难度，具有操作性强、重复性好、成功率高、使用简单方便、可流程化操作等优点，适合试剂盒的研发。
一种快速高效筛选 sgrna 靶向 dna 序列方法

[发明专利]一种猪睾丸间质祖细胞的长期培养方法-CN201610087719.2有效
发明人： 白银山;张守全;冯美莹;朱翠;卫恒习;李莉 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2016-02-16 - 公布日： 2020-01-21 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪睾丸间质祖细胞PLCs的长期培养方法，其中包括体外分离、检测和分化，利用猪PLCs的体外增殖培养基培养仔猪睾丸成纤维细胞5～8天后，得到PLCs克隆集落；利用猪PLCs的分化培养基进行培养后，第3天PLCs开始向成熟睾丸间质细胞分化，然而在增殖培养基中培养，在体外最长维持时间达到了6个月。本发明首次建立起一套成熟的猪PLCs的分离、培养、检测和分化的完善方法，最终确立的不同体外培养体系可以实现控制PLCs在体外维持增殖和分化。本发明的方法对于体外研究PLCs生物学性质，以及药物研发和疫苗生产等方面应用具有潜在应用价值。
种猪睾丸间质细胞长期培养方法

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